電鏡樣品科普貼:常見樣品制備技術
電鏡樣品制備技術較復雜,種類也較多,分為普通樣品制備技術和特殊樣品制備技術。這里簡單介紹幾種常用的樣品制備技術。 1、超薄切片技術 超薄切片技術(ultramicrotomy)是透射電鏡樣品制備方法中最基本的一種。由于電子束穿透能力的限制透射電鏡觀察的樣品必須很薄,普通光鏡切片厚度約3~5μm,而透射電鏡切片厚度則要求在50~80nm左右。這種薄切片稱為超薄切片。超薄切片技術包括:取材、固定、脫水、浸透、包埋、切片及染色。 電鏡樣品采用戊二醛和鋨酸雙重固定,用酒精或丙酮脫水,環氧樹脂進行包埋, 超薄切片機切片,采用重金屬如鈾和鉛進行染色以增加細胞結構間的反差。 2、負染色技術 負染色技術(nagtive stain technique)又稱陰性染色,是透射電鏡樣品制備技術中的一種。此技術是指通過重金屬鹽在樣品四周堆積而加強樣品外周的電子密度,使樣品顯示負反......閱讀全文
電鏡與樣品制備技術
電鏡樣品取材方法 1 動物及人體組織的取材 動物組織的取材,應在麻醉(1%戊巴比妥鈉按5ml/kg體重腹腔注射)或斷頭急性處死,解剖出所需器官,用解剖剪刀剪取一小塊組織,放在干凈的紙板上,滴一滴冷卻的固定液,用新的、無油污鋒利的(雙面)刀片將材料切成大約1㎜寬,2~3㎜長的小塊,從中挑選損傷小的小條
電鏡樣品科普貼:常見樣品制備技術
? 電鏡樣品制備技術較復雜,種類也較多,分為普通樣品制備技術和特殊樣品制備技術。這里簡單介紹幾種常用的樣品制備技術。? 1、超薄切片技術? 超薄切片技術(ultramicrotomy)是透射電鏡樣品制備方法中最基本的一種。由于電子束穿透能力的限制透射電鏡觀察的樣品必須很薄,普通光鏡切片厚度約3~5μ
掃描電鏡樣品制備方法
制備方法化學方法制備樣品的程序通常是:清洗→化學固定→干燥→噴鍍金屬。清洗某些生物材料表面常附血液、細胞碎片、消化道內的食物殘渣、細菌、淋巴液及粘液等異物,掩蓋著要觀察的部位,因而,需要在固定之前用生理鹽水或等滲緩沖液等把附著物清洗干凈。亦可用5%碳酸鈉沖洗或酶消化法去除這些異物。固定通常采用醛類(
透射電鏡樣品制備
透射電鏡樣品制備 一、樣品要求 1.粉末樣品基本要求 (1)單顆粉末尺寸最好小于1μm; (2)無磁性; (3)以無機成分為主,否則會造成電鏡嚴重的污染,甚至掉高壓; 2.塊狀樣品基本要求 (1)需要雙噴減薄或離子減薄,獲得幾十納米的薄區才能觀察; (2)如晶粒尺寸小于1μm,也
掃描電鏡樣品制備程序
掃描電鏡樣品制備程序? ? 一、固定:戊二醛-鋨酸雙固定法?? 1.2.5%戊二醛(試劑1)固定4小時(或者過夜)? 2.0.1M?磷酸緩沖液(試劑2)清洗3次,每次15-30分鐘?3.1%鋨酸(試劑3)固定2-4小時? 4.0.1M?磷酸緩沖液(試劑2)清洗3次,每次15分鐘? 二、脫水:乙醇系列
掃描電鏡樣品制備程序
掃描電鏡樣品制備程序? ? 一、固定:戊二醛-鋨酸雙固定法?? 1.2.5%戊二醛(試劑1)固定4小時(或者過夜)? 2.0.1M?磷酸緩沖液(試劑2)清洗3次,每次15-30分鐘?3.1%鋨酸(試劑3)固定2-4小時? 4.0.1M?磷酸緩沖液(試劑2)清洗3次,每次15分鐘? 二、脫水:乙醇系列
