用質譜數據對肽段從頭測序實驗（三）
實驗材料蛋白樣品儀器、耗材質譜儀實驗步驟另外一種便于人工解析 CID 譜及從頭測序的化學方法是對肽段的羧基實行甲酯化。這個反應使肽段每一個羧基質量增加 14u, 包括未修飾的（末端、 Asp 和 Glu上的羧基。如果肽段中沒有酸性殘基，同時C未端沒有被修飾，那么只有 y 系列離子及其中性丟失離子會表現出質量數的變化，比較衍生化號未衍生化兩份樣品的碎片離子譜就會鑒定出 y 系列離子。如臭肽段中存在酸性殘基，這個方法的價值就極具有限了，因為只能鑒定中間碎片。對 N 末端殘基特異性標記從而鑒定b 系列離子的方法也有嘗此在這些實驗中肽段的氨基被衍生化，衍生化試劑在氣相中含有永久正電荷。雖然這些方法在概念上引人注目，但在實踐上遇到困難，主要由于在質譜分析衍生化物之前必須先你去過景的試劑，同時這個反應不能區別 N 末端氨基和賴氨酸側鏈上的氨基。展開......閱讀全文
用質譜數據對肽段從頭測序實驗（三）
實驗材料蛋白樣品儀器、耗材質譜儀實驗步驟另外一種便于人工解析 CID 譜及從頭測序的化學方法是對肽段的羧基實行甲酯化。這個反應使肽段每一個羧基質量增加 14u, 包括未修飾的（末端、 Asp 和 Glu上的羧基。如果肽段中沒有酸性殘基，同時C未端沒有被修飾，那么只有 y 系列離子及其中性丟失離子會表
用質譜數據對肽段從頭測序實驗
方案一 方案二 方案三 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 單級質譜測序是分析肽段的階梯序列，即相鄰肽段間相差一個氨基酸殘基，用質譜分析肽階梯，通常用 MALD
用質譜數據對肽段從頭測序實驗
實驗方法原理 單級質譜測序是分析肽段的階梯序列，即相鄰肽段間相差一個氨基酸殘基，用質譜分析肽階梯，通常用 MALDI-TOF,MS 分析。 MS/MS 測序用的是上文所述用于數據庫檢索的 CID 譜，但碎片離子由人工完全解析。用于MS 序列分析的肽階梯是由化學或酶法降解肽段產生，由 C 未端或N未端
用質譜數據對肽段從頭測序實驗（一）
實驗方法原理單級質譜測序是分析肽段的階梯序列，即相鄰肽段間相差一個氨基酸殘基，用質譜分析肽階梯，通常用 MALDI-TOF,MS 分析。 MS/MS 測序用的是上文所述用于數據庫檢索的 CID 譜，但碎片離子由人工完全解析。用于MS 序列分析的肽階梯是由化學或酶法降解肽段產生，由 C 未端或N未端斷
用質譜數據對肽段從頭測序實驗（二）
實驗材料蛋白樣品儀器、耗材質譜儀實驗步驟第二種方法，也稱為"nested peptide secquendng", 是在一個 Edman 降解循環中多次加入多肽/蛋白質底物心在此法中加入過量易揮發的 Edman 試劑以使反應完全，每一循環中的過顯試劑可通過蒸發被除去。經 MALDI-MS 分析得到肽
指尖“質譜”：納米孔技術打造便攜肽段質譜儀
質譜儀對蛋白質研究來說可謂是無價之寶，但是它們通常體積龐大，價格昂貴，局限于專門的實驗室。當下，生物醫學領域的下一個革命直指蛋白質組學——對不同細胞類型中表達的蛋白質進行大規模分析。盡管你的身體里每一個細胞似乎都攜帶相同的DNA，但不同細胞類型的蛋白質表達差異很大。此外，蛋白質生產出來后會被修飾
肽段
?·?????????Designing Your Peptide? (Genosys)·?????????Handling & Storage of Peptides?(Genosys)Two Dimensional Peptide Mapping?(Sefton Lab)??Synthesizi
蛋白質內序列分析用肽段的分離與純化實驗
試劑、試劑盒 考馬斯亮藍 G乙酸甲醇Achromobacter 胰蛋白酶 I 三氟乙酸乙腈2-丙醇儀器、耗材 SpeedVac 型旋轉濃縮器Tween-20UltrafreeTM MC 濾器C18 反相 HPLC 柱實驗步驟 材料與設備考馬斯亮藍 G(0.05% 的乙酸-20% 甲醇溶液）乙酸 (5
蛋白質內序列分析用肽段的分離與純化實驗
