多孔培養板中單層培養細胞生長曲線的繪制實驗
實驗方法原理以三種不同的細胞濃度在多孔板中培養三組細胞,在達到平臺期之前,每天計數一個板中的細胞。實驗步驟材料無菌單層細胞培養:A549、Vero 或 HeLa-S3, 75 cm2 培養瓶,晚對數期 1 瓶0.25% 粗制胰蛋白酶混合有 10 mmol/L EDTA 5 ml生長液,100 ml, 伴有 26 mmol/L NaHCO3 300 mlD-PBSA(預洗并用于細胞計數)50 ml12 孔培養板 10 塊非無菌:用于裝培養板的塑料盒CO2 溫箱或 5% CO2 以充盈塑料盒操作步驟1. 對于一般的傳代,先用胰蛋白酶消化細胞(見方案 13.2)。2. 稀釋細胞懸液分別至 1X105 個/ml,3X104 個/ml 和 1X104 個/m l,每種濃度均含 25 ml 培養基。3. 用 3 塊 12 孔板,每孔一種細胞濃度,每孔 2 ml 細胞懸液。......閱讀全文
多孔培養板中單層培養細胞生長曲線的繪制實驗
實驗方法原理以三種不同的細胞濃度在多孔板中培養三組細胞,在達到平臺期之前,每天計數一個板中的細胞。實驗步驟材料無菌單層細胞培養:A549、Vero 或 HeLa-S3, 75 cm2?培養瓶,晚對數期 1 瓶0.25% 粗制胰蛋白酶混合有 10 mmol/L EDTA 5 ml生長液,100 ml,
多孔培養板中單層培養細胞生長曲線的繪制實驗
實驗方法原理 以三種不同的細胞濃度在多孔板中培養三組細胞,在達到平臺期之前,每天計數一個板中的細胞。實驗步驟 材料無菌單層細胞培養:A549、Vero 或 HeLa-S3, 75 cm2 培養瓶,晚對數期 1 瓶0.25% 粗制胰蛋白酶混合有 10 mmol/L EDTA 5 ml生長液,100 m
多孔培養板中單層培養細胞生長曲線
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以三種不同的細胞濃度在多孔板中培養三組細胞,在達到平臺期之前,每天計數一個板中的細胞。 實驗步驟 材料 無菌 單層細胞培養:A549、V
培養瓶中單層培養細胞生長曲線的繪制實驗
實驗方法原理開始一系列的培養,每天在一定的時間計數細胞直至它們到達平臺期。實驗步驟材料無菌單層細胞培養,A549,Vem 或 HeLa-S3, 75 cm2?培養瓶,晚對數期 1 瓶0.25% 粗制胰蛋白酶,混合有 lOmmol/L EDTA 5 ml生長液,含 2 mmol/LNaHC03?200
培養瓶中單層培養細胞生長曲線的繪制
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 開始一系列的培養,每天在一定的時間計數細胞直至它們到達平臺期。 實驗步驟 材料 無菌 單層細胞培養,A549,Vem 或 HeLa-S3,
懸浮培養細胞生長曲線的繪制實驗
實驗方法原理以三種不同細胞濃度進行系列細胞培養,每天計數細胞直至平臺期。實驗步驟材料無菌懸浮細胞培養培養液,l00 mlD-PBSA(細胞計數用)24 孔板非無菌裝培養板的塑料盒CO2?溫箱或 5% C02?以充盈塑料盒操作步驟1. 如單層培養那樣(見方案 21.8 ) 將生長液中的細胞懸液以不同濃
懸浮培養細胞生長曲線的繪制實驗
實驗方法原理 以三種不同細胞濃度進行系列細胞培養,每天計數細胞直至平臺期。實驗步驟 材料無菌懸浮細胞培養培養液,l00 mlD-PBSA(細胞計數用)24 孔板非無菌裝培養板的塑料盒CO2 溫箱或 5% C02 以充盈塑料盒操作步驟1. 如單層培養那樣(見方案 21.8 ) 將生長液中的細胞懸液以不
懸浮培養細胞生長曲線的繪制實驗
實驗方法原理以三種不同細胞濃度進行系列細胞培養,每天計數細胞直至平臺期。實驗步驟 材料 無菌 懸浮細胞培養 培養液,l00 ml D-PBSA(細胞計數用) 24 孔板 非無菌 裝培養板的塑料盒 CO2 溫箱或 5% C02 以充盈塑料盒 操作步驟 1. 如單層培養那樣(見方案 21.8
方案-21.9-懸浮培養細胞生長曲線的繪制實驗
