數字PCR實現更精確的GMO分析
根據《PLoS One》上發表的一項最新成果，微滴式數字PCR（ddPCR）能精確定量轉基因生物中的轉基因拷貝數，且成本比定量PCR（qPCR）更低。 這篇文章的通訊作者是斯洛文尼亞國立生物學研究所的Dany Morisset。他認為，這項新研究是一個重要的案例研究，說明了微滴式數字PCR可用于GMO的準確定量。“我們嘗試用最嚴格的國際規則來驗證它。” 目前，qPCR是評估GMO的標準方法，但它并不太適合食品，因其含有分子抑制劑，可能干擾DNA擴增，導致不準確的拷貝數預測。 但一些研究人員認為，這不會對數字PCR造成困擾。數字PCR分析是將樣品作大倍數稀釋和分液，直至每個樣品中所含有的待測分子數不會超過1個，再將所有樣品在相同條件下進行PCR擴增，并對發生了擴增反應的樣品逐個進行計數。盡管數字PCR的概念已出現十多年，但成本以及缺乏驗證都減緩了它的采用速度。 在這項研究中，Morisset及其同事評估了多個不同樣品中......閱讀全文
PCR基因擴增
實驗概要PCR擴增目標DNA片段。實驗原理多聚酶鏈式反應（polymerase chain reaction, PCR）基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性、退火、延伸三個基本反應步驟構成。? 1. 模板DNA的變性：模板DNA經加熱至93℃
PCR基因擴增2
（4）引物的熔點溫度（Tm值）要適當。Tm值與引物的堿基組成和長度有關；PCR引物的GC/AT應與要擴增的模板DNA相當或略高些。一般熔點溫度以大于55℃為宜。（5）引物的3，末端必須與模板嚴格互補，而5，末端的要求可靈活些。（6）目前在引物選擇中已廣泛應用計算機軟件，從EMBL或Genebank中
PCR基因擴增1
一、實驗原理 聚合酶鏈式反應（Polymerase Chain Reaction，PCR）是一種體外核酸擴增系統，其原理類似DNA分子的天然復制過程，是將在待擴增的DNA片段和與其兩側互補的兩個寡聚核苷酸引物，經變性、退火和延伸若干個循環后，DNA擴增 2n 倍。該技術已成為分子生物學中
PCR基因擴增實驗
[實驗目的]通過本實驗學習PCR反應的基本原理與實驗技術。[實驗原理]多聚酶鏈式反應（polymerase chain reaction,PCR）的原理類似于DNA的天然復制過程。在待擴增的DNA片段兩側和與其兩側互補的兩個寡核苷酸引物，經變性、退火和延伸若干個循環后，DNA擴增2n倍。1．變性：加
PCR基因擴增原理
基因擴增技術（PCR）聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction簡稱PCR）又稱無細胞分子克隆系統或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增法，是基因擴增技術的一次重大革新。可將極微量的靶DNA特異地擴增上百萬倍，從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力，能檢測單分子DNA或對每1
淺談PCR基因擴增儀
?聚合酶鏈式反應，簡稱PCR。聚合酶鏈式反應，其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應組成一個周期，循環進行，使目的DNA得以迅速擴增，具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。生命科學儀器
PCR基因擴增儀簡介
聚合酶鏈式反應簡稱PCR（英文全稱：Polymerase Chain Reaction）聚合酶鏈式反應 聚合酶鏈式反應，簡稱PCR。聚合酶鏈式反應，其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應
基因擴增梯度PCR儀
? ? 聚合酶鏈反應（Polymerase Chain Reaction ,簡稱PCR）是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。 它具有特異、敏感、產率高、 快速、 簡便、重復性好、易自動化等突出優點；能在一個試管內將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀
