尺寸排阻色譜法的分離原理
一. 分離原理 尺寸排阻色譜法:是按分子尺寸的差異進行分離的一種液相色譜方法,也稱凝膠色譜法。 排阻色譜的固定相多為凝膠。凝膠是一種由有機分子制成的分子篩 , 其表面惰性 , 含有許多不同大小孔穴或立體網狀結構。凝膠的孔穴大小與被分離組分大小相當 , 對不同大小的組分分子則可分別滲到凝膠孔內的不同深度。尺寸大的組分分子可以滲入到凝膠的大孔內 , 但進不了小孔 , 甚至于完全被排斥,先流出色譜柱。尺寸小的組分分子, 大孔小孔都可以滲進去, 最后流出。因此 , 大的組分分子在色譜柱中停留時間較短, 很快被洗出。小的組分分子在色譜柱中停留時間較長。經過一定時間后, 各組分按分子大小得到分離。 當組分X進入柱子后,它就要從高濃度的流動相向固定相孔隙內的流動相擴散。當組分X進入色譜固定相達到擴散平衡時:Xm ? Xn組分的分配系數為......閱讀全文
尺寸排阻色譜法
一. 分離原理 尺寸排阻色譜法:是按分子尺寸的差異進行分離的一種液相色譜方法,也稱凝膠色譜法。 排阻色譜的固定相多為凝膠。凝膠是一種由有機分子制成的分子篩 , 其表面惰性 , 含有許多不同大小孔穴或立體網狀結構。凝膠的孔穴大小與被分離組分大小相當 , 對不同大小的組分分子則可分別
尺寸排阻色譜法的定義
基于分子尺寸不同的分析物在化學惰性的多孔固定相的孔隙中保留作用的差異實現分離的一種色譜技術。
尺寸排阻色譜法的固定相
尺寸排阻色譜常用固定相有無機和有機兩大類。 無機凝膠:又稱硬質凝膠。是具有一定孔徑范圍的多孔性凝膠,如多孔硅膠、多孔玻璃珠等,此類凝膠化學惰性、穩定性及機械強度均好,耐高溫,使用壽命長,但裝柱時易碎,不易裝緊,柱效較低。 有機凝膠:又稱半硬質凝膠。如苯乙烯二乙烯苯交聯共聚物凝膠,能耐較高壓力
尺寸排阻色譜法的分離原理
一. 分離原理??? 尺寸排阻色譜法:是按分子尺寸的差異進行分離的一種液相色譜方法,也稱凝膠色譜法。??? 排阻色譜的固定相多為凝膠。凝膠是一種由有機分子制成的分子篩 , 其表面惰性 , 含有許多不同大小孔穴或立體網狀結構。凝膠的孔穴大小與被分離組分大小相當 , 對不同大小的組分分子則可分別滲到凝膠
常用色譜法介紹尺寸排阻色譜法
基于分子尺寸不同的分析物在化學惰性的多孔固定相的孔隙中保留作用的差異實現分離的一種色譜技術。
尺寸排阻色譜法的原理及其特點
尺寸排阻色譜法是一種根據試樣分子的尺寸進行分離的色譜技術。又稱為凝膠色譜法、分子排阻色譜法、尺寸排阻色譜法等,是液相色譜的一種。?尺寸排阻色譜法原理:體積大的分子不能滲透到凝膠孔穴中去而被排阻,較早的淋洗出來;中等體積的分子部分滲透;小分子可完全滲透入內,最后洗出色譜柱。樣品分子基本按其分子大小先后
尺寸排阻色譜法是依據什么來是實現分離的
是利用樣品分子大小尺寸來進行分離的。色譜柱里面有許多帶有孔洞的球型顆粒,小分子的物質分子會進入這些孔洞再出來,所以會增加停留時間,而大分子進不去這些孔洞,就在球型顆粒之間的縫隙直接通過。所以大分子先出色譜柱,先出峰,小分子后出色譜柱,后出峰。
尺寸排阻分析色譜儀分類
尺寸排阻分析色譜儀分類有多種。1、按分離目的可分:化驗室尺寸排阻分析色譜儀和工業尺寸排阻分析色譜儀。2、按作用可分:尺寸排阻定量分析色譜儀和尺寸排阻定性分析色譜儀。3、按進樣自動性可分:自動進樣尺寸排阻分析色譜儀和手動進樣尺寸排阻分析色譜儀。4、按色譜柱容量可分:微量尺寸排阻分析色譜儀和大容量尺寸排
尺寸排阻色譜儀分離原理