掃描電鏡的樣品制備方法
掃描電子顯微鏡樣品制備比透射電鏡樣品制備簡單,不需要包埋和切片。掃描電子顯微鏡樣品的制備,必須滿足以下要求:①保持完好的組織和細胞形態;③充分暴露要觀察的部位;③良好的導電性和較高的二次電子產額;④保持充分干燥的狀態。 某些含水量低且不易變形的生物材料,可以不經固定和干燥而在較低加速電壓下直接
核酸透射電鏡樣品制備
實驗方法原理 很多球狀蛋白均能在水溶液或鹽溶液的表面形成不溶的變性薄膜,在適當的條件下這一薄膜可以成為單分子層,由伸展的肽鏈構成為一個分子網。當核酸分子與該蛋白質單分子膜作用時會由于蛋白質的氨基酸堿性側鏈基團的作用,使得核酸從三維空間結構的溶液構型吸附于肽鏈網而轉化為二維空間的構型,并從形態到結構均
透射電鏡樣品制備方法
透射電鏡試樣制備:一、實驗內容及目的:了解透射電鏡對試樣的要求,熟悉透射電鏡試樣的制備過程,制備一個合格的透射 電鏡試樣。二、薄膜樣品的制備:用于透射電鏡下觀察的試樣厚度要求在50-200nm 之間,對于不導電的陶瓷材料和脆性材料,最終減薄可采用離子減薄法。該法是用離子束在樣品的兩側以一定的傾角(5
掃描電鏡的樣品制備方法
概述掃描電子顯微鏡?樣品制備比透射電鏡樣品制備簡單,不需要包埋和切片。掃描電子顯微鏡樣品的制備,必須滿足以下要求:①保持完好的組織和細胞形態;②充分暴露要觀察的部位;③良好的導電性和較高的二次電子產額;④保持充分干燥的狀態。某些含水量低且不易變形的生物材料,可以不經固定和干燥而在較低加速電壓下直接觀
透射電鏡的樣品制備
透射電鏡的樣品制備是一項較復雜的技術,它對能否得到好的TEM像或衍射譜是至關重要的.透射電鏡是利用樣品對入射電子的散射能力的差異而形成襯度的。? 電子束穿透固體樣品的能力主要取決加速電壓,樣品的厚度以及物質的原子序數.一般來說,加速電壓愈高,原子序數愈低,電子束可穿透的樣品厚度就愈大.對于100~
透射電鏡樣品制備方法
透射電鏡試樣制備:一、實驗內容及目的:了解透射電鏡對試樣的要求,熟悉透射電鏡試樣的制備過程,制備一個合格的透射 電鏡試樣。二、薄膜樣品的制備:用于透射電鏡下觀察的試樣厚度要求在50-200nm 之間,對于不導電的陶瓷材料和脆性材料,最終減薄可采用離子減薄法。該法是用離子束在樣品的兩側以一定的傾角(5
掃描電鏡的樣品制備方法
掃描電子顯微鏡(SEM)是1965年發明的較現代的細胞生物學研究工具,主要是利用二次電子信號成像來觀察樣品的表面形態,即用極狹窄的電子束去掃描樣品,通過電子束與樣品的相互作用產生各種效應,其中主要是樣品的二次電子發射。 二次電子能夠產生樣品表面放大的形貌像,這個像是在樣品被掃描時按時序建立
掃描電鏡的樣品制備方法
掃描電子顯微鏡 ?樣品制備比透射電鏡樣品制備簡單,不需要包埋和切片。掃描電子顯微鏡樣品的制備,必須滿足以下要求:①保持完好的組織和細胞形態;②充分暴露要觀察的部位;③良好的導電性和較高的二次電子產額;④保持充分干燥的狀態。 某些含水量低且不易變形的生物材料,可以不經固定和干燥而在較低加速
