用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗
欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。實驗材料DNA 樣品試劑、試劑盒乙醇水飽和的異戊醇或 n-丁醇酚TE儀器、耗材透析管和夾離心機和轉頭實驗步驟一、材料1. 緩沖液和溶液乙醇,水飽和的異戊醇或 n-丁醇(從離心制備的 DNA 中去除溴化乙錠要上述兩種有機溶劑之一。),酚,酚:氯仿(1:1, V/V),TE ( pH 8.0)。2. 核酸和寡核苷酸通過 CsCl 梯度離心純化的 DNA 樣品3. 離心機和轉頭帶有 HL-4 的轉頭和 50 ml 離心管的 Sorvall RT-6000 離心機(或與其相當的設備)Sorvall SS-34 轉頭(或與其相當的轉頭)4.......閱讀全文
索氏抽提法操作步驟
操作步驟:1.把濾紙做成與提取器大小相應的濾紙筒,然后把需要提取的樣品放入濾紙筒內,裝入提取器。注意濾紙筒既要緊貼器壁,又要方便取放。(濾紙筒上可以套一圈棉線,方便提取完成后取出濾紙筒。)被提取物高度不能超過虹吸管,否則被提取物不能被溶劑充分浸泡,影響提取效果。被提取物亦不能漏出濾紙筒,以免堵塞虹吸
粗脂肪的定量測定:抽提法
一、目的與要求:1、熟悉掌握粗脂肪的測定方法。2、熟悉與掌握重量分析的基本操作,包括樣品處理,烘干,恒重等。二、原理:本法為重量法,用脂肪溶劑將脂肪提出后進行稱量,該法適用于固體和液體樣品。通常將樣品浸于脂肪溶劑,為乙醚或沸點30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器進行循環抽提。用本法提取的脂肪性物
索氏抽提法步驟是什么
1.把濾紙做成與提取器大小相應的濾紙筒,然后把需要提取的樣品放入濾紙筒內,裝入提取器。注意濾紙筒既要緊貼器壁,又要方便取放。(濾紙筒上可以套一圈棉線,方便提取完成后取出濾紙筒。)被提取物高度不能超過虹吸管,否則被提取物不能被溶劑充分浸泡,影響提取效果。被提取物亦不能漏出濾紙筒,以免堵塞虹吸管。如
粗脂肪的定量測定——抽提法
一、目的與要求:1、熟悉掌握粗脂肪的測定方法。2、熟悉與掌握重量分析的基本操作,包括樣品處理,烘干,恒重等。二、原理:本法為重量法,用脂肪溶劑將脂肪提出后進行稱量,該法適用于固體和液體樣品。通常將樣品浸于脂肪溶劑,為乙醚或沸點30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器進行循環抽提。用本法提取的脂肪性物
索氏抽提法測定脂肪原理
??? 脂肪是食品的主要成分之一,大多數動物性食品和一些植物性食品,尤其是植物的種子、果實或果仁,都含有脂肪或脂類化合物。在實用油脂中主要存在甘油三酸酯以及一些脂肪酸、磷酸、糖酯、脂溶性維生素等類酯化合物。脂肪有兩種存在形式,即游離脂肪和結合脂肪,測定食品中脂肪含量的方法有很多,但大多數采用低沸點溶
脂肪的測定方法索氏抽提法
1 原理樣品用無水乙醚或石油醚等溶劑抽提后,蒸去溶劑所得的物質,在食品分析上稱為脂肪或粗脂肪。因為除脂肪外,還含色素及揮發油、蠟、樹脂等物。抽提法所測得的脂肪為游離脂肪。2 試劑2.1 無水乙醚或石油醚。2.2 海砂:食品中水分的測定3 儀器索氏提取器。4 操作方法4.1 樣品處理4.1.1 固體樣
影響索氏抽提法準確測量的因素?