尺寸排阻色譜儀不是根據組分與兩相的相互作用的不同進行分離,而是根據組分分子體積(流體力學體積)或分子大小進行分離。尺寸排阻色譜儀簡稱排阻色譜儀,又稱凝膠色譜儀或分子篩色譜儀,主要用于溶解度、極性、吸附或離子特征無足夠差異的高分子化合物的分離和合成聚合物分子量分布的測定。尺寸排阻色譜儀采用具有一定孔徑
尺寸排阻色譜儀分離原理
尺寸排阻色譜儀不是根據組分與兩相的相互作用的不同進行分離,而是根據組分分子體積(流體力學體積)或分子大小進行分離。尺寸排阻色譜儀簡稱排阻色譜儀,又稱凝膠色譜儀或分子篩色譜儀,主要用于溶解度、極性、吸附或離子特征無足夠差異的高分子化合物的分離和合成聚合物分子量分布的測定。尺寸排阻色譜儀采用具有一定孔徑
空間排阻色譜法
空間排阻色譜法以凝膠(gel)為固定相,它類似于分子篩的作用,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,一般為數納米到數百納米。溶質在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離,而是按分子大小進行分離。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質的流動力學體積或分子大小有關。試樣進入色譜柱后,隨流動相在凝膠外部間隙以及孔穴
選擇合適尺寸排阻色譜法分離蛋白質—選擇流動相
選擇色譜柱之后,下一個最重要的決定就是準確選擇將進入流動相的物質。如上所述,SEC分離的基本原則之一是應選擇條件,以使保留(化學意義上)最小。如果實現了此方法,則可確保洗脫體積是分子大小的指標。乍一看,這似乎應該很簡單-我們應該選擇一種固定相,該固定相不會通過與分析物的特定類型的相互作用而強烈地
尺寸排阻色譜儀固定相概述
尺寸排阻色譜儀分析中使用的柱填料(固定相)一般為凝膠,除了要求熱穩定性、機械強度和化學情性外,還應考慮排阻極限、分離范圍、固定相流動相比和柱效,這些都與凝膠的孔徑大小分布有關。某些高交聯聚苯乙烯膠、聚合膠、硅膠和多孔玻璃微球可以在高達50atm下使用。這些填料比起軟膠來說具有某些優點:填充比較容易,
尺寸排阻分析色譜儀分類方法
尺寸排阻分析色譜儀分類有多種。1、按分離目的可分:化驗室尺寸排阻分析色譜儀和工業尺寸排阻分析色譜儀。2、按作用可分:尺寸排阻定量分析色譜儀和尺寸排阻定性分析色譜儀。3、按進樣自動性可分:自動進樣尺寸排阻分析色譜儀和手動進樣尺寸排阻分析色譜儀。4、按色譜柱容量可分:微量尺寸排阻分析色譜儀和大容量尺寸排
尺寸排阻色譜柱的清潔與維護
尺寸排阻色譜柱通過優化填料的粒徑和細孔容積,實現了色譜柱性能的提升,和色譜柱操作壓強的降低。特別是對單克隆抗體三聚體/二聚體/單體的分離性能有很大的提高,對單體/片段也有很好的分離效果。??? 尺寸排阻色譜柱采用單分散、球形、表面鍵合了一層納米厚度中性親水性薄膜的3m硅膠作為填料。3μm的粒徑結合大
尺寸排阻色譜柱的保存與清潔
尺寸排阻色譜柱通過優化填料的粒徑和細孔容積,實現了色譜柱性能的提升,和色譜柱操作壓強的降低。特別是對單克隆抗體三聚體/二聚體/單體的分離性能有很大的提高,對單體/片段也有很好的分離效果。 尺寸排阻色譜柱采用單分散、球形、表面鍵合了一層納米厚度中性親水性薄膜的3 ?m硅膠作為填料。3μm的粒徑結
尺寸排阻色譜柱的清洗流程
尺寸排阻色譜柱包括分子量測定范圍不同的5種規格的色譜柱,可以將適合樣品分子量和分子量分布的不同級別的色譜柱串聯起來進行分析。尺寸排阻色譜柱通過優化填料的粒徑和細孔容積,實現了色譜柱性能的提升,和色譜柱操作壓強的降低。特別是對單克隆抗體三聚體/二聚體/單體的分離性能有很大的提高,對單體/片段也有很好的
什么是排阻色譜法?
