熒光技術在生物化學及分子生物學研究中的作用
紫外分析儀中熒光技術在生物化學及分子生物學研究中應用主要包括以下幾個方面: 1、物質的定性:不同的熒光物質有不同的激發光譜和發射光譜,因此可用熒光進行物質的鑒別。與吸收光譜法相比,熒光法具有更高的選擇性。 2、定量測定:利用在較低濃度下熒光強度與樣品濃度成正比這一關系可以定量分析樣品中熒光組分的含量,常用于測定氨基酸、蛋白質、核酸的含量。熒光定量測定的一個優點是靈敏度高,例如維生素B2的測定限量可達1毫微克/毫升,這一優點使測定時所需要樣品量大大減少。 這種定量測定方法還可應用于酶催化的反應,只要反應前后有熒光強度的變化,就可用來測定酶的含量及酶反應的速率等。 3、研究生物大分子的物理化學特性及其分子的結構和構象:熒光的激發光譜、發射光譜、量子產率和熒光壽命等參數不僅和分子內熒光發色基團的本身結構有關,而且還強烈地依賴于發色團周圍的環境,即對周圍環境十分敏感......閱讀全文
熒光免疫技術
熒光免疫技術是標記免疫技術中發展最早的一種。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantibod
流式熒光技術
流式熒光技術又稱液態芯片技術(Luminex xMAP技術),其整和了熒光編碼微球、激光分析、應用流體學及高速數字信號處理等多項最新科技,是美國Luminex公司于上世紀末開發出的新一代高通量發光檢測技術。目前該技術已被廣泛應用于免疫分析、核酸研究、酶學分析、受體和配體識別等領域,并得到各權威機構和
熒光抗體技術技術特點
本法較其他鑒定細菌的血清學方法速度快、操作簡單、敏感性高,但在細菌實驗診斷中,一般只能作為一種補充手段使用,而不能代替常規診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。
熒光抗體技術的技術特點
本法較其他鑒定細菌的血清學方法速度快、操作簡單、敏感性高,但在細菌實驗診斷中,一般只能作為一種補充手段使用,而不能代替常規診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。
熒光抗體技術的技術特點
熒光抗體技術是以熒光物標記抗體進行抗原定位的技術。本技術較其他鑒定細菌的血清學方法有速度快、操作簡單、敏感性高等特點,它在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。
熒光抗體技術的技術特點
本法較其他鑒定細菌的血清學方法速度快、操作簡單、敏感性高,但在細菌實驗診斷中,一般只能作為一種補充手段使用,而不能代替常規診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。
熒光抗體技術的技術特點
熒光抗體技術是以熒光物標記抗體進行抗原定位的技術。本技術較其他鑒定細菌的血清學方法有速度快、操作簡單、敏感性高等特點,它在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。
熒光抗體技術的技術特點
本法較其他鑒定細菌的血清學方法速度快、操作簡單、敏感性高,但在細菌實驗診斷中,一般只能作為一種補充手段使用,而不能代替常規診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。
流式熒光技術的技術特點
1、高通量:將許多種不同熒光編碼的微球放在同一反應體系內,一次可同時檢測2-500種生理病理指標,這與傳統方法的逐個檢測相比是質的飛躍。2、高敏感性:流式熒光技術最高的檢測下限可達0.01 pg/ml,常規的酶聯免疫吸附試驗(ELISA)僅為μg級,比后者檢測的靈敏度提高10—100倍。3、線性范圍
熒光抗體技術的技術特點
本法較其他鑒定細菌的血清學方法速度快、操作簡單、敏感性高,但在細菌實驗診斷中,一般只能作為一種補充手段使用,而不能代替常規診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。
流式熒光技術的技術原理
將熒光標記后的單細胞(或顆粒)懸液進入吸樣管,進而隨鞘液進入流動室。進入流動室之前的管道變細,迫使鞘液從四周、樣本在中心進入流動室,在外加壓力的作用下由下向上(或由上向下)直線流動。鞘液充滿流動室將樣品裹挾,當二者通過流動室噴嘴流出時,壓力迫使鞘液包裹的液滴包含單一細胞或顆粒垂直通過檢測區。在檢測區
免疫熒光技術技術分類
⑴ 熒光抗體技術抗原抗體反應后,利用熒光顯微鏡判定結果的檢測方法。⑵ 免疫熒光測定抗原抗體反應后,利用特殊儀器測定熒光強度而推算被測物濃度的檢測方法⑴熒光物質1)熒光色素許多物質都可產生熒光現象,但并非都可用作熒光色素。只有那些能產生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染
熒光抗體技術的技術特點
本法較其他鑒定細菌的血清學方法速度快、操作簡單、敏感性高,但在細菌實驗診斷中,一般只能作為一種補充手段使用,而不能代替常規診斷。熒光抗體染色法對腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實驗診斷有較好效果。
熒光抗體技術的技術應用
熒光抗體技術在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。在細菌學檢驗中主要用于菌種的鑒定。標本材料可以是培養物、感染組織、病人分泌排泄物等。熒光間接染色法測定血清中的抗體,可用于流行病學調查和臨床回顧診斷。免疫熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用方法之一。免疫熒光技術
