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無細胞表達系統讓研究人員能夠快速生成蛋白質，從而受到人們的青睞。來自真核細胞的裂解物能夠對蛋白質進行翻譯后修飾，但不同翻譯系統的細微差別也會導致蛋白生產的變化。無細胞表達究竟哪家強？亞利桑那州立大學的研究人員近日在《BioTechniques》上發表了他們的比較結果。 在目前的無細胞蛋白合成而言，大腸桿菌仍然是首選。不過，由于對人類和哺乳動物蛋白及其翻譯后修飾的興趣日益增加，真核系統也逐漸受到人們的歡迎。此外，對于某些技術，如mRNA展示和核酸可編程的蛋白芯片（NAPPA），研究人員傾向于使用真核表達系統來研究蛋白質互作。 在這項研究中，研究人員比較了市場上三種常用的真核無細胞表達系統：麥胚提取物（WGE，Promega）、兔網織紅細胞裂解物（RRL，Promega）和HeLa細胞裂解物（HCL、賽默飛世爾）。 對于每個系統，研究人員定量了環狀質粒和線性DNA所產生的螢光素酶蛋白的量。這些DNA模板的5’非翻譯區（UT......閱讀全文
細胞凋亡是生物發育過程中或在正常生理狀態下清除衰老及受損細胞的一種普遍現象。細胞凋亡的發生受胞外或胞內的多種刺激源所誘導，其中熱休克蛋白（熱激蛋白）是細胞凋亡的調控因子之一。細胞是通過調節自身的防御系統來適應環境脅迫，并且根據脅迫程度的強弱，利用自身遺傳機制或調控自身狀態抵抗脅迫，或
細胞凋亡是生物發育過程中或在正常生理狀態下清除衰老及受損細胞的一種普遍現象。細胞凋亡的發生受胞外或胞內的多種刺激源所誘導，其中熱休克蛋白（熱激蛋白）是細胞凋亡的調控因子之一。細胞是通過調節自身的防御系統來適應環境脅迫，并且根據脅迫程度的強弱，利用自身遺傳機制或調控自身狀態抵抗脅迫，或主動誘發細胞
細胞凋亡是生物發育過程中或在正常生理狀態下清除衰老及受損細胞的一種普遍現象。細胞凋亡的發生受胞外或胞內的多種刺激源所誘導，其中熱休克蛋白（熱激蛋白）是細胞凋亡的調控因子之一。細胞是通過調節自身的防御系統來適應環境脅迫，并且根據脅迫程度的強弱，利用自身遺傳機制或調控自身狀態抵抗脅迫，或主動誘發細胞死亡
許多生物制品例如抗體，重組蛋白，疫苗等的制備還是通過生物體系細胞工程合成，盡管采用多種純化方式，在生物藥物中還會有微量的宿主蛋白殘留（HCP），會對藥品的安全性及藥性產生影響。 一、HCP的概念 HCP：Host cell protein，宿主細胞蛋白 疫苗、抗體、重組蛋白藥物
圖1. 與細胞內蛋白表達相比，無細胞蛋白表達系統能夠顯著地節約時間。 與基于細胞的蛋白表達系統相比較，無細胞蛋白表達系統具有獨特的優勢，包括節約時間、提高具有功能的、可溶的、全長蛋白的總體產量。本文介紹了根據模板類型、期望產率以及下游實驗等因素來選擇無細胞蛋白表達系統的標
許多生物制品例如抗體，重組蛋白，疫苗等的制備還是通過生物體系細胞工程合成，盡管采用多種純化方式，在生物藥物中還會有微量的宿主蛋白殘留（HCP），會對藥品的安全性及藥性產生影響。一、HCP的概念HCP：Host cell protein，宿主細胞蛋白疫苗、抗體、重組蛋白藥物等生物制品的生產主要利用某些
在擁擠喧嘩的酒吧中很難好好聊天，所以大家都選擇在安靜的小咖啡館里促膝長談。不過科學家們現在可以在復雜的細胞培養環境中，選擇性傾聽細胞間的“對話”。 細胞通過分泌蛋白來相互交流并對環境改變進行應答，分泌蛋白還能幫助細胞遷移。位于德國海德堡的著名歐洲分子生物學實驗室EMBL與德國癌癥研究中心DK
在擁擠喧嘩的酒吧中很難好好聊天，所以大家都選擇在安靜的小咖啡館里促膝長談。不過科學家們現在可以在復雜的細胞培養環境中，選擇性傾聽細胞間的“對話”。 細胞通過分泌蛋白來相互交流并對環境改變進行應答，分泌蛋白還能幫助細胞遷移。位于德國海德堡的著名歐洲分子生物學實驗室EMBL與德國癌癥研