排阻色譜法(size exclusion chromatography,SEC)是一種根據試樣分子的尺寸進行分離的色譜技術。又稱為凝膠色譜法、分子排阻色譜法、尺寸排阻色譜法等,是液相色譜的一種。
空間排阻色譜法介紹
空間排阻色譜法(Steric Exclusion Chromatography)?空間排阻色譜法以凝膠 (gel)為固定相。它類似于分子篩的作用,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,一般為數納米到數百納米。溶質在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離,而是按分子大小進行分離。分離只與凝膠的孔徑分布和溶
排阻色譜法的原理
排阻色譜的分離機理是立體排阻,樣品組分與固定相之間不存在相互作用的現象。色譜柱的填料是凝膠,它是一種表面惰性,含有許多不同尺寸的孔穴或立體網狀物質。凝膠的孔穴大小與被分離的試樣大小相當。僅允許直徑小于孔開度的組分分子進入,這些孔對于流動相分子來說是相當大的,以致流動相分子可以自由地擴散出人。對不同大
排阻色譜法的原理
排阻色譜的分離機理是立體排阻,樣品組分與固定相之間不存在相互作用的現象。色譜柱的填料是凝膠,它是一種表面惰性,含有許多不同尺寸的孔穴或立體網狀物質。凝膠的孔穴大小與被分離的試樣大小相當。僅允許直徑小于孔開度的組分分子進入,這些孔對于流動相分子來說是相當大的,以致流動相分子可以自由地擴散出人。對不同大
分子排阻色譜法介紹
分子排阻色譜法是根據分子大小進行分離的一種液相色譜技術。分子排阻色譜法的分離原理為凝膠色譜柱的分子篩機制。色譜柱多以親水硅膠、凝膠或經修飾凝膠如葡聚糖凝膠Sephadex和聚丙烯酰胺凝膠Sepherose等為填充劑,這些填充劑表面分布著不同尺寸的孔徑,藥物分子進入色譜柱后,它們中的不同組分按其大小進
離子排阻色譜法(ICE)
這種分離模式包括Donnan排斥、空間排斥和吸附過程。固定相通常是由總體磺化的聚乙烯/二乙烯基苯共聚物形成的高容量陽離子交換樹脂。ICE可以用于從完全離解的強酸中分離有機弱酸和硼酸鹽的測定。在上面的保留模式中,帶有負電荷的Donnan膜允許未解離的化合物通過而不允許完全解離的酸如鹽酸通過,因為氯離子
排阻色譜法的原理
排阻色譜的分離機理是立體排阻,樣品組分與固定相之間不存在相互作用的現象。色譜柱的填料是凝膠,它是一種表面惰性,含有許多不同尺寸的孔穴或立體網狀物質。凝膠的孔穴大小與被分離的試樣大小相當。僅允許直徑小于孔開度的組分分子進入,這些孔對于流動相分子來說是相當大的,以致流動相分子可以自由地擴散出人。對不同大
選擇合適尺寸排阻色譜法分離蛋白質—選擇合適的色譜柱
(1)粒徑和柱長 在近年來SEC色譜柱技術得到發展之前,大多數使用的SEC色譜柱的直徑通常相對較大,通常為7.8 mm,長度為150至300 mm。由于使用了較大的顆粒,因此需要較長的色譜柱長度,其中大多數顆粒的機械強度不高,必須在相對較低的壓力下使用。SEC色譜柱技術的最新趨勢集中在開發具有
分子排阻色譜法的介紹
分子排阻色譜法又稱空間排阻色譜法(SEC)是利用多孔凝膠固定相的獨特性產生的一種,主要根據凝膠孔隙的孔徑大小與高分子樣品分子的線團尺寸間的相對關系而對溶質進行分離的分析的方法。分子排阻色譜又叫凝膠色譜法。
空間排阻色譜法的簡介
空間排阻色譜法以凝膠 (gel) 為固定相。它類似于分子篩的作用,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,一般為數納米到數百納米。溶質在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離,而是按分子大小進行分離。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質的流動力學體積或分子大小有關。試樣進入色譜柱后,隨流動相在凝膠外部間隙以及
空間排阻色譜法的詳解
空間排阻色譜法以凝膠(gel)為固定相。它類似于分子篩的作用,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,一般為數納米到數百納米。溶質在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離,而是按分子大小進行分離。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質的流動力學體積或分子大小有關。試樣進入色譜柱后,隨流動相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流
分子排阻色譜法的簡介
分子排阻色譜法又稱凝膠色譜法,它是按照分子尺寸大小順序進行分離的一種色譜方法。分子排阻色譜法的固定相凝膠是一種多孔性的聚合材料,有一定的形狀和穩定性,利用分子篩對分子量大小不同的各組分排阻能力的差異而完成分離。根據所用流動相的不同,凝膠色譜法可以分為兩類:即用水溶劑做流動相的凝膠過濾色譜法(GF
尺寸排阻色譜柱在日常中該如何保存?
尺寸排阻色譜柱是一款超高效液相尺寸排阻色譜柱,粒徑為2 um,由表面鍵合二醇基的硅膠顆粒充填,主要針對小分子蛋白、蛋白片段、多肽、寡核苷酸的分離分析而開發。 尺寸排阻色譜柱的尺寸排阻色譜法(sizeexclusionchromatography,SEC),是按分子大小順序進行分離的一種色譜方法