粘粒及質粒文庫的鋪平板和轉移實驗——基本方案
文庫一旦包裝就應該盡快進行擴增，它可以大大增加文庫的拷貝數，但在擴增時由于克隆的生長速率不同，文庫的組成可能會出現某種潛在的改變。這種文庫克隆組成比率的變化可以通過把文庫克隆預吸附到細菌上并使用一種高密度鋪平板和短期培養的方法而盡量減少。實驗材料質粒試劑、試劑盒LBNaOH氯霉素Tris·ClNaCl儀器、耗材硝酸纖維素濾膜離心機布氏漏斗培養箱實驗步驟1. 在含抗生素的平板上，通過系列等比稀釋確定質粒和粘粒文庫的滴度，計算出最佳的鋪平板用的細菌懸液量并稀釋到5~10 ml LB培奍基中。 2. 準備一層無菌的10 cm 或15 cm的Whatman 3 MM 濾紙，故在玻璃布氏漏斗或瓷質過濾漏斗中，加入10~20 ml LB培養基。3. 將標記好方向的硝酸纖維素濾膜放入含抗生素的LB平板中，并移至過濾裝置，再將細菌懸液用吸管加到濾膜上，注意不要往濾膜邊緣4~5 mm 處加液體。&nb......閱讀全文
人胃癌裸鼠原位種植轉移模型的建立實驗
實驗方法原理 以反復接種傳代于裸鼠皮下的SGC-7901 人胃癌細胞株建立的移植瘤組織塊為材料，將其用生物吻合OB膠原位粘貼于裸鼠胃壁，并與傳統"胃囊法"、”皮下移植法“比較觀察移植腫瘤的生長情況、移植成功率和自發轉移的發生率。實驗材料 BALB c 無胸腺裸鼠傳代于裸鼠皮下的SGC-7901人胃癌
二氫硫辛酰胺乙酰基轉移酶實驗
實驗方法原理 實驗材料 酶樣品試劑、試劑盒 Tris-HClCoA乙酰磷酸磷酸轉乙酰酶DL-二氫硫辛酰胺儀器、耗材 分光光度計實驗步驟 實驗所需「試劑」具體見「其他」0.98 ml 實驗混合物0.02 ml 酶樣品30℃ 時，于 240 nm 處吸收值發生變化，需使用石英比色皿。注意事項 其他 試劑
Northern－Blotting轉印實驗（毛細管轉移法）
要進行Northern雜合反應前，必須先將RNA自洋菜膠體轉移至硝化纖維紙（nitrocellulose membrane） 或尼龍膜 （nylon membrane） 上，這一個過程稱為轉印 （blotting）。 一般常用的方法包括毛細管轉移法 （capillary transfer）、
粘粒及質粒文庫的鋪平板和轉移實驗
實驗材料 質粒試劑、試劑盒 LBNaOH氯霉素Tris·ClNaCl儀器、耗材 硝酸纖維素濾膜離心機布氏漏斗培養箱實驗步驟 1. ?在含抗生素的平板上，通過系列等比稀釋確定質粒和粘粒文庫的滴度，計算出最佳的鋪平板用的細菌懸液量并稀釋到5~10 ml LB培奍基中。?2. ?準備一層無菌的10 cm
二氫硫辛酰胺乙酰基轉移酶實驗
分光光度法 Stopped 實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料
基因轉移的物理方法轉移法介紹
包括顯微鏡注射法、電脈沖介導法。顯微注射法是應用特別的玻璃顯微注射器在顯微鏡下把重組DNA導入靶細胞；電脈沖介導法又稱電穿孔法，是指在高壓電脈沖的作用下，使細胞膜上出現瞬間微小的孔洞，從而介導不同細胞之間的原生質膜發生融合，使外源DNA通過細膜上出現的瞬間小孔而進入細胞。
關于基因轉移的化學轉移方法介紹
有DNA-陽離子-二甲基亞砜法。基因轉移的生物學方法包括細胞融合法、脂質體介導法、原生質體融合法等。除以上三種方法外，又出現了顆粒轟擊技術，就是將外源DNA包被在金屬上，在電場中包被DNA的金屬顆粒獲得能量并以高速度運動，穿入靶細胞組織或器官內，由于這種金屬顆粒可以涂成薄膜狀，所以可實現較多細胞
胰腺癌晚期雙肺轉移肝臟轉移腹膜轉移惡性腹腔積液...