分子生物學中最重要的環節之一是對微量蛋白質進行分析，使對編碼待研究蛋白的 cDNA 序列的克隆成為可能。為有效地做到這一點，通常需要知道蛋白質的內序列。在這一方面，肽段的有效分離是極重要的。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南，作者：朱厚礎。試劑、試劑盒考馬斯亮藍 G乙酸甲醇Achromobacte
蛋白質內序列分析用肽段的分離與純化實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 考馬斯亮藍 G 乙酸 甲醇 Achromobacter 胰蛋白酶 I 三氟乙酸 乙腈 2-丙醇
質譜實驗質量控制之數據質控
質譜實驗的QC方法包括：樣品準備、液相色譜、質譜采集以及譜圖質量等。前兩期關于質譜污染物的防控，大部分是屬于樣品準備階段的質控工作。質控專題共分三期內容：1. 質譜污染的來源與防控篇2. 質譜原始數據中的污染物信息篇3. 質譜數據質控篇——Quic軟件介紹點擊目錄鏈接可以回顧往期，本期質控專題進行到
質譜解析（三）
分子離子峰的識別 A.在質譜圖中，分子離子峰應該是最高質荷比的離子峰(同位素離子及準分子離子峰除外)。 B.分子離子峰是奇電子離子峰。 C.分子離子能合理地丟失碎片(自由基或中性分子)，與其相鄰的質荷比較小的碎片離子關系合理。 D.氮律：當化合物不含氮或
布魯克新品發布@USHUPO
#摘要# 應用在免疫肽組學的PaSER? Novor，具有更快速、實時從頭測序的特點 使用PaSER 2023b蛋白質組學軟件實現無需構建譜圖庫的dia-PASEF數據分析（Library-free dia-PASEF?） 與Mass Dynamics合作, 實現4D-Proteomics
Pepfinder軟件對單克隆抗體進行肽圖分析（一）
1前言在蛋白質藥物產品的質控要求中，肽圖分析是其中重要的一環。肽圖分析包括對蛋白氨基酸序列進行確證及相關修飾的鑒定和定量。根據蛋白藥物質譜分析特點和生物制藥應用的特殊需求，Thermo Fisher與Amgen聯合開發了PepFinderTM 軟件。?PepFinder不僅具有最基本的肽段序列確證、
董夢秋：化學交聯質譜讓結構生物學研究如虎添翼
在蛋白質組學分析方法中，質譜獲得的是多肽序列結構的信息；那么用質譜是否可研究大分子蛋白的結構信息？近幾年來，董夢秋實驗室在中國做出了多項先驅性工作，主要集中在化學交聯質譜領域。在用單顆粒冷凍電鏡技術研究結構生物學屢創佳績的當下，很多研究者都把樣品一分為二，一份做冷凍電鏡，一份做交聯質譜。那么交聯
ESIMS實驗
ESI 三級四極質譜儀操作 ESI-離子阱質譜儀操作 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在 ESI源中，含有被分析樣品（多肽／蛋白質）的溶液流經一個細細的進樣針，針頭上
ESIMS實驗——ESI－三級四極質譜儀操作
實驗方法原理在 ESI源中，含有被分析樣品（多肽／蛋白質）的溶液流經一個細細的進樣針，針頭上加高電壓(+ 1000-5000V) 用來產生正離子，見圖 5.2a。高電壓導致樣品液流分散為呈噴霧狀的帶高電荷的微小液滴，質譜儀入口端的有孔平板上加有+ 100--1000V的低電壓，引導離子通過入口 （o
ESIMS實驗
實驗方法原理在 ESI源中，含有被分析樣品（多肽／蛋白質）的溶液流經一個細細的進樣針，針頭上加高電壓(+ 1000-5000V) 用來產生正離子，見圖 5.2a。高電壓導致樣品液流分散為呈噴霧狀的帶高電荷的微小液滴，質譜儀入口端的有孔平板上加有+ 100--1000V的低電壓，引導離子通過入
SCIEX學堂新課－|－質譜及數據的底層邏輯第2期—質譜數據概覽
質譜進階不用愁，短視頻輕松看“質譜攻略之質譜和數據的底層邏輯”，是“SCIEX 學堂”平臺中一個專注于分享質譜知識的實用技巧小課程。?親愛的質譜友友們，你是否曾對生命科學、藥物研發、食品、司法、環境監測等領域中的復雜的化合物分析或結構確認感到困惑？現在，讓我們一起探索質譜技術的奧秘，帶你深入了解質譜