目的基因的PCR擴增
實驗概要進行目的基因的PCR擴增實驗原理PCR（聚合酶鏈式反應）是一種選擇性體外擴增DNA或RNA的方法。它包括3個基本步驟：⑴變性：目的雙鏈DNA片段在94℃下解鏈；⑵退火：兩種寡核苷酸引物在適當溫度（50℃左右）下與模板上的目的序列通過氫鍵配對；⑶延伸：在Taq ? DNA聚合酶合成DNA的最適
PCR擴增制備目的基因
1．目的學會PCR操作的基本技術。2．原理是將待擴增的DNA模板加熱變性，與其兩側互補的寡聚核苷酸引物復性，然后經過耐熱的DNA聚合酶延伸。再進入下一輪變性—復性—延伸的循環，n次循環后DNA可被擴增（1+X）n倍。其中
PCR基因擴增儀簡介
??分類：? ? PCR儀的種類總體來說可以分為兩大類：PCR擴增儀和實時熒光定量PCR儀。用途：? ? PCR儀是醫學，農業，食品，醫藥，檢驗檢疫等領域的實驗室常規儀器設備。PCR儀原理：? ? 為雙鏈dna在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在dna聚合酶的作用下，以單鏈為模版，根據堿基互補配對
PCR基因芯片上熒光PCR反應的研究
基因芯片技術具有快速多樣、微型化和自動化等特點在生物醫學領域廣泛的應用。但由于其基本原理是基于核酸雜交技術，有著內在的缺陷，實驗的敏感性和重復性都存在一定問題。核酸雜交較適合于檢測基因的表達，不易檢測基因組DNA的基因的重排，突變和缺失。而大多數腫瘤性疾病和一些遺傳變異和表型的改變與后者有關。為了解
基因擴增儀PCR產品特點
優化的溫控模式，升降溫速度快，溫控精確，熱效率高，儀器壽命更長。一機多用：兼容0.2ml，0.5ml管，96標準微孔板。無油熱蓋調節方便，徹底防止蒸發。儀器操作簡便，人機界面友好。體積小，重量輕，節省實驗室空間。
PCR基因擴增儀實驗原理
技術應用實現快速高效均衡擴增檢測由光開關陣列、自聚焦透鏡和尾纖準直器及變增益微光O/E裝置組成的MEMS有機整體，在以16位單片機為核心的電控裝置管理下，能在毫秒級時間內完成多個標本快速均衡掃描檢測，避免了機械掃描方式或CCD掃描方式引起的時間滯后或漸暈誤差。實現標準樣本的PCR熱循環擴增及高通量實
PCR基因擴增儀的用途
西安天隆科技有限公司DTC-3G型PCR基因擴增儀適用于分子生物學、醫學、食品工業、司法科學、生物技術、環境科學、微生物學、臨床診斷、流行病學、遺傳學、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達等領域以聚合酶鏈式反應（Polymerase Chain Reaction , PCR）為特征的、以檢測D
基因表達－RTPCR之我見
?本文討論的范圍包括RNA酶保護分析，northernblot，原位雜交，半定量RT-PCR和定量RT-PCR。本文不談具體protocol，是因為各種書籍和kit說明書上都有，主要說一些原則，而且大部分是失敗和成功的經驗，還有小組討論結果以及各種書里七零八落看的內容，希望對大家有用。基因表達的定義
用PCR進行基因分型
與許多一次做數百塊Southern blots的研究人員一樣，我第一次用PCR做基因分型（genotyping）時覺得見效很快，不再需要等幾天才能看到結果，不再需要DNA顯微圖像或者操作紫外線了。隨著技術的不斷進步，RCR使基因組學和轉錄組學發生了翻天覆地的變化，甚至隨著免疫PCR的普及開始進軍蛋白
應用PCR技術擴增Hbβ基因
復習細胞內DNA復制條件和過程。 一、目的 1：學習PCR技術的基本原理 2：掌握從全血中制備DNA的方法‘ 3：掌握應用PCR擴增Hbβ基因的基本操作 4：熟悉Hb基因結構 二、原理 1：PCR擴增的原理 聚合酶鏈反應—PCR是一種體外基因擴增技術，是在引物和四種脫氧核苷三磷酸存在下，利用DNA
關于PCR內參基因選擇策略
關于內參基因的選擇很多初級的實驗人員很少會去思考這個問題，因為擺在面前的只有兩種選擇，β-actin和GAPDH，甚至在很多人長期的觀念中對于內參的認知也僅僅停留在是一個表達量相對較高較穩定的看家基因，對于分子層面相對表達量的一個重要參照而已，至于為什么要選這兩種，還有沒有其他的內參，人們的回答往往
關于PCR內參基因選擇策略
關于內參基因的選擇很多初級的實驗人員很少會去思考這個問題，因為擺在面前的只有兩種選擇，β-actin和GAPDH，甚至在很多人長期的觀念中對于內參的認知也僅僅停留在是一個表達量相對較高較穩定的看家基因，對于分子層面相對表達量的一個重要參照而已，至于為什么要選這兩種，還有沒有其他