方案21.9 懸浮培養細胞生長曲線的繪制 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以三種不同細胞濃度進行系列細胞培養,每天計數細胞直至平臺期。
特殊細胞培養實驗_多孔塑料培養板單細胞克隆法
實驗方法原理多孔塑料培養板克隆細胞的主要過程是1. ?制備出1~2 細胞/毫升低密度的細胞懸懸液;2. ?向多孔塑料培養板各孔中分別接種細胞懸液0.5~1 ml,則每孔平均含1 個細胞。3. ?鏡下檢測每孔所含細胞數,標記下含單細胞的孔,置溫箱培養,數日后凡在已標記的孔中有生長增殖的細胞群即為克隆細
酶標板-多孔細胞培養板差別
酶標板一般要比細胞培養板貴,細胞板主要做細胞培養,但也可以用來測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不能用做細胞培養,它主要做免疫酶聯反應后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標工作液。
單層培養細胞更換培養液實驗
實驗方法原理以肉眼和倒置顯微鏡觀察培養物,若有指征,如PH降低,則去除舊培養基加如新鮮培養基,再重新放入溫箱培養。實驗步驟材料無菌培養的細胞:A549細胞,以2×10^4ml接種到25cm2培養瓶后4天……4瓶生長培養液……………………………………………………100ml例如:Eagle1×MEM含H
單層培養細胞更換培養液實驗
實驗方法原理以肉眼和倒置顯微鏡觀察培養物,若有指征,如PH降低,則去除舊培養基加如新鮮培養基,再重新放入溫箱培養。實驗步驟材料無菌培養的細胞:A549細胞,以2×10^4ml接種到25cm2培養瓶后4天……4瓶生長培養液……………………………………………………100ml例如:Eagle1×MEM含H
方案-13.1-單層培養細胞更換培養液實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 以肉眼和倒置顯微鏡觀察培養物,若有指征,如PH降低,則去除舊培養基加如新鮮培養基,再重新放入溫箱培養。 實驗步驟 材料無菌培養的細胞:A549
病毒的培養方法實驗—組織培養法原代細胞單層培養
實驗方法原理組織培養是目前培養病毒應用最廣的一種培養方法,其優點是①經濟適用,結果正確且敏感;②較實驗動物易于控制。原代細胞單層培養法,是指動物(包括脊椎動物和無脊椎動物)的組織自機體取出后,經胰酶或其他細胞分散劑消化處理,得到單個細胞懸液。以一定量接種到特定容器中,加入細胞生長所必需的營養液,置合
體細胞融合實驗——單層培養細胞的融合
實驗材料細胞試劑、試劑盒PEG-1000儀器、耗材培養基實驗步驟1. 以適當的培養基培養細胞至接近匯合成片的密度(80% 匯合率)。2. 吸干 60 mm 規格平皿或 T-25 培養瓶中的培養基,加 2 ml 50% PEG-1000,輕輕轉動 1 分鐘讓該粘稠液體覆蓋所有細胞。3. 往培養皿或瓶中
免疫沉淀的培養細胞的裂解實驗_單層培養的細胞的裂解
實驗方法原理培養的動物細胞一般使用溫和去垢劑來裂解。如果低濃度的去垢劑就能引起細胞的充分裂解(如1%NP-40或1%TritonX-100),那么這對目標蛋白的影響可能比勻漿方法更溫和。去垢劑的選擇必須根據免疫沉淀所用的抗體的識別表位的性質來決定。實驗材料單層細胞或懸浮細胞試劑、試劑盒裂解緩沖液PB
單層細胞培養的概念
在動物培養中,一經貼壁就迅速鋪展并開始有絲分裂,逐漸形成致密的細胞單層,這種培養方法稱為單層細胞培養(single layer cell culture)。
晶狀體細胞培養特點和生長曲線
晶狀體是一個雙凸透鏡狀富于彈性的透明體。位于虹膜、瞳孔之后,玻璃體之前,借晶狀體懸韌帶與睫狀體聯系。晶狀體后表面的凸度大于前面,是重要的屈光間質之一。晶狀體囊膜是在胎生期內有晶狀體上皮細胞分泌的具有基底性質的膠原彈性膜,是一層無細胞的透明薄膜,完整地包繞在晶狀體周圍。前囊膜下一層立方晶狀體上皮細胞分
細胞生長曲線實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞生長曲線是測定細胞絕對生長數的常用方法,是判定細胞活力的重要指標。一般細胞傳代之后,經過短暫的懸浮然后貼壁,隨后度過長短不同的潛伏期,即進入大量分裂的指數生長期。為了準確描述整個過程中細胞數目的動態變化,典型的生長曲線可分為
