ELISA實驗樣本前期的處理方法

ELISA試劑盒檢測的樣本是有多種類型的，如血清、血漿、尿液、細胞培養上清或組織勻漿液等，不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。實驗樣本的處理可謂是ELISA實驗的關鍵步驟之一，所以科研朋友一定要多加注意。

一、均質

①組織樣本：肉、肝食品類切細，用絞肉機反復絞碎，混合均勻。

②水產樣本：去除樣品的非食用部分，食用部分切細，用均質器均漿；原料表面較臟時,需適當用蒸餾水清洗。

③蛋類：鮮蛋去殼，蛋黃和蛋白充分混勻。

④水果、蔬菜類：先用水洗去泥沙，然后除去表面的水分，取食用部分。

二、振蕩提取

將提取溶劑加入到裝有樣品的具塞容器中，振蕩，使提取溶劑與容器內的樣品充分接觸以深入到樣本組織內部，提取待測組分。

①振蕩方式：振蕩器上進行上下、往返式振蕩、手搖式上下振蕩。

②在組織樣本中加入有機溶劑之間提取時，應邊加邊振蕩，防止組織凝結成團，不利于提取。

三、濃縮

由于凈化過程中引入的溶劑，可能會降低待測組分的濃度或者不適宜直接分析，需要去除全部有機溶劑。即試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮氣下吹干，再用復溶液溶解干燥殘留物。

濃縮方式：氮氣吹干除雜、壓縮空氣吹干除雜。

請注意：

①在吹干樣本之前，用甲醇清洗針頭，防止雜質干擾。

②在吹樣本時，針頭應在液面上空，避免與樣本接觸，防止產生交叉污染。

③樣本吹干后應立即取下，避免吹的時間過長，影響zui終檢測結果。

④不同的藥物，吹干后樣本的保質期不同，提倡待樣本回到室溫后立即復溶。

四、乳化現象

在用有機溶劑提取過程中，如果出現乳化現象，解決的方法有：

①用細頭輕輕的攪拌，破壞乳化后，再重復離心。

②再加入適量的提取劑，重新振蕩。注意離心后要保證樣本的稀釋倍數不變。

五、凈化

經過提取的待測組分中通常含有一些會干擾試劑盒中抗原抗體反應的雜質或者是含有與待測物結構相似的雜質。將待測組分與雜質分離的過程，我們稱為試劑盒中樣本的凈化。在我們現有的試劑盒前處理方法中涉及到的zui常見的凈化是：液液分配法。

比如：用復溶液溶解干燥殘留物之前先加入適量的正己烷，在加入正己烷和復溶液渦動后如果出現乳化現象，可以60℃水浴加熱，至乳化現象消失或減弱后，加大離心轉速進行離心。