【分享】siRNA轉染成功的主要關鍵
siRNA在RNA沉寂通道中起中心作用,是對特定信使RNA(mRNA)進行降解的指導要素,細胞轉染實驗中經常會遇到siRNA轉染,下面介紹一下siRNA轉染成功的主要關鍵點。圖片來源于網絡 1.設計合成有效的siRNA RNAi的核心需要siRNA對相應mRNA進行有效的結合和作用。siRNA的設計合成首先很重要,最優的設計可以用最小的工作濃度取得滿意的沉 默效果,減少副反應的發生。siRNA的設計可以通過檢索,優先選用經過驗證的siRNA或設計多對siRNA。需要強調的是,需要同時設置陰性對照以排 除非特異沉默現象和陽性對照以確認整個實驗體系的有效性。 2.合成的siRNA注意純度和工作濃度 siRNA的合成需要注意的是一定要選用高純度的siRNA,siRNA的純度直接關系到轉染效率和沉默效率。siRNA的工作濃度和siRNA的設計、細胞種類、目標基因有關。建議一定進行相關的預實驗優化各條件。 3.選擇......閱讀全文
國際ZLRFect小核酸siRNA轉染試劑/miRNA轉染試劑使用說明
介紹?RFect小核酸轉染試劑是國際知名科學家崔坤元博士領導我公司研發團隊在美國西雅圖實驗室研發成功的一種新型的小核酸轉染試劑。RFect可用來轉染siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以內的小分子RNA和DNA,轉染細胞包括絕大多數貼壁生長的細胞,如一般細胞株
RFect原代細胞小核酸siRNA轉染試劑/miRNA轉染試劑使用說明
RFectPM原代細胞小核酸轉染試劑(RFect原代細胞小核酸siRNA轉染試劑/miRNA轉染試劑)???????????????????????????????????????????????????????貨??? 號:BIOG-11014: 0.5ml????????? BIOG-11015
單核細胞小核酸siRNA轉染試劑/miRNA轉染試劑使用說明
RFectMN單核細胞小核酸轉染試劑 ???????????????????????????????????????????????????????貨 ???號:BIOG-11024: 0.5ml?????? BIOG-11025: 1.0ml ?????????? BIOG-11026: 1.5m
siRNA的轉染
將制備好的siRNA,siRNA表達載體或表達框架轉導至真核細胞中的方法主要有以下幾種: 1.磷酸鈣共沉淀 將氯化鈣,RNA(或DNA )和磷酸緩沖液混合,沉淀形成包含DNA 且極小的不溶的磷酸鈣顆粒。磷酸鈣-DNA 復合物粘附到細胞膜并通過胞飲進入目的細胞的細胞質。沉淀物的大小和質量對于磷酸鈣轉
siRNA的轉染
將制備好的siRNA,siRNA表達載體或表達框架轉導至真核細胞中的方法主要有以下幾種:?1.磷酸鈣共沉淀將氯化鈣,RNA(或DNA)和磷酸緩沖液混合,沉淀形成包含DNA且極小的不溶的磷酸鈣顆粒。磷酸鈣-DNA復合物粘附到細胞膜并通過胞飲進入目的細胞的細胞質。沉淀物的大小和質量對于磷酸鈣轉染的成功至
siRNA 轉染程序
?A.siRNA轉染的方法???哺乳動物轉染的常見方法有:磷酸鈣共沉淀、電穿孔法、DEAE-葡聚糖和polybrene、機械法(例如,顯微注射和基因槍)、陽離子脂質體試劑,其中陽離子脂質體試劑轉染法是目前最常用的轉染方法。應用脂質體型轉染試劑進行轉染需要注重的幾個方面:1.???????轉染試劑的用
如何優化GenMuteTM轉染試劑,提高siRNA/DNA共轉染效率?
GenMuteTM siRNA轉染試劑(Cat#SL100568)是市場上最有力的siRNA傳遞工具之一。siRNA/DNA共轉染時,siRNA的最佳濃度范圍是0.5ηM到10ηM,過多的siRNA可能導致沉默效果差的“洪水效應”,切勿使用超過20ηM的siRNA。以24孔板為例,如下步驟將對如何優
siRNA體外轉染——GenMuteTM siRNA體外轉染的優化
GenMuteTM siRNA轉染試劑(Cat#SL100568)是市場上最有力的siRNA傳遞工具之一。最佳的siRNA濃度范圍是1.0nM到10nM,過多的siRNA可能導致沉默效果差的“洪水效應”。我們實驗室已經使用GenMuteTM轉染試劑成功敲除了內源表達的生長因子。以24孔板為例,如下步
siRNA的轉染方法
將制備好的siRNA,siRNA表達載體或表達框架轉導至真核細胞中的方法主要有以下幾種:1.磷酸鈣共沉淀將氯化鈣,RNA(或DNA)和磷酸緩沖液混合,沉淀形成包含DNA且極小的不溶的磷酸鈣顆粒。磷酸鈣-DNA復合物粘附到細胞膜并通過胞飲進入目的細胞的細胞質。沉淀物的大小和質量對于磷酸鈣轉染的成功至關
siRNA的轉染方法
將制備好的siRNA,siRNA表達載體或表達框架轉導至真核細胞 中的方法主要有以下幾種:1.磷酸鈣共沉淀將氯化鈣,RNA(或DNA )和磷酸緩沖液混合,沉淀形成包含DNA 且極小的不溶的磷酸鈣顆粒。磷酸鈣-DNA 復合物粘附到細胞 膜并通過胞飲進入目的細胞 的細胞 質。沉淀物的大小和質量對