【一般資料】女性，75歲，喪偶，漢族，無業。【主訴】確診胰腺癌9月余，腹脹伴嘔吐半月。【現病史】患者緣于入院前9月余無明顯誘因出現上腹痛痛,為持續性隱痛,疼痛無放射,無反酸燒心,無惡心嘔吐,無腹瀉、便秘等,于當地三級醫院就診,上腹部增強CT示:胰腺癌。胸部CT提示:雙肺多發轉移瘤,未行進一步檢查治療
研究人員用透明實驗鼠觀察癌細胞轉移
日本一個研究小組日前利用熒光蛋白技術使實驗鼠癌細胞發光，并利用一種試劑使得實驗鼠全身透明，從而觀察癌細胞的轉移情況，該研究有望應用于癌癥治療與研究。 東京大學等機構的一個研究小組同時對多只實驗鼠移植肺癌細胞，并利用熒光蛋白讓癌細胞發光。研究人員在不同時間點利用特殊試劑使實驗鼠全身變透明，從而觀
噬菌體文庫的鋪平板和轉移實驗——基本方案
文庫一旦包裝就應該盡快進行擴增，它可以大大增加文庫的拷貝數，但在擴增時由于克隆的生長速率不同，文庫的組成可能會出現某種潛在的改變。這種文庫克隆組成比率的變化可以通過把文庫克隆預吸附到細菌上并使用一種高密度鋪平板和短期培養的方法而盡量減少。實驗材料噬菌體試劑、試劑盒瓊脂糖LBNaOHSSCTris·C
噬菌體DNA從噬菌斑到濾膜的轉移實驗
實驗方法原理 一個從 λ 噬菌體文庫中鑒別和分離特異重組子的方法，在分子克隆歷史的早期由 Bemon 和 Davis (1977) 建立起來。這個目前仍經常使用的方法，包括通過用 32P 標記的探針進行原位雜交以大量篩選噬菌斑。實驗材料 λ 噬菌體文庫大腸桿菌鋪平板細菌試劑、試劑盒 變性液中和液SM
氯霉素乙酰基轉移酶（CAT）測定實驗
通過測定轉染細胞的報告基因表達，如β-gal或CAT,可以確定導人的DNA是否已被整合到宿主細胞主要用于（1）測定基因表達（2）基因整合評價（3）細胞的調控。來源于《動物細胞培養：基礎技術指南（第五版）》實驗方法原理氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransfe
噬菌體DNA從噬菌斑到濾膜的轉移實驗
一個從 λ 噬菌體文庫中鑒別和分離特異重組子的方法，在分子克隆歷史的早期由 Bemon 和 Davis (1977) 建立起來。這個目前仍經常使用的方法，包括通過用?32P 標記的探針進行原位雜交以大量篩選噬菌斑。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理一個從 λ 噬菌體文庫中鑒
噬菌體DNA從噬菌斑到濾膜的轉移實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 一個從 λ 噬菌體文庫中鑒別和分離特異重組子的方法，在分子克隆歷史的早期由 Bemon 和 Davis (1977) 建立起來。這個目前仍經常使用的方法，包括通過用 32P 標記的探針進行原位雜交以大量篩選噬菌斑。
氯霉素乙酰基轉移酶（CAT）測定實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能將乙酰基從乙酰輔酶A轉移到氯霉素上。本試劑盒采用熒光測定的方法，檢測CAT活性，它的靈敏度接近同位素測定方法，而操作極
氯霉素乙酰基轉移酶（CAT）測定實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 氯霉素乙酰轉移酶報告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能將乙酰基從乙酰輔酶A轉移到氯霉素上。本試劑盒采用熒光測定的方法，檢測CAT活性，它的靈敏度接近同位素測定方法，而操作極
專家發現肺癌轉移“密碼”－有望抑制肺癌轉移
武漢專家研究發現肺癌轉移"密碼" 廣州軍區武漢總醫院專家最新研究發現了肺癌轉移的“密碼”：原本認為是“貼身衛士”的巨噬細胞非但不能發揮抗腫瘤作用，反而變成“奪命殺手”，誘導淋巴管生成并促進腫瘤的侵襲和轉移。 肺癌已在全球范圍內成為發病率和死亡率最高的惡性腫瘤。肺癌極易發生區域性淋巴結
印跡轉移電泳
生物化學與分子生物學的研究工作經常需要對電泳分離后的DNA進行分子雜交，但瓊脂糖不適合于進行雜交操作，1975年，Southren創造了將DNA區帶原位轉移到硝酸基纖維素膜（NC膜）上，再進行雜交的方法，被稱為Southren印跡法。隨后，Alwine等將類似方法用于RNA印跡，被戲稱為Northe
基因轉移技術