1、如何利用殘余法測定油料作物種子中的粗脂肪含量? 殘余法測定油料作物種子中的粗脂肪含量,是用低沸點有機溶劑(乙醚或石油醚)回流抽提,除去樣品中的粗脂肪,以樣品與殘渣重量之差,來計算粗脂肪含量。 2、測定過程中為什么需要對樣品、抽提器、抽提用有機溶劑都要進行脫水處理? 進行脫水處理的原因有三:
食品中脂肪的測定——索氏抽提法
原理脂肪易溶于有機溶劑。試樣直接用無水乙醚或石油醚等溶劑抽提后,蒸發除去溶劑,干燥,得到游離態脂肪的含量。試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規定的三級水。試劑無水乙醚(C4H10O)。石油醚(CnH2n+2):石油醚沸程為30℃~60℃。材料石英砂。脫脂棉。儀器和
謝瓦格抽提法的方法原理介紹
中文名稱謝瓦格抽提法英文名稱Sevag method定 義一種從核酸中去除蛋白質雜質的方法。系用加有少量異戊醇或辛醇的氯仿溶液對核酸-蛋白質混合物反復振蕩,使蛋白質變性沉淀而被除去。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
索氏抽提法檢測脂肪重點注意事項
脂肪有兩種存在形式,即游離脂肪和結合脂肪,測定食品中脂肪含量的方法有很多,但大多數采用低沸點溶劑直接萃取,或用酸堿溶液破壞碳水化合物和蛋白質,然后用溶劑萃取或離心離析。這就是常用的索氏抽提法、酸水解法、堿水解法等,不同的食品應采用不同的方法。其中常見的有使用脂肪抽提儀進行測定的,脂肪抽提儀是利用
酵母菌RNA制備實驗—熱酸性酚抽提法
實驗材料酵母菌試劑、試劑盒TES酸性酚氯仿乙酸鈉乙醇儀器、耗材離心管離心機搖床實驗步驟1. ?酵母細胞在10 ml 培養基中生長至指數中期(OD600=1.0)。?2. ?將培養液轉移到50 ml,離心管,于4℃,1 500 g 離心3 min。?3. ?棄上清,菌體沉淀用1 ml 冰冷的水重懸,轉
有機溶劑抽提法提取葉黃素的方法介紹
有機溶劑抽提法是應用最多的提取葉黃素方法。存在于萬壽菊中的葉黃素在乙醇中溶解度很高,在中性條件下則難溶于水,在堿性條件下葉黃素的溶解度比在酸性及中性條件下的溶解度高 。
快速了解索氏抽提法測定脂肪的原理
索氏抽提法,用于粗脂肪含量的測定。脂肪廣泛存在于許多植物的種子和果實中,測定脂肪的含量,可以作為鑒別其品質優劣的一個指標。脂肪含量的測定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測和核磁共振法等。國內外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是
用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。 實驗材料 DNA
線形質粒DNA-5粘性末端去磷酸實驗——抽提法
實驗材料質粒試劑、試劑盒CIAPEDTABUFFER酚-氯仿乙醇TE儀器、耗材水浴鍋抽干機實驗步驟1、質粒DNA和CIAP以及BUFFER 37 ℃水浴30min?2、補充CIAP 再37 ℃水浴30min?3、加入50 mM EDTA至終濃度5 mM 75 ℃加熱10min 失活CIAP?4、冷卻
用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗
欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsC
用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗
實驗方法原理 欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。實驗材料 DNA 樣品試劑、試劑盒 乙醇水飽和的異戊醇或 n-丁醇酚TE儀器、耗材 透析管和夾離心機和轉頭實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液乙醇,水飽和的異戊醇或
索氏抽提法提取粗脂肪適用于什么樣品
索氏抽提法提取粗脂肪適用于脂類含量較高,結合態的脂類含量較少,能烘干磨細,不易吸濕結塊的樣品。 特點:操作簡單,易提取,實驗結果容易計算。 索氏抽提法,用于粗脂肪含量的測定。脂肪廣泛存在于許多植物的種子和果實中,測定脂肪的含量,可以作為鑒別其品質優劣的一個指標。脂肪含量的測定有很多方
用索氏抽提法提取粗脂肪適用于什么樣品
