中國科大等揭示SETD3蛋白作為βactin組氨酸甲基化酶的結構
近日，中國科學技術大學教授許超課題組與波蘭華沙大學Jakub Drozak實驗室合作，解析了SETD3與β-actin多肽的高分辨復合物晶體結構，并結合酶活實驗揭示了肌動蛋白（Actin）第73位組氨酸（His73）的N3位甲基化的作用機制，相關成果于2月20日以Structural insights into SETD3-mediated histidine methylation on β-actin 為題在線發表于eLife 雜志。 細胞骨架主要有微管、微絲和中間纖維三種成分，其中微絲在細胞形態維持、細胞的運動、細胞內物質運輸等細胞內重要生命活動中發揮作用。微絲主要由Actin通過聚合形成，Actin高度保守，是一類可以結合并水解ATP的蛋白質，β-Actin蛋白質第73位組氨酸甲基化于五十多年前就被發現在絕大多數真核細胞中廣泛存在，并通過Actin水解ATP后延遲釋放ADP，來調控微絲聚合及功能。 SETD3是S......閱讀全文
中國科大等揭示SETD3蛋白作為βactin組氨酸甲基化酶的結構
近日，中國科學技術大學教授許超課題組與波蘭華沙大學Jakub Drozak實驗室合作，解析了SETD3與β-actin多肽的高分辨復合物晶體結構，并結合酶活實驗揭示了肌動蛋白（Actin）第73位組氨酸（His73）的N3位甲基化的作用機制，相關成果于2月20日以Structural insig
Protein－purification;－actin
Protein purification; actin ? ? ?Overview?? ACTINThe most abundant muscle and non-muscle cytoskeletal protein. MW 42 kDa, 374/375 amino acids; various
Actin－Capture－Assay
David AmbergDialyze purified GST fusion proteins and actin into PBS + 1mM MgCl2 .Mix 5ug actin into 50ul total volume binding buffer.Mix 5ug GST-fusio
大鼠Actinb(Actinb)ELISA檢測法
大鼠Actin-b(Actin-b)ELISA試劑盒?(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)?原理本實驗采用雙抗體夾心?ABC-ELISA法。用抗大鼠?Actin-b?單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的?Actin-b與單抗結合，加入生物素化的抗大鼠Actin-b，形成免疫復合物連接在
Actin－StainingActin－Staining－Protocol
實驗概要Invitrogen ?offers several fluorescent and biotinylated phalloidin and phallacidin ?derivatives for labeling F-actin. These phallotoxins, isolated
Isolation－of－Actin－and－Myosin－Filaments
LEVEL IIIMaterialsRelaxing Solution0.1 M KCl0.001 M MgCl5 mM ATP0.016 M NaHPONaHPOAdjust pH to 7.30.05 M Sodium phosphate buffer, pH 7.00.001 M EDTA (
βActin抗體推薦—Abbkine高效價的BetaActin內參抗體
Actin即肌動蛋白，是細胞的一種重要骨架蛋白。Actin大致可分為六種，其中四種是不同肌肉組織特異性的，其余兩種廣泛分布于各種組織中，包括 β-actin和γ-non-muscle actin。β-actin作為內參是得到了公認的，這是針對大多數組織和細胞來說的，它廣泛分布于細胞漿內，表達
常用的βactin－引物序列
human actin f ctc cat cct ggc ctc gct gt?human actin r gct gtc acc ttc acc gtt cc?product size:268?rabbit actin r agt gcg acg tgg aca tcc g?rabbit act
Isolation－of－Nonmuscle－Actin
General Preparation1. Prepare buffers and have them cold. Make 50X stock of Buffer G and dilute as needed from frozen aliquots of 50X Buffer G.1X Extr
常用的βactin－引物序列
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Preparation－of－Conventional－Actin－from－Skeletal－Muscle
Modified from Spudich & Watt, 1971, JBC 246:4866.1. Mix 20 ml buffer G with each gm of muscle acetone powder. Extract with stirring on ice for 30 min.