新型冠狀病毒感染導致6萬多人出現感染性肺炎，上千的病人喪失生命。無論是政府部門、科研團隊還是普通民眾，大家都在期盼抗體藥物的出現，而從SARS期間直接收集痊愈患者的血清治療重癥患者的實踐，直接折射出抗體對于治療此類感染疾病的重要性。誠然，抗體是機體對抗病毒感染最重要的武器之一，針對病毒的中和性抗
一提到蛋白研究，首先跳入腦海的當然是抗體。的確，很多蛋白實驗都離不開抗體。然而，即使抗體公司時不時推出新產品，但許多蛋白還是沒有相應的抗體，我們只能望電腦興嘆。而且，也有很多抗體無能為力的情況，比如觀察蛋白在細胞內的運輸。所幸，各種各樣的蛋白標簽讓我們能夠從容應對這些挑戰。 遺傳標簽
抗體藥物是目前生物技術藥物研究中最為活躍的領域，特別是在腫瘤和自身免疫性疾病等方面的臨床應用，更是大放異彩。隨著臨床需求的增加，單克隆抗體藥物發展迅速，FDA已批準的抗體藥物多達70多個，抗體藥物銷售量年增長率基本在10%以上，大大高于制藥行業平均水平，其市場規模已經達到千億美元。 我國針對單
一直以來，科學家們在研究某個基因的功能時無非就只有兩種方法，要么就是敲除這個基因，或者下調其表達量，要么就是提高其表達量。在20世紀90年代發現的RNA干擾技術又給科學家們提供了一條新的研究基因功能的途徑，RNA干擾技術可以通過小RNA分子(small RNA molecule)與目標m
無細胞蛋白表達技術是指用含有蛋白合成必需的組分（核糖體，轉運RNA，氨酰合成酶，啟動/延伸/終止因子，三磷酸鳥苷，ATP，Mg2+和K+）的細胞裂解物在體外進行蛋白合成。與傳統的基于細菌或真核細胞的蛋白表達系統相比較，無細胞蛋白表達系統具有獨特的優勢，包括節約時間、提高具有功能的、可溶的、全長蛋白的
蛋白質組（Proteome）的概念最先由Marc Wilkins提出，指由一個基因組，或一個細胞、組織表達的所有蛋白質。 蛋白質組的概念與基因組的概念有許多差別，它隨著組織、甚至環境狀態的不同而改變。 在轉錄時，一個基因可以多種mRNA形式剪接，一個蛋白質組不是一個基因組的直接產物，蛋白質組中蛋
六、Caspase-3活性的檢測 Caspase家族在介導細胞凋亡的過程中起著非常重要的作用，其中caspase-3為關鍵的執行分子，它在凋亡信號傳導的許多途徑中發揮功能。Caspase-3正常以酶原（32KD）的形式存在于胞漿中，在凋亡的早期階段，它被激活，活化的Caspase-3由兩個
C.起源于細胞核的凋亡信號及HSP的調控 細胞核內DNA的斷裂是細胞凋亡的一種生化特征，是由于特異的核酸內切酶活化后將染色質切割成較短的DNA片段。但是，DNA的損傷也可能是一個細胞凋亡級聯反應的早期信號轉導事件，經研究認為：當DNA發生斷裂后，組蛋白H1.2轉運至細胞質，通過激活Bcl-2蛋白-B
原核表達系統是常被用來研究基因功能的成熟系統，由于原核表達系統具有包涵體蛋白不易純化、蛋白修飾不完整等缺陷，人們也開始利用真核細胞表達系統來研究基因。自上世紀70年代基因工程 技術誕生以來，基因表達技術已滲透到生命科學研究的各個領域。并隨著人類基因組計劃實施的進行，在技術方法上得到了很大發展，時至今
二、細胞凋亡的細胞化學測定細胞凋亡的細胞化學測定包括細胞表面（細胞膜）的結構和通透性改變的測定和細胞核DNA改變的測定。根據應用的范圍，又可分為細胞群休和單個細胞測定兩種，以下僅介紹其中幾種較為常用的方法。碘化丙啶（propidium iodide,PI）檢測早期死亡細胞膜通透性狀態的不同是區分細胞
12月28日，嘉和生物1類新藥lerociclib片臨床試驗申請獲CDE受理。擬開發用于治療HR+/HER2 -轉移性乳腺癌。 Lerociclib是G1 Therapeutics開發的一款潛在“best-in-class”的口服CDK 4/6（細胞周期蛋白依賴性激酶 4/6）抑制劑。今年6月
