a. Label nitrocellulose membrane (using a pencil) to identify protein elution fractions.
b . Pipette 2μl from each fraction onto the membrane, allow the membrane.
c . When dry, incubate the membrane in blocking solution for 1 hour.
d . After incubation, incubate (rotate or shake) the membrane with primary antibody solution (diluted in blocking solution), for 2 hours at room temperature.
e . Wash the membrane in washing buffer (3 x 10 min).
f . Incubate the membrane with secondary antibody-alkaline phosphatase enzyme conjugate solution (in blocking solution) for 1 hour.
g . Wash the membrane in washing buffer (3 x 10 min).
h . Incubate the membrane in substrate solution, until spots are visible.
i . Stop the reaction ? rinse the membrane in distilled water.
j . Air dry the membrane.
一、原理一個基因表達的最終產物是產生相應的蛋白，因此檢測蛋白是測定基因表達的主要標志。 原理：WesternBlotting是將獲得的蛋白質樣品通過SDS-聚丙稀酰胺......
科學家經常通過蛋白質的表達及修飾情況來揭示對應樣品的生理或病理狀態。WesternBlot是進行蛋白檢測的最經典技術。核酸檢測對樣品量的要求極低，因為DNA或RNA具備體外擴增的性質。而蛋白質檢測只能......
Westernblot是檢測蛋白質的一項經典技術，幾十年來一直受到人們的歡迎。不過，令人尷尬的是，這也是一個相當耗時并且難以重現的過程，有時帶來驚喜，有時則是驚嚇。典型的Westernblot流程大家......
為了追蹤Westernblot中產生的信息，研究人員大多需要使用成像系統。這些工具將蛋白分析的圖像轉換成數字文件。近年來，Westernblotting成像系統有了明顯改進。在成像工具的幫助下，數據可......
常見問題及解答：1、兩快玻璃板之間灌膠,膠為什么總是不平?1)你的玻璃洗干凈沒有？應該要洗得非常干凈！2)過硫酸銨和TEMED的加量不合適，加量相對較多，凝膠凝固過快也會膠不平，最多按照分子克隆加倍3......
Westernblot，無疑是個老話題。然而，正是由于新產品的陸續問世，這顆老樹才不斷開出新花。兩年前曾經介紹了全自動的Westernblot分析系統–SimpleWestern。這臺名叫Simon的......
上海昆士蘭生物科技發展有限公司是一家集研發、生產、銷售于一體的高科技生物試劑公司。20年前本公司與中科院共同開發研制了辣根過氧化物酶（HRP）生產工藝，其純度、精度達世界先進水平，現昆士蘭生物開發的H......
LAS家族的新成員ImageQuantLAS500輕盈上市!LAS500的推出，簡化了westernblot實驗檢測環節，讓實驗如兒時游戲般簡單!LAS500含830萬像素制冷CCD，含藍光、紫外和白......
皮膚癌在美國是最常見的一種人類癌癥。為了全面了解人類皮膚癌，科學家就必須利用模型生物如小鼠在實驗室研究這種疾病。這個月發布的新一期《冷泉港實驗手冊》包括了創造鱗狀上皮細胞癌（SCC）小鼠模型的方法。S......
摘要:我們采用PCR技術合成編碼CDK2肽段的基因,將其置于谷胱甘肽轉移酶(GST)編碼基因的下游,在IPTG誘導下,于E.coli中誘導表達了GST2CDK2肽融合蛋白質,以此融合蛋白質作為免疫原免......