Cell：比CART細胞更安全、用途更廣的cCART細胞技術

　　在一項新的研究中，來自美國格拉斯通研究所和Xyphos生物科學公司（Xyphos Biosciences, Inc.）的研究人員描述了一種攻擊被HIV感染的細胞的新技術。這種新技術是CAR-T細胞免疫療法的一種新的改進版本。近年來，這種療法因在抵抗血癌上取得的成功而聞名于世。通過改進使得它具有更大的覆蓋范圍和多功能性，這種稱為convertibleCAR T細胞（cCAR-T）的新技術在多個治療領域顯示出了巨大的前景，特別是在抗擊HIV方面，這是因為它可以用來縮小在接受抗逆轉錄病毒療法（ART）期間HIV感染者體內持續存在的受感染細胞的庫存量。相關研究結果于2019年10月24日在線發表在Cell期刊上，論文標題為“Attacking Latent HIV with convertibleCAR-T Cells, a Highly Adaptable Killing Platform”。論文通訊作者為格拉斯通研究所HIV治愈研究中心主任Warner C. Greene博士。

圖片來自Cell, 2019, doi:10.1016/j.cell.2019.10.002。

　　人們已證實傳統的CAR-T細胞在誘導血癌（比如淋巴瘤和兒童白血病）緩解方面非常成功。但是作為抵抗HIV感染的療法，傳統的CAR-T細胞并不完美。論文第一作者、Greene實驗室科學家Eytan Herzig說，“傳統的CAR-T細胞的一些缺點是它們經過基因改造后靶向癌細胞表面上的單個分子，而且一旦被注射到患者體內，無法對它們進行控制。”

　　Xyphos生物科學公司通過從細胞毒殺傷細胞中分離出靶向抗體克服了這些缺陷。該公司首席科學家David W. Martin博士解釋說：“我們對cCAR-T細胞進行了基因改造，使得這些T細胞可以在其表面上表達受到少量修飾的人類受體蛋白NKG2D。”這種受到修飾的NKG2D受體當與它的搭檔結合時，可以將這些T細胞變成有效的殺手。它的搭檔是一種叫做MIC-A的蛋白質，Xyphos生物科學公司的科學家對它進行了裁剪和修飾，使得它可以與cCAR-T細胞表面上這種經過修飾的NKG2D受體特異性結合。這些科學家隨后將它與靶向抗體的底部融合在一起，從而構建出他們稱為MicAbody的產物。因此，這種靶向性MicAbody緊密地和唯一地結合cCAR-T細胞。

　　為了清除潛伏性HIV病毒庫，Herzig和Greene一直在實驗室中測試稱為廣泛中和抗體（bNAb）的抗HIV抗體。他們與Xyphos生物科學公司的科學家合作，基于bNAb構建出MicAbody（稱為Mic-bNAb），并在各種實驗室分析中測試了cCAR-T細胞和Mic-bNAb的組合使用。

　　在實驗室中，Herzig以感染了各種HIV毒株的多種CD4 T細胞（HIV的天然靶標）為研究對象測試了這些組合。特別是，他使用了源自人類扁桃體的細胞制劑；已知在HIV感染者中，扁桃體T細胞是潛伏性HIV病毒庫。他想確保cCAR-T/Mic-bNAb組合使用能殺死代表潛伏性HIV病毒庫的T細胞類型。

　　結果是顯著的：cCAR-T細胞與Mic-bNAb的組合使用特異性地殺死了受到感染的CD4 T細胞，但未殺死未感染的細胞。它們僅與Mic-bNAb組合使用時才殺死受感染的細胞，然而，不論是單獨使用還是與不靶向HIV的MicAbody組合使用都沒有這種效果。他們殺死了在實驗室中感染了多種HIV毒株的CD4 T細胞。當與靶向HIV的Mic-bNAb和靶向癌細胞的MicAbody組合使用時，cCAR-T細胞可以有效殺死在相同細胞培養物中混合在一起的癌細胞和受到HIV感染的細胞。換句話說，cCAR-T細胞精確地證明了它旨在實現的多功能性和特異性。

　　最后，Herzig和Greene測試了cCAR-T/Mic-bNAb平臺是否可以攻擊接受ART治療的HIV感染者血液中存在的潛伏性HIV病毒庫。為了讓這些細胞對cCAR-T細胞可見，他們首先用強效的稱為“潛伏逆轉劑（latency-reversing agent）”的化合物活化這些細胞培養物。在接觸后48小時內，一半以上活化的表達HIV靶抗原的細胞被清除。Greene總結道，“這個平臺前景廣闊。”