索氏抽提法提取粗脂肪適用于脂類含量較高,結合態的脂類含量較少,能烘干磨細,不易吸濕結塊的樣品。原理:利用溶劑回流和虹吸原理,使固體物質每一次都能為純的溶劑所萃取,所以萃取效率較高。萃取前應先將固體物質研磨細,以增加液體浸溶的面積。然后將固體物質放在濾紙套內,放置于萃取室中。如圖安裝儀器。當溶劑加熱沸
采用索氏抽提法測定脂肪所采用的溶劑有哪些
即用低沸點有機溶劑(乙醚或石油醚)回流抽提, 除去樣品中的粗脂肪,以樣品與殘渣重量之差,計算粗脂肪含量。由于有機溶劑的抽提物中除脂肪外,還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類脂物質,因而抽提法測定的結果只能是粗脂肪。
底質和污泥中有機污染物的提取法超臨界流體抽提法
超臨界流體具有比液體高的擴散速度和比液體粘度低的特點,同時超臨界流體的密度比正常氣體的大。超臨界流體可以在相對低的溫度下溶解分析物,因此,它有利于減少樣品由于熱而引起的分解作用。近年來超臨界流體抽提(SFE)之所以受到人們的重視和應用的主要原因,是它可以不用具有污染的有害溶劑,而采用超臨界流體CO2
糧食中索氏抽提法粗脂肪含量測定的注意事項有哪些
1、千萬注意通風,防止乙醚中毒。2、濾筒要緊密,防止漏出,漏出要重做3、濾筒高度要高于回流管3、多糖或糊精含量高的要先用冷水侵泡,干燥后再做。否則容易糊4、溫度保持在45度左右,每小時8到12個回流5、一定是無水乙醚
糧食中索氏抽提法粗脂肪含量測定的注意事項有哪些
1、千萬注意通風,防止乙醚中毒。2、濾筒要緊密,防止漏出,漏出要重做3、濾筒高度要高于回流管3、多糖或糊精含量高的要先用冷水侵泡,干燥后再做。否則容易糊4、溫度保持在45度左右,每小時8到12個回流5、一定是無水乙醚6、
糧食中索氏抽提法粗脂肪含量測定的注意事項有哪些
1、千萬注意通風,防止乙醚中毒。2、濾筒要緊密,防止漏出,漏出要重做3、濾筒高度要高于回流管3、多糖或糊精含量高的要先用冷水侵泡,干燥后再做。否則容易糊4、溫度保持在45度左右,每小時8到12個回流5、一定是無水乙醚
索氏煮沸抽提法快速測定糧食、油料中粗脂肪含量試驗
? 中華人民共和國國家標準中規定: 糧食、油料中的粗脂肪含量測定采用索氏抽提法。此方法經過長期操作實踐, 存在一定的弊端, 主要是操作時間長、試驗人員勞動強度大、水和電等能源消耗多。索氏抽提法測定一個樣品僅抽提時間就需要8h 以上, 整個試驗自始至終需要12h左右, 工作效率極低。為解決這些問題,
組織相溶性抗原基因分型中三種DNA快速抽提法比較
血液DNA抽提的質量和速度是影響組織相溶性抗原(HLA)基因分型效果的一個主要因素,目前普遍采用的標準酚-氯仿抽提法,因耗時較長,難以滿足臨床需求。為此,我們建立了NP-40法及辛酸法,進一步縮短時間,簡化了操作步驟。現將NP-40法、辛酸法與標準酚-氯仿抽提法對比研究結果報告如下。一、資料和方法本
溶酶體的新提法的介紹
關于溶酶體的類型和命名,有新提法。有研究資料表明,根據溶酶體的形成過程和功能,把溶酶體命名為前溶酶體(endolysosome)和溶酶體。晚期胞內體與脫包被的含有溶酶體酶的轉運小泡融合成前溶酶體,它從高爾基體或細胞膜上的轉運泡(如果是從細胞膜上通過胞飲作用在網格蛋白介導下回收的溶酶體酶則在脫去包
關于茶多酚的微波浸提法簡介
微波浸提法是最近幾年剛開始的一種新方法,基本原理是利用在微波場中分子發生高頻的運動,擴散速率增大,因此茶多酚等浸提物在微波的輻射作用下可快速浸取出來。利用微波輔助浸提,一般一次只要數分鐘的時間即可達到傳統浸提數小時的效果。因此大大的減少了茶多酚長時間在高溫下的氧化,提高產品的品質與收率。微波技術
溶酶體的新提法分類和命名介紹
關于溶酶體的類型和命名,有新提法。有研究資料表明,根據溶酶體的形成過程和功能,把溶酶體命名為前溶酶體(endolysosome)和溶酶體。晚期胞內體與脫包被的含有溶酶體酶的轉運小泡融合成前溶酶體,它從高爾基體或細胞膜上的轉運泡(如果是從細胞膜上通過胞飲作用在網格蛋白介導下回收的溶酶體酶則在脫去包
IgG抗體的粗提法提取球蛋白
大多用硫酸銨鹽析法或硫酸鈉鹽析法。硫酸銨鹽析須經過多次沉淀,第一次用40%飽和度,第二次用35%飽和度,第三次用33%飽和度,經三次提取后的γ球蛋白基本是IgG成分。硫酸鈉法更簡便,用20%即可將γ球蛋白沉淀出來。經鹽析后的γ球蛋白雖大多屬于IgG,但還有5%其他區帶蛋白,如γ區的雜蛋白。又因I