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免疫印跡法 （以檢測流行性出血熱病毒結構蛋白和 NP 核蛋白為例說明）實驗方法原理免疫印跡法 是將電泳與免疫酶染色結合起來的一種方法。它先經電泳 (SDS--PAGE)將病毒結構蛋白進行分離，通過轉印將被分離的各區帶原位轉移到硝酸纖維素膜 (nitrocellulose membrane, NC 膜）上， NC 膜當成包被抗原的固相載體，病毒的結構蛋白能與特異性的第一抗體發生反應，借助酶標記第二抗體及底物，在相應部位顯現出來，以證明病毒結構蛋白的存在。所以操作分為電泳、轉印和酶免疫測定三個階段。實驗材料流行性出血熱病毒試劑、試劑盒丙烯酰胺單體、雙體過硫酸銨TEMED蛋白Marker10% 甘油考馬斯亮藍流行性出血熱病毒抗血清或恢復期病人血清或特異性單克隆抗體抗兔或抗人IgG 辣根過氧化物酶結合物3 3'-二氨基聯苯胺及 H202 原液儀器、耗材電泳儀垂直電泳槽高速離心機電轉移儀硝酸纖維素膜脫色搖床實驗步驟1) 樣品制備：......閱讀全文
6月30日，國家食品藥品監督管理總局在網站上發布新聞，表示以2014年第30號公告形式頒布了《子宮刮匙》等120項推薦性醫療器械行業標準。這是今年6月1日起新修訂的《醫療器械監督管理條例》施行后頒布的第一批醫療器械行業標準。標準的正式頒布將推動醫療器械監督管理，對保障醫療器械安全有效、促進醫療器
(一)皮內試驗 (intrader rpmal test,ID) 宿主在病原體刺激后，體內產生親細胞性抗體(IgE和IgG4)。當其與相應抗原結合后，肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒，釋放生物活性物質，引起注射抗原的局部皮膚出現皮丘及紅暈，以此便可判斷體內是否某有種特異性抗體存在。 (二)免疫
(一)皮內試驗 (intrader rpmal test,ID) 宿主在病原體刺激后，體內產生親細胞性抗體(IgE和IgG4)。當其與相應抗原結合后，肥大細胞和嗜堿性粒細胞脫顆粒，釋放生物活性物質，引起注射抗原的局部皮膚出現皮丘及紅暈，以此便可判斷體內是否某有種特異性抗體存在。 (二)
1、定義用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究，這種技術稱為免疫組織化學（immunohistochemistry）技術或免疫細胞化學（immunocytochemistry）技術。2、原理根據抗原抗體反應和化學顯色原理，組織切片或細胞
檢測自身免疫抗體的蛋白質芯片技術 自身免疫性疾病是由異常免疫反應引起的慢性退行性或炎癥性疾病。不同的自身免疫性疾病對機體的影響各有不同。例如，在多發性硬化癥中，自身免疫反應的侵害對象是中樞神經系統，而在克羅恩病中則是腸道。此外，同種疾病對不同個體的組織和器官的影響程度不盡相同。 此類
免疫印跡技術又稱Western印跡法，它將凝膠電泳與固相免疫結合，首先通過蛋白質電泳技術將需要區分的蛋白質轉移至固相載體如NC膜等上，再借助酶免疫、放射免疫等技術進行測定。該法能分離分子大小不同的蛋白質并確定其分子質量，常用于檢測多種病毒抗體或抗原。免疫印跡技術又稱Western印跡法，它將凝膠電泳
食物病原微生物是食品安全的重要內容，而對其的快速檢測（驗）一直是相關研究的熱點。近年來，微生物的快速檢測和自動化研究進展迅速。依靠培養基進行培養、分離及生化鑒定的傳統方法費時費力。快速檢測及其自動化則綜合引用微生物學、化學、分子生物學、生物物理學、免疫學以及血清學試驗技術對微生物進行分離、檢測、鑒定
四種類型超敏反應發生的機制不同，同一抗原也可在不同條件下引起不同類型的超敏反應。四種類型超敏反應的免疫檢測方法有所不同。Ⅰ型超敏反應主要檢測過敏原和測定血清特異性IgE.Ⅱ型超敏反應的檢測重點是抗血細胞抗體。Ⅲ型超敏反應主要檢測循環免疫復合物。Ⅳ型超敏反應可用皮膚試驗來檢測。 一、過敏原皮膚試驗
作者：首都醫科大學附屬北京佑安醫院 閆惠平自身抗體(autoantibodies)是指由于各種原因導致機體產生的針對自身組織成分的抗體，可以是生理性，也可以是病理性的。正常人群中自身抗體的存在相當普遍，其作用之一就是清除體內衰老及死亡的細胞，但是生理性自身抗體一般滴度很低，只有達到一定的檢測閾值才具
自身免疫性疾病是由異常免疫反應引起的慢性退行性或炎癥性疾病。不同的自身免疫性疾病對機體的影響各有不同。例如，在多發性硬化癥中，自身免疫反應的侵害對象是中樞神經系統，而在克羅恩病中則是腸道。此外，同種疾病對不同個體的組織和器官的影響程度不盡相同。此類疾病的嚴重程度取決于患者的免疫系統情況。其人群患病率
一、核酸分子雜交技術1961年Hall開拓了液相核酸雜交技術的研究，其基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序，通過堿基對之間非共價鍵的形成，出現穩定的雙鏈區，形成雜交的雙鏈。自此以后，由于分子生物學技術的迅猛發展，特別是70年代末到80年代初，分子克隆、質粒和噬菌體DNA的構建成功，核酸自動
一、核酸分子雜交技術1961年Hall開拓了液相核酸雜交技術的研究，其基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序，通過堿基對之間非共價鍵的形成，出現穩定的雙鏈區，形成雜交的雙鏈。自此以后，由于分子生物學技術的迅猛發展，特別是70年代末到80年代初，分子克隆、質粒和噬菌體DNA的構建成功，核酸自動
3.2 免 疫 B 細胞的制備血清效價有意義(>1 : 1000)的免疫后動物可以提供抗原反應性B 細胞用于融合。這些細胞可以從脾臟或淋巴結中獲得。動物用吸人CO2 處死，在無菌操作下取組織，放 在 4°C無血清培養基中，最多可放lh 。用懾子或針頭輕輕打開組織脾臟或淋巴結的外包膜獲得
一、膠體金的穩定性及免疫膠體金的貯存膠體金具有很高的動力學穩定性，在穩定因素不受破壞時自身凝聚極慢，可放置數年不發生凝聚。影響穩定的因素主要有電解質、溶膠濃度、溫度、非電解質等。 金溶膠必須有少量電解質作穩定劑，但濃度不宜過高。高濃度親水性非電解質能剝去膠粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物質
膠體金標記技術是以膠體金作為示蹤標志物或顯色劑，應用于抗原抗體反應的一種新型免疫標記技術。由于它不存在內源酶干擾及放射性同位素污染等問題，且利用不同顆粒大小的膠體金還可以作雙重甚至多重標記，使定位更加精確。因此已成為繼熒光素、酶、同位素及乳膠標記技術之后的一種新型標記技術。現已廣泛應用于電鏡、流式細
一、免疫膠體金技術的基本知識1、膠體金的概念氯金酸(HAuCl4)在還原劑作用下，可聚合成一定大小的金顆粒，形成帶負電的疏水膠溶液。由于靜電作用而成為穩定的膠體狀態，故稱膠體金。2、免疫金標記技術膠體金顆粒表面負電荷與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。膠體金對蛋白質有很強的吸附功能，蛋白質
一、Hp感染主要診斷方法Hp感染的診斷有多種較為可靠的方法,可從檢測原理、檢測意義以及對人體有無創傷等多角度進行各種不同分類。一般依據對人體有無創傷分為侵入性和非侵入性診斷方法。侵入性診斷方法主要是依賴胃鏡活檢的方法，包括：快速尿素酶試驗(RUT)、胃黏膜直接涂片革蘭染色鏡檢、胃黏膜組織切片染色鏡檢
蛋白質印跡法（免疫印跡試驗）即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。 蛋白質印跡法是由瑞士米歇爾
1：抗體查詢常用名詞 Reactivity （物種與抗體反應）：Species with which the antibody reacts Host Species （宿主）：Host in which the antibody was generated Applicati
植物病毒病是農業生產上一種重要病害，嚴重影響農作物的產量和質量, 目前還沒有1種治療效果較理想的藥劑，對發病植株做到早期診斷及提前檢測就顯得尤為重要。植物病毒學歷經近百年的發展，植物病毒的檢測方法與手段也在不斷發展與改進。常用的方法有侵染力測定法、血清學方法、電子顯微鏡計數和分子生物學法等。1.1侵
摘要 近年來梅毒的發病率有逐年增加的趨勢、研究新的快速、價廉、簡便、敏感且特異的診斷方法是當前主要研究熱點，而設計新試劑盒的關鍵在于，對現有試劑盒優、缺點的認識和改良，利用人工合成梅毒螺旋體原設計出新的檢測方法。對梅毒螺旋體抗原的分析及人工合成，國外早在1989年就已開始進行，幾年來發展迅
摘要：本文論述了轉基因農產品、食品的安全性問題以及對轉基因食品從基因、基因轉錄、基因翻譯表達三個層面的檢測技術做了概述。 關鍵詞：轉基因食品 轉基因農產品 食品安全 生物技術 檢測技術 Abstract: discuss on the question Genetically modifi
1：抗體查詢常用名詞Reactivity （物種與抗體反應）：Species with which the antibody reactsHost Species （宿主）：Host in which
實驗概要通過注射在體外用TAg致敏過的來自于DC細胞的外質體，在體內誘導了弓形蟲屬特異性Th1分子免疫應答并獲得了抗弓形蟲感染的保護效應。研究證實致敏的DC衍生外質體能夠對鼠弓形蟲感染和其它某些病原感染產生免疫保護。這種無細胞疫苗對于人類疫苗策略是一種很有吸引力的保護工具。實驗材料動物：8-10周齡
實驗概要通過注射在體外用TAg致敏過的來自于DC細胞的外質體，在體內誘導了弓形蟲屬特異性Th1分子免疫應答并獲得了抗弓形蟲感染的保護效應。研究證實致敏的DC衍生外質體能夠對鼠弓形蟲感染和其它某些病原感染產生免疫保護。這種無細胞疫苗對于人類疫苗策略是一種很有吸引力的保護工具。實驗材料動物：8-10周齡
感染是病原體以某種傳播方式從傳染源傳播到易感者，并在宿主體內生長繁殖、釋放毒素或導至機體內微生態平衡失調的病理生理過程，大多數病原體是由外界侵入的，受病原體侵襲力、致病力及宿主免疫狀態等多種因素的影響，其破壞人體內的微生態平衡后機體產生各種不同的感染狀態，出現感染性疾病。 為了確定感染的發
蛋白質免疫印跡雜交實驗（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單，但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差，導致剛進實驗室的小伙伴們，實
蛋白質免疫印跡雜交實驗（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單，但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差，導致剛進實驗室的小伙伴們，實
蛋白質免疫印跡雜交實驗（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單，但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差，導致剛進實驗室的小伙伴們
蛋白質免疫印跡雜交實驗（Western Blotting）是成熟 mRNA 翻譯指導蛋白質合成量分析檢測手段中最經典和最廣泛為業界認可的一種,也是論文中最常見的數據呈現形式之一。雖然Western Blot實驗原理比較簡單，但是實驗耗時長、步驟繁瑣和實驗結果重復性差，導致剛進實驗室的小伙伴們