PCR基因芯片上熒光PCR反應的研究（三）
2.2 PCR-SSCP并測序分析發現X連鎖遺傳性鐵幼粒細胞貧血家系ALAS2基因第5外顯子基因異常 分析兩兄弟及其父母、外祖父母的ALAS2基因，兩兄弟ALAS2基因第5外顯子的PCR擴增產物有與正常臍血不同的單鏈電泳條帶，他們的父親和外祖父有與正常臍血相同的單鏈電泳條帶，而他們的母親和外祖母
PCR基因芯片上熒光PCR反應的研究（一）
郝麟1） ?朱平1）＊ ?于曉梅2） ?張大成2） ?趙新生3） ? 歐陽賤華3 （1）北京大學第一醫院 北京 100034； 2）北京大學微電子學研究所 北京100871； 3）北京大學化學與分子工程學院 ? ?北京100871） 目的: 我們設計一種含有大量微反應池的PCR基因芯片，能對基因的重
PCR基因芯片上熒光PCR反應的研究（四）
2.5 用SYBR Green熒光染料做常規實時定量PCR分析HLA ?應用位點特異性PCR(SCP)方法從20例正常人中確定2位HLAA2（編號1、2）與2位HLA非A2（編號3、4）。 在GeneAmp ?SDS 5700檢測SYBR熒光染料4步位點特異PCR反應（圖4）SYBR熒光染料PCR反
PCR基因芯片上熒光PCR反應的研究（二）
1.3.2 ?PCR-SSCP方法分析按照我室常規進行。 1.3.3 ?Taqman熒光探針 以發現的ALAS2基因第五外顯子點突變為中心設計，序列如下： 5’ （熒光集團）FAM-CAAGATCATAGAGAAGAAAC- TAMRA（淬滅集團） 3’，設計Taqman熒光PCR反應的上下
逆轉錄PCR(RTPCR)擴增基因特異片段
逆轉錄PCR(RT-PCR)擴增基因特異片段 一、實驗原理RT-PCR是將RNA的反轉錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈式擴增（PCR）相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成?cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR技術靈敏而且用途廣泛，可用于檢測細胞中基因表達水平，細胞中R
PCR基因芯片上熒光PCR反應的研究（五）
3．討論 ?隨著近年基因芯片技術的發展，研究者逐漸認識到基于核酸雜交原理的傳統基因芯片缺陷與應用的局限性。隨著PCR技術的進展，特別是熒光定量PCR技術的出現PCR技術已成為生物醫學領域中應用最廣泛的技術。如果一種基因芯片能直接進行PCR反應,而且能夠同時擴增大批可能發生變異的基因顯然會有廣泛
基因測序為何代替不了基因芯片以及PCR？
新一代基因測序技術在最近五年飛速發展，這吸引了不少人的目光，做為精準醫療的基礎，之前市場上的報告都集中關注于基因測序。于是原本紅火的基因芯片技術沉寂了不少。早些 年，有人甚至預言，芯片技術面臨消亡。誠然，在某些方面，新一代測序讓芯片失色，但就 很多應用而言，芯片仍然是不可取代的。 芯片和高通
基因擴增儀PCR的原理作用
聚合酶鏈式反應，簡稱PCR。聚合酶鏈式反應，其英文Polymerase Chain Reaction(PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應組成一個周期，循環進行，使目的DNA得以迅速擴增，具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。
用PCR進行基因分型2
質譜法原則上，添加到引物末端的核苷能夠直接依據質量，利用通過基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜（matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectroscopy，MALDI-TOFMS）直接檢測出來，這是一種不需標
PCR基因擴增儀的產品特點
優化的溫控模式，升降溫速度快，溫控精確，熱效率高，儀器壽命更長。 一機多用：兼容0.2ml，0.5ml管，96標準微孔板。 無油熱蓋調節方便，徹底防止蒸發。 儀器操作簡便，人機界面友好。 體積小，重量輕，節省實驗室空間。