基因轉移技術分為兩類：第一類是將目的基因轉導入體外培養的細胞或導入從體內取出的細胞，觀察目的基因在細胞中的表達，這項技術稱基因轉染（gene transfection）技術。通常情況下，該技術轉入的目的基因不與細胞染色體發生整合，而是在細胞質呈現暫時性表達，隨時間推移而逐漸減弱或消失。第二類是將
基因轉移方法
（1）特異正常基因的分離與克隆：應用重組DNA和分子克隆技術結合基因定位研究成果，已有不少基因并將會有更多人類基因被分離和克隆，這是基因治療的前提，在當代分子生物技術條件下，一般來說，只要有基因探針和準確的基因定位，任何基因都可被克隆。除此，如今既可人工合成DNA探針，還可用DNA合成儀在體外人工合
湖南與香港共建實驗室和技術轉移工作站
近日，“深化合作創新，助推湘港繁榮”對接交流會在長沙隆重召開，省科技廳黨組書記童旭東、副廳長周建元參加會議。會上，湖南省產業技術協同創新研究院、湖南通信服務有限公司與香港應用科技研究院三方共建的區塊鏈技術應用聯合實驗室揭牌。湖南省產業技術協同創新研究院和三湘集團有限公司簽署了共建“湘港科技創新
將基因轉移至未分化ES細胞實驗——ES細胞電穿孔
實驗材料線性化轉移基因 DNA未分化 ES 細胞儀器、耗材電穿孔儀和電穿孔杯neoR-MEF 滋養板ES 生長培養基實驗步驟1. 準備下列試劑和材料：線性化轉移基因 DNA（1 mg/ml，溶于無菌 TE）未分化 ES 細胞Bio-Rad 電穿孔儀和電穿孔杯100 mm neoR-MEF 滋養板ES
谷胱甘肽S轉移酶融合蛋白的表達及純化實驗
實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒氨芐青霉素LBPBSSDS甘油谷胱甘肽儀器、耗材離心機搖床轉子超聲波發生器實驗步驟1. ?按正確讀框將DNA片段亞克隆入合適的pGEX載體中，轉化大腸桿菌感受態細胞， 在LB/氨芐青霉素平皿上篩選轉化子，以不插入外源DNA的自連載體作對照，平皿置37℃孵育12~15 h。
淋巴結轉移性腺癌形態學觀察實驗
實驗步驟 1. 正常淋巴結結構尚存，部分淋巴結被破壞，于淋巴結邊緣竇及皮質、髓質內見多量大小不等、形態不規則的癌腺腔分布。2. 癌細胞有明顯異型性，可見病理性核分裂象，與胃腺癌形態一致。其他 診斷要點：淋巴結內出現腺癌組織，與胃腺癌形態一致。
淋巴結轉移性腺癌形態學觀察實驗
實驗步驟1. 正常淋巴結結構尚存，部分淋巴結被破壞，于淋巴結邊緣竇及皮質、髓質內見多量大小不等、形態不規則的癌腺腔分布。2. 癌細胞有明顯異型性，可見病理性核分裂象，與胃腺癌形態一致。其他診斷要點：淋巴結內出現腺癌組織，與胃腺癌形態一致。
谷胱甘肽S轉移酶融合蛋白的表達及純化實驗
實驗材料 大腸桿菌試劑、試劑盒 氨芐青霉素LBPBSSDS甘油谷胱甘肽儀器、耗材 離心機搖床轉子超聲波發生器實驗步驟 1. ?按正確讀框將DNA片段亞克隆入合適的pGEX載體中，轉化大腸桿菌感受態細胞， 在LB/氨芐青霉素平皿上篩選轉化子，以不插入外源DNA的自連載體作對照，平皿置37℃孵育12~1
清門冬氨酸氨基轉移酶AST測定實驗
實驗方法原理AST 催化門冬氨酸與α-酮戊二酸的氨基轉換反應，生成草酰乙酸和谷氨酸。L-門冬氨酸十α酮戊二酸 ＝ 草酸乙酸十L-谷氨酸經 60min反應后，加入2,4 二硝基苯肼終止反應，并與反應液中的二種α-酮酸生成相應的2,4二硝基苯腙，在堿性條件下，兩種苯腙的吸收光譜曲線有差別，在500－52
谷胱甘肽S轉移酶融合蛋白的表達及純化實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 大腸桿菌 試劑、試劑盒
以毛細管轉移方式進行Northern－Blotting轉印實驗
要進行北方雜合反應前，必須先將RNA自洋菜膠體轉移至硝化纖維紙（nitrocellulose membrane） 或尼龍膜 （nylon membrane） 上，這一個過程稱為轉印 （blotting）。 一般常用的方法包括毛細管轉移法 （capillary transfer）、真空轉移法 （vac
清門冬氨酸氨基轉移酶AST測定實驗
實驗方法原理 AST 催化門冬氨酸與α-酮戊二酸的氨基轉換反應，生成草酰乙酸和谷氨酸。L-門冬氨酸十α酮戊二酸 ＝ 草酸乙酸十L-谷氨酸經 60min反應后，加入2,4 二硝基苯肼終止反應，并與反應液中的二種α-酮酸生成相應的2,4二硝基苯腙，在堿性條件下，兩種苯腙的吸收光譜曲線有差別，在5