小鼠βactin基因的克隆表達（3）
（2）質粒的提取及酶切鑒定分析 ? 質粒的提取按照質粒提取試劑盒的操作步驟進行，然后進行雙酶切鑒定。 ? 管號 ① ② 質粒DNA
如何挑選合適的βActin內參抗體？
如何選擇合適的β-Actin抗體？ 現在市場上對于內參抗體選擇是比較多，但是也需要遵循一定的原則，那怎么去找到適合自己實驗的β-Actin抗體呢？首先，我們需要考慮目的蛋白的大小，我們推薦內參要與檢測的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上，因此你需要根據你目的檢測蛋白的分子量來選擇合適的內參，由于β-
小鼠βactin基因的克隆表達（4）
實驗步驟：（1）誘導靶蛋白表達分別挑取對照菌和重組菌1~2個菌落，接入5ml含Amp（30μg/ml）的LB培養液，37℃振蕩培養過夜。取5ml過夜培養物接入500ml含Amp（30μg/ml）的LB培養液，37℃振蕩培養2h以上，至對數中期（A550=0.5~1.0）。向誘導管中加入IPTG使其濃
小鼠βactin基因的克隆表達（2）
實驗步驟： ? （1）目的基因與表達載體的連接反應： ①表達載體和目的片段的酶切 ? 管號 ① ② pGEX 4T-1
小鼠βactin基因的克隆表達（1）
動物組織RNA的提取實驗目的：掌握由動物組織中提取總RNA的方法實驗原理：Trizol試劑是一個包含酚、異硫氰酸胍和SDS的單相酸性溶液，其在裂解細胞的同時抑制RNase的活性，隨后加入氯仿，酚會大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同，造成DNA分布在下層的氯仿酚溶液中，RNA
生物物理所解析線蟲精氨酸對稱雙甲基化酶的晶體結構
線蟲PRMT5晶體結構示意圖，其活性單位為同源二聚體 12月5日，美國《國家科學院院刊》(PNAS) 在線發表了中科院生物物理研究所許瑞明、龔為民、劉迎芳研究組以及遺傳發育所鮑時來課題組合作的最新研究成果Structural Insights into Prote
Fluorescence－Procedures－forthe－Actin－andTubulin－Cytoskeleton－in－Fixed－Cells
Fluorescence Procedures for the Actin and Tubulin Cytoskeleton in Fixed CellsActin: Louise CramerTubulin: Arshad DesaiGeneral StrategyWe typically wor
肌動蛋白（Actin）動力學調節機制
細胞骨架的定義分為狹義和廣義兩種，前者是微絲，微管和中間纖維的總稱，它們存在于細胞質內，又被稱為“胞質骨架”。后者還包括細胞外基質（extracellular matrix）、核骨架（nucleoskeleton）和核纖層（nuclear lamina）。細胞骨架是細胞內運動，細胞器固定，細胞外型維
Nature子刊支招：禁止單一蛋白表達就能跟感冒徹底說再見
說起感冒，大家都不會陌生。當出現打噴嚏、鼻塞、咽喉疼痛、咳嗽、發熱等癥狀時，就要意識到病毒已經入侵你的身體。生活中細菌病毒無處不在，稍不留神便中招感冒，那有什么辦法能夠保護自身免受病毒的侵害嗎？圖片來源：Pixabay 近日，美國斯坦福大學和加州大學舊金山分校的研究人員共同領導的一項研究發現：
DNA甲基化酶的分類
基因組中DNA的甲基化模式是通過DNA甲基轉移酶實現的。DNA甲基化酶分為2類，即維持DNA甲基化轉移酶（Dnmtl或維持甲基化酶）和從頭甲基化酶。根據序列的同源性和功能，真核生物DNA甲基化轉移酶又分為4類：Dnmtl/METl、Dnmt2、CMTs和Dn-mt3。DnmtliiMETl類酶參與C
小鼠β肌動蛋白(βactin)酶聯免疫分析（ELISA）
小鼠β-肌動蛋白(β-actin)酶聯免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的：本試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關液體樣本中β-肌動蛋白(β-actin)含量。實驗原理：????本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠β-肌動蛋白(β-actin)水平。用純化的小鼠
RTPCR內參基因選擇：除了βactin還能用什么？
Q1： 要做real-time pcr，而該種的β-actin未確定，我知道一般用持家基因作內參，但似乎其他基因各有缺點，有的作者用他們做內參時被SCI雜志要求用兩個內參以證實，我想知道的是除了β-actin，哪個基因是SCI公認的內參基因(不用作兩個內參了)?A1： 28S和18S rRNA甘油醛
RNA甲基化酶的基本信息
中文名稱RNA甲基化酶英文名稱RNA methylase定 義編號：EC 2.1.1.-。催化RNA中堿基甲基化反應的酶。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），酶（二級學科）
DNA甲基化酶的基本信息
大多數限制性內切酶常常伴隨有1~2種修飾酶，即DNA甲基化酶，它能保護細胞自身的DNA不被限制性內切酶破壞。限制修飾系統（R-M系統）Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中的甲基化酶可使細菌DNA分子中的胞嘧啶和腺嘌呤發生甲基化，形成5‘-甲基胞嘧啶和6‘-甲基腺嘌呤.在DNA重組實驗中，常用的甲基化酶屬于Ⅱ型，它與相應的
DNA甲基化酶的主要類型介紹
基因組中DNA的甲基化模式是通過DNA甲基轉移酶實現的。DNA甲基化酶分為2類，即維持DNA甲基化轉移酶（Dnmtl或維持甲基化酶）和從頭甲基化酶。根據序列的同源性和功能，真核生物DNA甲基化轉移酶又分為4類：Dnmtl/METl、Dnmt2、CMTs和Dn-mt3。DnmtliiMETl類酶參與C
DNA甲基化酶的作用和種類
DNA甲基化酶分為2類，即維持DNA甲基化轉移酶（Dnmtl或維持甲基化酶）和從頭甲基化酶。根據序列的同源性和功能，真核生物DNA甲基化轉移酶又分為4類：Dnmtl/METl、Dnmt2、CMTs和Dn-mt3。DnmtliiMETl類酶參與CG序列甲基化的維持。CMTs類酶僅發現在植物中，主要特征
保持甲基化酶的基本信息
中文名稱保持甲基化酶英文名稱maintenance methylase定 義編號：EC 2.1.1.37。催化半甲基化的DNA雙鏈分子內與MeCpG配對的GpC序列中的胞嘧啶甲基化，從而使甲基化在DNA復制中得以連續保持的酶。Ⅰ型、Ⅱ型DNA甲基化酶均能以半甲基化DNA為底物，而Ⅲ型DNA甲基化酶