細胞生長曲線實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細胞生長曲線是測定細胞絕對生長數的常用方法,是判定細胞活力的重要指標。一般細胞傳代之后,經過短暫的懸浮然后貼壁,隨后度過長短不同的潛伏期,即進入大量分裂的指數生長期。為了準確描述整個過程中細胞數目的動態變化,典型的生長曲線可分為
細胞生長曲線實驗
細胞生長曲線可應用于:(1)測定細胞絕對生長數;(2)判定細胞活力。實驗方法原理細胞生長曲線是測定細胞絕對生長數的常用方法,是判定細胞活力的重要指標。一般細胞傳代之后,經過短暫的懸浮然后貼壁,隨后度過長短不同的潛伏期,即進入大量分裂的指數生長期。為了準確描述整個過程中細胞數目的動態變化,典型的生長曲
細胞生長曲線實驗
實驗方法原理 細胞生長曲線是觀察細胞生長基本規律的重要方法。只有具備自身穩定生長特性的細胞才適合在觀察細胞生長變化的實驗中應用。因而在細胞系細胞和非建系細胞生長特性觀察中,生長曲線的測定是最為基本的指標。細胞生長曲線的測定一般可利用細胞計數法進行。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 D-Hanks液牛血清R
用[32P]磷酸標記細胞實驗_標記單層培養細胞
實驗材料HeLa 細胞試劑、試劑盒FCS磷酸鹽儀器、耗材無磷酸培養基實驗步驟1. 在含 10% FCS 的培養基中單層培養 HeLa 細胞至鋪滿 50% 左右。2. 倒掉完全培養基,加入新鮮的無磷酸培養基,培養 3~4 小時以耗盡胞內的磷酸儲備。3. 換新鮮的無磷酸培養基,并加?32P 磷酸鹽至 2
細胞生長的培養過程
培養細胞生長過程:潛伏期→指數增生期→停滯期 一、潛伏期(latent phase): 細胞接種后,先經過一個在培養液中呈懸浮狀態的懸浮期.此時,細胞質回縮,胞體呈圓球形.然后細胞貼附于載體表面,稱貼壁,懸浮期結束. 細胞貼壁速度與細胞種類,培養基成分,載體的理化性質等密切相關。一般情況下,
桿狀病毒儲液制備實驗——從單層培養中制備
實驗材料單層培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒(野生型的或重組)試劑、試劑盒含10%胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材150 mm 培養瓶27℃ 培養箱倒置顯微鏡帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機帶螺口蓋的凍存管液氮罐500 ml 旋轉細胞培養瓶多轉瓶的攬拌臺實驗步驟1
細胞培養板的選擇
1)細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型); 2)培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等; 3)根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。
細胞培養板的選擇
Edit By Waiting.D細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。(1)平底和圓底(U型和V
12板培養細胞加培養液多少
6孔板底面積9.6cm2,加培養液的量2.5ml。12孔板底面積4.5cm2,加培養液的量2ml。24孔板底面積2cm2,加培養液的量1ml。96孔板底面積0.32cm2,加培養液的量0.1ml。無毒和無菌是體外培養細胞的首要條件。細胞在活體內,解毒系統和免疫系統可抵抗微生物或其他有害物質的入侵,但
繪制細胞增殖曲線
實驗概要為了掌握細胞的增殖速率,常用的方法有不同時間點細胞數目統計、MTT法繪制增殖曲線等。下面以MTT法為例,簡述繪制增殖曲線的方法。實驗原理活細胞線粒體中的脫氫酶能夠還原黃色的MTT為藍紫色的不溶于水的甲瓉(formazan),甲瓉的多少可通過酶標儀測定其在490nm處的光密度(Optical