ELISA的優點和影響因素

ELISA檢測技術的優點
近二十幾年來，免疫學分析方法發展很快，特別是在使用標記了的抗原和抗體的分析技術以后，使原來許多經典的分析方法在敏感性和特異性方面都不能相比。繼50年代的免疫熒光（IFA）和60年代的放射免疫(RIA)分析技術之后，在70年代初期又建立了用酶來標記抗原或抗體的分析技術。由于酶的高效生物催化作用，一個酶分子在數分鐘內可以催化幾十幾百個底物分子發生反應，產生了放大作用，使得原來極其微乎其微的抗原或抗體在數分鐘后就可被識別出來，這種技術被稱為酶聯免疫吸附試驗法（Enzyme—Linked Immunosorbent Assay，ELISA），本法自70年代初期由VAN WEEMEN、SCHUARS.ENGVALL及PERLMARN等相繼分別報道后，現已引起廣泛重視。
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術，現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據已經使用的結果，認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查，而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此，也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大，可概括四個方面：
1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現微量的免疫沉淀反應。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
酶聯免疫吸附試驗法以其靈敏度高(可達 ng 甚至pg 水平)，特異性好等優點，在生命科學各領域得到廣泛應用，它已邁出醫藥、臨床領域，步入農業、漁業、畜牧業和食品加工業。

下面將ELISA 法與免疫熒光（IFA）和放射免疫(RIA)的各自優缺點作一簡要的比較
三種方法的優缺點比較:
方法種類 ELISA RIA IFA
敏感性 高 高 低
特異性 取決于抗原制備 取決于抗原制備 較高
重演性 尚滿意 尚滿意 尚滿意
結果判斷 客觀 客觀 有主觀因素
抗原制備 較容易或復雜 較容易或復雜 較容易
結合物制備 正在標準化 已標準化 已標準化
在野外條件下用于大
量人群標本的普查 可以 困難 尚可以
分析自動化 可以 可以 困難
主要設備 酶標比色計 粒子計數器 熒光顯微鏡
試驗成本 低 高 較高
試劑半衰期 長 短 長
對人的危害性 無或很少 有 無或很少
主要檢測對象 抗體或抗原 抗原 抗體或抗原
應用范圍 小的診斷實驗室 大的中心實驗室 小的診斷實驗室