科學家們早就知道，數十種遺傳性疾病（也稱為毒性蛋白病），是由細胞中特定錯誤折疊蛋白的堆積引起的。但是，負責這種堆積的分子機制仍然是個謎，這就阻止了開發相應療法的努力。 如今，在一項新的研究中，來自美國布羅德研究所、哈佛醫學院和布萊根婦女醫院的研究人員發現一些毒性蛋白病（toxic protei
科學家們早就知道，數十種遺傳性疾病（也稱為毒性蛋白病），是由細胞中特定錯誤折疊蛋白的堆積引起的。但是，負責這種堆積的分子機制仍然是個謎，這就阻止了開發相應療法的努力。 如今，在一項新的研究中，來自美國布羅德研究所、哈佛醫學院和布萊根婦女醫院的研究人員發現一些毒性蛋白病（toxic protei
微生物琥珀酸半醛脫氫酶(SSADH)ELISA試劑盒固體樣本的收集 1、組織標本：切割標本后，稱取 1g 組織，加入 9ml 的 pH7.2-7.4 左右的 PBS，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉/分），仔細收集上清。分裝一 份待檢測，其余冷凍備用
實驗步驟 一、桿狀病毒表達載體 最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒，其基因組含有一段外源核酸序列，通常為編碼目標蛋白質的dDNA，在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成
報道：上皮細胞是最常發生癌變的細胞類型。癌細胞的擴散一般經過一個EMT轉化(上皮細胞到間葉細胞轉化)。最近，約翰霍普金斯大學的研究人員，通過對小鼠上皮細胞的研究，發現了一種蛋白能夠使細胞與鄰近細胞分離，從健康乳腺組織游離出來。他們還發現，刪除一個細胞“Vecro蛋白”(velcro，維可牢，是一
如果將特定類型的活細胞涂布在顯微鏡載玻片上，細胞會在玻片上緩緩移動，找到它們的鄰居，自組裝成為簡單原始的組織。斯坦福大學的新研究能解釋這一現象，并能幫助人們理解復雜生物體的機械力結構和行為。 化學工程師Alexander Dunn博士和斯坦福大學的一個跨學科研究團隊，對活細胞內和細胞間
5月份即將結束了，5月份Science期刊又有哪些亮點研究值得學習呢？小編對此進行了整理，與各位分享。 1.Science：重磅！開發出延緩癌細胞生長的新方法 doi:10.1126/science.aai9372 癌癥是一種非常復雜的疾病，但是它的定義是相當簡單的：細胞發生異常和不受控制
調節性T細胞(Treg)是具有免疫抑制功能的T細胞，其主要的功能是抑制效應T細胞介導的免疫反應及維持機體的免疫耐受。效應性Treg只占次級淋巴器官和外周循環Treg細胞的較少一部分，大多數分布于各種組織臟器，效應性Treg是一群已經接受過抗原刺激、活化程度比較高且具有較強的免疫抑制功能的Treg
調節性T細胞(Treg)是具有免疫抑制功能的T細胞，其主要的功能是抑制效應T細胞介導的免疫反應及維持機體的免疫耐受。效應性Treg只占次級淋巴器官和外周循環Treg細胞的較少一部分，大多數分布于各種組織臟器，效應性Treg是一群已經接受過抗原刺激、活化程度比較高且具有較強的免疫抑制功能的Treg
調節性T細胞(Treg)是具有免疫抑制功能的T細胞，其主要的功能是抑制效應T細胞介導的免疫反應及維持機體的免疫耐受。效應性Treg只占次級淋巴器官和外周循環Treg細胞的較少一部分，大多數分布于各種組織臟器，效應性Treg是一群已經接受過抗原刺激、活化程度比較高且具有較強的免疫抑制功能的Treg
盡管在20世紀60年代后期首次描述了在哺乳動物組織或液體中，有囊泡在細胞周圍存在，但是直到2011年才提出通用術語“胞外囊泡（extracellular vesicle, EV）”來定義所有的由脂質雙層包圍的胞外結構，如圖1所示。在1980年代，人們描述了EV可以通過質膜向外出芽或通過細胞內內吞