金屬試樣掃描電鏡樣品制備
工具金屬試樣,熱鑲機,磨樣/拋光機,2-4%硝酸酒精溶液方法步驟1. 金屬樣品的熱鑲,如若樣品尺寸較小,可在熱鑲樣機上進行操作,制成圓柱樣固體,將待觀察面露在圓柱底面上。2. 經不同道次的砂紙對試樣進行處理,砂紙由粗到細,如60-320-600-1000-1500-2000目,每一道磨制時保證樣品表
電鏡酶細胞化學實驗——樣品制備
目前電鏡能定位的酶主要有三類,它們是水解酶、氧化酶、轉移酶。通過電鏡酶細胞化學技術間接證明酶的存在,可定性研究細胞的標志酶,以及在正常和病理狀態下酶的改變與疾病之關系。實驗方法原理電鏡酶細胞化學反應分兩步:①細胞內酶在一定條件下與底物進行初級酶反應(形成初級產物);②應用捕捉劑與初級產物反應形成電子
掃描電鏡的樣品制備方法
概述 掃描電子顯微鏡樣品制備比透射電鏡樣品制備簡單,不需要包埋和切片。掃描電子顯微鏡樣品的制備,必須滿足以下要求:①保持完好的組織和細胞形態;③充分暴露要觀察的部位;③良好的導電性和較高的二次電子產額;④保持充分干燥的狀態。 某些含水量低且不易變形的生物材料,可以不經固定和干燥而在較低加速
透射電鏡樣品制備方法
透射電鏡試樣制備:一、實驗內容及目的:了解透射電鏡對試樣的要求,熟悉透射電鏡試樣的制備過程,制備一個合格的透射 電鏡試樣。二、薄膜樣品的制備:用于透射電鏡下觀察的試樣厚度要求在50-200nm 之間,對于不導電的陶瓷材料和脆性材料,最終減薄可采用離子減薄法。該法是用離子束在樣品的兩側以一定的傾角(5
透射電鏡樣品制備方法
透射電鏡試樣制備:一、實驗內容及目的:了解透射電鏡對試樣的要求,熟悉透射電鏡試樣的制備過程,制備一個合格的透射 電鏡試樣。二、薄膜樣品的制備:用于透射電鏡下觀察的試樣厚度要求在50-200nm 之間,對于不導電的陶瓷材料和脆性材料,最終減薄可采用離子減薄法。該法是用離子束在樣品的兩側以一定的傾角(5
核酸透射電鏡樣品制備實驗——核酸樣品
實驗方法原理很多球狀蛋白均能在水溶液或鹽溶液的表面形成不溶的變性薄膜,在適當的條件下這一薄膜可以成為單分子層,由伸展的肽鏈構成為一個分子網。當核酸分子與該蛋白質單分子膜作用時會由于蛋白質的氨基酸堿性側鏈基團的作用,使得核酸從三維空間結構的溶液構型吸附于肽鏈網而轉化為二維空間的構型,并從形態到結構均能
透射電鏡(TEM)樣品制備之塊體樣品
塊體樣品的制備 :金屬薄膜、陶瓷樣品在最終減薄以前,要盡可能磨得薄一些,最好在30um以下,不要超過50um。(1).切取薄片可用線切割、金剛石砂輪片切割等;(2).通過手工研磨將金屬試樣研磨成厚度~0.05mm的金屬薄片;(3).用沖片器將金屬薄片沖成直徑為3mm的小圓;(4).最終減薄,樣品中心
透射電鏡(TEM)樣品制備之粉末樣品
粉末樣品的制備:制備粉末樣品的關鍵是要做好支持膜,并把粉末分散均勻、濃度適中。待支持膜干透了以后再裝入電鏡觀察,以免在電子束的照射下,支持膜破裂。(1).在銅網上預先粘附一層很薄的支持膜;(2).根據粉末樣品性質選擇合理的分散劑;(3).通過超聲將粉末分散均勻形成懸浮液;(4).采用滴樣或者撈樣方法
核酸透射電鏡樣品制備實驗
實驗方法原理很多球狀蛋白均能在水溶液或鹽溶液的表面形成不溶的變性薄膜,在適當的條件下這一薄膜可以成為單分子層,由伸展的肽鏈構成為一個分子網。當核酸分子與該蛋白質單分子膜作用時會由于蛋白質的氨基酸堿性側鏈基團的作用,使得核酸從三維空間結構的溶液構型吸附于肽鏈網而轉化為二維空間的構型,并從形態到結構均能
掃描電鏡樣品形態和制備方法
樣品形態和制備方法? 制備合格的掃描電鏡樣品是能否獲得掃描電鏡觀察預期最佳結果的先決條件,除環境掃描電鏡外,其它掃描電鏡的樣品必須是固體,且在真空條件下能夠保持長時間穩定。對于含水的樣品必須進行干燥,表面被污染的樣品要選擇合適的溶劑進行清洗。有些樣品必須用化學試劑腐蝕后才能顯露顯微結構,如金屬樣品、
核酸透射電鏡樣品制備實驗
核酸樣品 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 很多球狀蛋白均能在水溶液或鹽溶液的表面形成不溶的變性薄膜,在適當的條件下這一薄膜可以成為單分子層,由伸展的肽鏈構成為一個分子網。當核酸
掃描電鏡生物樣品常用制備方法
掃描電鏡在觀察生物樣品時,具有以下特點:多角度觀察樣品的表面結構;不需要將樣品切成薄片;景深大、圖像立體感強;放大倍數從幾十倍到幾十萬倍連續可調;在觀察形貌的同時可以對微區的成分進行定量和定性分析。而能否獲得真實、清晰、理想的掃描電鏡觀察結果,樣品的制備過程是關鍵。?生物樣品含水直接觀察,會對掃描電
電鏡組織化學技術樣品制備
良好的樣品制備是電鏡酶細胞化學技術成功的關鍵。酶電鏡組織化學 樣品制備要求既要保存酶的活性,同時又要保存細胞的超微結構。并能防止酶反應產物擴散。每種酶對固定液的要求和顯示方法雖不盡相同。但電鏡酶組織化學的基本程序相似,下面簡要介紹其基本要求: 1.取材? 組織標本的取材是樣品制備的第一步,
透射電鏡薄膜樣品的制備
薄膜樣品的制備 塊狀材料是通過減薄的方法制備成對電子束透明的薄膜樣品。制備薄膜一般有以下步驟: (1)切取厚度小于0.5mm 的薄塊。 (2)用金相砂紙研磨,把薄塊減薄到0.1mm-0.05mm 左右的薄片。為避免嚴重發熱或形成應力,可采用化學拋光法。 (3)用電解拋光,或離子轟擊法進行
掃描電鏡樣品常規制備規程
1.取材:根據實驗目的取材,要求部位準確 2.清洗:用磷酸緩沖液反復清洗樣品表面的灰塵、雜質等附著物 3.固定:用2%-3%的戊二醛固定2小時 4.清洗:用磷酸緩沖液清洗3次,每次10min 5.脫水:用50%、70%、80%、90%乙醇梯度脫水各15min,再用100%乙醇脫水3次,每
透射電鏡生物樣品制備步驟
一.取材:組織塊小于1立方毫米二.固定: ? ? ? ?2.5%戊二醛,磷酸緩沖液配制固定2小時或更長時間。用0.1M磷酸漂洗液漂洗 ? ? ? ? 15分 三次1%鋨酸固定液固定 ? ? ? ? ? ? ? ?2-3小時用0.1M磷酸漂洗液漂洗 ? ? ? ? 15分 三次三.脫水: ? ? ?