一小時DDA鑒定DIA定量4000個Hela蛋白（一）
引言數據非依賴性的掃描模式（data-independent acquisition, DIA）是近幾年來發展的一種新的質譜數據采集方式[1]。它的理念是用二級碎片離子進行蛋白相對/絕對定量。 DIA 掃描模式中，超高分辨質譜對特定質量范圍內的所有母離子進行碎裂，采集所有母離子的碎片離子，并
磷酸化蛋白鑒定實驗
實驗材料測序級膜蛋白酶試劑、試劑盒二硫蘇糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯儀器、耗材螯合瓊脂糖凝膠層析介質實驗步驟這里所述的方法概括為下列幾個步驟：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性組分中的蛋白質（見 24. 3.1 )；固相金屬螯合親和層析（IMAC) 富集磷酸肽（見 24. 3. 2 )；用串聯質譜對磷酸
磷酸化蛋白鑒定實驗
實驗材料 測序級膜蛋白酶試劑、試劑盒 二硫蘇糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯儀器、耗材 螯合瓊脂糖凝膠層析介質實驗步驟 這里所述的方法概括為下列幾個步驟：胰蛋白酶水解消化膜和可溶性組分中的蛋白質（見 24. 3.1 )；固相金屬螯合親和層析（IMAC) 富集磷酸肽（見 24. 3. 2 )；用串
磷酸化蛋白鑒定實驗
實驗材料測序級膜蛋白酶 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒二硫蘇糖醇 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?碘代乙酰
一小時－DDA－鑒定－DIA－定量－4000－個－Hela－蛋白（一）
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各類實驗室用質譜儀質譜的功能特點對比
四極桿質譜儀 QMS是最常見的質譜儀器，定量能力突出，在GC-MS中QMS占絕大多數。 優點： 結構簡單、成本低、維護簡單； SIM功能的定量能力強，是多數檢測標準中采用的儀器設備。 缺點： 無串極能力，定性能力不足； 分辨力較低（單位分辨），存在同位素和其他m/z近似的
AB－SCIEX成功舉辦2012年質譜新品發布會
AB SCIEX公司孫世新博士 來自AB SCIEX公司孫世新博士為大家介紹了AB SCIEX質譜技術在蛋白質組學領域的最新應用。 TripleTOF? 5600+系統在MS和MS/MS，以及定性和定量模式下，都能夠同時具備高分辨率、高質量準確度、高采集
方案15標準條件下肽段的反相－HPLC實驗
實驗材料通過蛋白質消化得到的肽段混合物試劑、試劑盒乙腈去離子水蛋白質標準品三氟乙酸（TFAHPLC級）儀器、耗材HPLC 層析系統帶帽的聚丙烯試管反相層析柱實驗步驟展開
質譜三大熱門應用
質譜在組學中的應用無疑是當前最熱門的，而且各種組學都廣泛深入的得到了開展。這其中有一些比較有特色的應用領域，最近十分熱門，它們前景如何？技術瓶頸在哪里？市場推廣還有哪些問題，值得相關專業人士思考。??質譜成像技術（Imaging MS）誕生了近20年，最早主要是在二次離子質譜（SIMS）領域
首屆質譜論壇召開－質譜中心三年慶典
2010年10月15日上午，在秋高氣爽的收獲時節，首屆質譜論壇在北京師范大學曾憲莘樓勝利召開，同期舉辦了北京師范大學質譜中心成立三周年盛大慶典，以及質譜中心與美國布魯克道爾頓公
2015CNHUPO生物質譜高級研討會成功舉辦
2015年1月22日，“2015CNHUPO生物質譜高級研討會”在北京文津國際酒店隆重召開。此次活動以“蛋白定量”為主題，旨在積極促進我國生物質譜技術的發展和應用，加強國內外相關研究領域的專家學者之間的交流與合作。特邀Dr. Mike MacCo