免疫熒光技術技術分類
⑴ 熒光抗體技術抗原抗體反應后,利用熒光顯微鏡判定結果的檢測方法。⑵ 免疫熒光測定抗原抗體反應后,利用特殊儀器測定熒光強度而推算被測物濃度的檢測方法⑴熒光物質1)熒光色素許多物質都可產生熒光現象,但并非都可用作熒光色素。只有那些能產生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染
免疫熒光技術技術原理
免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。直接法將標記的特異性
免疫熒光技術技術特點
該技術的主要特點是:特異性強、敏感性高、速度快。主要缺點是:非特異性染色問題尚未完全解決,結果判定的客觀性不足,技術程序也還比較復雜。熒光免疫法按反應體系及定量方法不同,還可進一步分做若干種。與放射免疫法相比,熒光免疫法無放射性污染,并且大多操作簡便,便于推廣。國外生產的TDM用試劑盒,有相當一部分
熒光抗體技術介紹
熒光抗體技術,用熒光物標記抗體來檢測細胞或組織中相應抗原或抗體的技術。熒光物種類一般有異硫氰酸熒光素、羅丹明熒光素、二氯三嗪基氨基熒光素等。一般是將待測標本固定于玻片表面,滴加已知熒光抗體后再以緩沖液沖洗,干燥后于熒光顯微鏡下觀察陽性是可見帶熒光的抗原抗體復合物; 陰性無熒光(因為帶熒光的抗體不能與
熒光分析新技術
常規的熒光分析技術主要是直接或間接對無機化合物、有機化合物等進行定性和定量分析,因其高靈敏度和選擇性,得到了較為廣泛的應用。然而,在實際情況中由于分析物質的復雜性、所處環境的多樣性等,常規的熒光分析法收到了極大限制。許多新型的熒光技術,例如同步熒光分析、偏振熒光分析、三維熒光分析、時間分辨熒光分析、
免疫熒光技術
免疫熒光技術是標記免疫技術中發展最早的一種.它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記抗體獲得成功。經過幾十年的發展,該技術已相當成熟。 用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的
免疫熒光技術
免疫熒光技術1)??直接法1.標本經固定后,PBS洗滌3×3分鐘。2.加熒光素標記的抗體,濕盒內37℃孵育50分鐘。3.PBS洗滌3×3分鐘。4.0.1%伊文氏蘭復染。5.PBS洗3次,蒸餾水洗2次,每次3分鐘,以除去NaCl結晶。6.緩沖甘油封片,鏡檢。?2)??間接法1.標本固定后,PBS洗滌3
熒光光譜技術
1. 瞬態光譜測試壽命的時候,如何避免誤差,得到真實的實驗結果,選擇狹縫和激發功率有什么經驗和技巧?另外測固體和液體壽命時候如何保持氮氣氛圍?HORIBA熒光壽命測試軟件會在壽命測試結果中自動給出S.Dev,3倍的S.Dev是壽命結果的誤差;在測試過程中保持a<2%,減少堆積效應帶來的測試結果偏短的
免疫熒光技術
實驗方法原理 直接法是以熒光素標記的抗體直接與標本內的抗原反應,形成抗原—熒光素標記抗體復合物。根據熒光的分布位置及強度,確定相應抗原的存在與否及其所在部位。實驗材料 抗體試劑、試劑盒 PBS伊文氏蘭儀器、耗材 顯微鏡實驗步驟 1. 標本經固定后,PBS洗滌3×3 分鐘;2. 加熒光素標記的抗體,濕
同步熒光掃描技術
根據激發和發射單色器在掃描過程中彼此間所保持的關系,同步掃描技術可以分為固定波長差、固定能量差以及可變角(可變波長)同步掃描。同步掃描技術具有使光譜簡化、譜帶窄化、提高分辨率、減少光譜重疊、提高選擇性和減少散射光影響等優點。 固定波長差同步熒光光譜中,波長差的選擇直接影響到同步熒光光譜的形狀、帶寬和
熒光定量PCR技術
熒光定量pcr(也稱taqmanpcr,以下簡稱fq-pcr)是美國pe(perkinelmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術,該技術是在常規pcr基礎上加入熒光標記探針來實現其定量功能的,與變通pcr相比,fq-pcr具有許多優點。
實時熒光PCR技術
實時熒光PCR(real-time PCR)因其全封閉擴增,簡單快速,重復性好,無擴增后處理以及易于自動化等優點,廣受大家歡迎。在分子診斷領域中,實時熒光PCR方法涉及的領域包括感染性疾病、腫瘤、遺傳病等多方面。那么實時熒光PCR技術是如誕生的呢?下面,由小編帶領大家一起了解大牛們是如何經過
熒光抗體技術應用
熒光抗體技術在臨床檢驗上已用作細菌、病毒和寄生蟲的檢驗及自身免疫病的診斷等。在細菌學檢驗中主要用于菌種的鑒定。標本材料可以是培養物、感染組織、病人分泌排泄物等。熒光間接染色法測定血清中的抗體,可用于流行病學調查和臨床回顧診斷。免疫熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用方法之一。免疫熒光技術
熒光光譜技術
16世紀,西班牙科學家Nicholas?Monardes觀察到,貯放在由菲律賓紫檀木制成的杯中的水會發出一種神奇而迷人的藍光。到17世紀,Boyle等其他科學家也觀察并記載了類似的發光現象。1864年,英國物理學家George?Stokes首先提出發光現象作為一種分析方法,他在1852年發表的關于發
免疫熒光技術
基本原理 將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。試劑與儀器l??????????磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):
熒光免疫技術介紹
熒光免疫技術是標記免疫技術中發展最早的一種。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantib