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    小鼠胚胎成纖維細胞的原代培養

    實驗概要小鼠胚胎成纖維細胞的原代培養主要試劑75%酒精、0.05%Trypsin、SP、DPBS、細胞基礎培養液 主要設備35 mm培養皿、60 mm培養皿、100 mm培養皿、15 mL離心管、50 mL離心管、凍存管、眼科剪、眼科彎鑷、離心機實驗材料懷孕13.5天【將成年雌、雄小鼠放在同籠中飼養,使其自由交配,待成功交配后,以檢到陰道栓的時間記為懷孕0.5天(0.5dpc)。用滴管輕觸陰道口處,若有乳白色、固態膠狀物即陰道栓】的小鼠(CF1品系或ICR等品系【小鼠的品種和品系很多,是實驗動物中培育品系最多的動物。目前世界上常用的近交品系小鼠約有250多個,均具有不同特征。在干細胞培養中經常用到的小鼠品系有CD-1、ICR、C57BL/6等。CF1和ICR品系的小鼠產仔率高,性價比較高,并且CF1品系的小鼠來源的飼養層細胞適合培養人的胚胎干細胞。】)。實驗步驟(1)實驗準備:準備3個100 mm培養皿、2個60 mm......閱讀全文

    一文了解成纖維細胞研究

      本文中,小編整理了多篇研究成果,共同解讀科學家們在成纖維細胞研究領域取得的新進展,分享給大家!  圖片來源:Brian Aguado  【1】Science子刊:經導管主動脈瓣置換術介導肌成纖維細胞失活,促進心臟重塑  doi:10.1126/scitranslmed.aav3233  在一項新

    大鼠淋巴成纖維細胞提取物的應用!

      一、背景   大鼠淋巴成纖維細胞提取物是從大鼠原代淋巴成纖維細胞提取的,大鼠原代淋巴成纖維細胞從正常大鼠淋巴組織制備可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。   大鼠淋巴成纖維細胞分離自正常大鼠淋巴節,成纖維細胞是胚胎中胚層起源的間葉細胞。它們被廣泛地用于細胞和分

    腫瘤細胞培養

    腫瘤細胞在組織培養中占有核心的位置,首先癌細胞是比較容易培養的細胞。當前建立的細胞系中癌細胞系是最多的。另外腫瘤對人類是威脅最大的疾病。腫瘤細胞培養是研究癌變機理、抗癌藥檢測、癌分子生物學極其重要的手段。腫瘤細胞培養對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。一、組織培養腫瘤細胞生物學特性腫瘤細胞與體內正

    常見細胞系細胞培養基使用選擇建議

    選擇培養基沒有一定的標準,有幾點建議可供參考: (1)建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞首選的培養基。可以查閱參考文獻,或在購買細胞株時咨詢。 (2)其它實驗室慣用的培養基不妨一試,許多培養基可以適合多種細胞。 (3)根據細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養基。如小鼠細胞株

    原代細胞培養在藥物測試的使用與注意事項

    長期以來,科學家多依賴永生化的細胞系來進行各種研究,但在過去十年,隨著細胞生物學的發展,細胞培養領域發生了巨大變化,新型的技術和培養試劑讓使用原代細胞作為研究對象成為可能。相比于細胞系,原代細胞更多保留了體內原始組織的生物學特征,如生長和衰老,因此通過原代細胞可建立更好的細胞疾病模型。 原

    組織培養腫瘤細胞生物學特性和腫瘤細胞細胞系的培養-2

    2.培養基: 腫瘤細胞對培養基的要求不如正常細胞嚴格,一般常用的 RPMIl640、  DMEM、Mc-Coy5A等培養基等皆可用于腫瘤細胞培養。腫瘤細胞對血清的需求比正常細胞低,正常細胞培養不加血清不能生長,腫瘤細胞在低血清培養基中也能生長。腫瘤細胞對培養環境適應性較大,是因腫瘤細胞有自

    原代胚胎成纖維細胞培養

    原代胚胎成纖維細胞培養             實驗方法原理 細胞培養是模擬機體內生理條件,將細胞從機體內取出,在人工條件

    抗炎藥物雙氯芬酸或有望增強心肌細胞的重編程

      一旦發生損傷,人類機體的心臟就很難自我修復,因此這就是治療人類心力衰竭的首要任務,恢復心臟功能的一種方法就是重編程非心臟的體細胞,比如利用一組心臟轉錄因子將成纖維細胞重編程為心肌細胞;這或許就避免了使用干細胞作為中間體的需要,同時也避免了刺激現有心肌細胞的增殖,然而與胚胎的成纖維細胞相比,出生后

    方案27.6 斑馬魚胚胎細胞的培養

    成纖維細胞飼養層 原代培養 細胞系             實驗方法原理 通過用鏈酶蛋白酶除去絨毛膜、

    斑馬魚胚胎細胞的培養

    成纖維細胞飼養層 原代培養 細胞系             實驗方法原理 通過用鏈酶蛋白酶除去絨毛膜、

    Sci Rep:線粒體衰老學說還站得住腳嗎?

      衰老的進程可以被延遲或者逆轉嗎?由指派專家 Jun-Ichi Hayashi教授(來自日本筑波大學)領導的研究表明,在人類細胞系中,這種情況是有可能的。研究發現,控制甘氨酸表達的兩個基因在一定程度上與一些衰老特征密切相關。Hayashi教授和他的研究團隊得出了這個令人振奮的發現,同時解答了衰老學

    斑馬魚胚胎細胞的培養——成纖維細胞飼養層

    實驗方法原理通過用鏈酶蛋白酶除去絨毛膜、用添加成分的 FGF 培養液培養細胞和采用不同的胰蛋白酶消化篩選成纖維細胞,用原腸胚期斑馬龜的胚胎成纖維細胞制備飼養層 [ Sun et al., 1995a ]。實驗材料鏈酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTA受精后8h的胚胎FB

    原代胚胎成纖維細胞培養

    實驗方法原理細胞培養是模擬機體內生理條件,將細胞從機體內取出,在人工條件下培養,使細胞生存、生長、繁殖和傳代,從而可以進行細胞生命過程、細胞癌變等問題的研究。由體內直接取出組織或細胞進行細胞培養叫做原代細胞培養,也有的把第1代細胞與傳10代以內的細胞培養統稱為原代細胞培養。一般來說,用幼嫩狀態的組織

    2月25日《自然》雜志精選

        封面故事:   400萬年前的颶風活動   早上新世(距今500萬至300萬年前)是一個在地質史上被認為與當今全球變暖最接近的時期。古氣候數據表明,那個時期與厄爾尼諾相似的氣候狀況持續不斷,整個熱帶太平洋海洋表面溫度近乎恒定。Alexey Fedorov及其同事利用一個颶

    廣州生物院發現重編程過程中的新細胞生物學機制

      誘導多能干細胞技術可以將普通的體細胞重編程為具有與胚胎干細胞類似的分化潛能的細胞,也就是說獲得的誘導多能干細胞具有分化成為體內絕大多數種類細胞的能力。與這一技術密切相關的細胞移植也已經被認為是治療部分遺傳病,器官損傷以及神經退行性疾病等的重要潛在手段。而建立該技術的科學家也憑此獲得了2012年度

    專訪中科院惠利健 人源性人工肝入選年度十大醫學進展

      當嬰兒呱呱墜地、胚胎干細胞分化為成體細胞的那一刻,多數細胞的功能和命運似乎被定格,并開啟了不可逆的時鐘發條。然而腫瘤組織中層出不窮的基因突變和永生化癌細胞,卻以最慘烈的方式昭示著細胞命運的其他可能。隨著克隆技術和人工誘導多能干細胞的出現,改寫細胞命運的傳奇更走入了再生醫學和腫瘤研究的聚光燈下。 

    小鼠胚胎成纖維細胞MEF培養相關知識總結

    小鼠胚胎成纖維細胞的富集1、給13-14天的孕鼠注射大約0.5ml阿佛丁。當鼠麻醉后,實施斷頸法處死小鼠。2、用70%乙醇擦拭腹部,把皮膚向后拉,暴露出腹膜。用消毒過的工具,剪開腹壁以暴露出子宮角。將子宮角移到10cm的皿里。用10ml不含鈣鎂離子的PBS洗三遍。3、用剪刀剪開每一測的胚囊,并將胚胎

    科學家將非搏動性人類細胞轉變成為心肌細胞

    這是心肌細胞的一幅3維圖像,該心肌細胞是通過一個叫做直接重新編程的過程從成纖維細胞轉變而來的。直接重新編程使得一種類型的細胞能夠在無需首先轉變成一個干細胞的情況下轉變成為另外一種類型的細胞。 Srivastava博士及其團隊發現了可將人的成纖維細胞轉變成為心肌細胞的基因組合。   2013年8月

    在將皮膚細胞轉變成神經元細胞研究中取得突破性進展

    Dr. Zhiping 與 Dr. Ami Citri合作,在操控人類胚胎和出生后的成纖維細胞轉變成功能性的神經元細胞(iN)的研究中取得突破性研究進展。 應用- 單細胞基因表達 Fluidigm技術- Biomark系統- 48.48動態微流體整合芯片 介紹美國斯坦福

    細胞的純化的兩種方法

    細胞的純化的兩種方法細胞的純化一般分為兩種,即自然純化很人工純化.常用的純化方法有,酶消化法,細胞因子依賴純化法,機械刮除法,反復貼壁法,電烙篩選法. 體外培養的細胞源于人或動物或胚胎組織,體內的細胞都是混雜生長,每一種組織都有血管和間葉組織,因此,來源于上述組織的培養材料的原代細胞、傳代

    細胞的純化的兩種方法

    細胞的純化一般分為兩種,即自然純化很人工純化.常用的純化方法有,酶消化法,細胞因子依賴純化法,機械刮除法,反復貼壁法,電烙篩選法. 體外培養的細胞源于人或動物或胚胎組織,體內的細胞都是混雜生長,每一種組織都有血管和間葉組織,因此,來源于上述組織的培養材料的原代細胞、傳代細胞絕大多數都呈混合生長,既有

    比類器官還要高級的操作——類裝配體

      【前沿技術】Nature最新揭露:比類器官還要高級的操作——類裝配體  01研究背景  類器官大部分來源于能自我分化的干細胞,常形成三維細胞團,具有器官的部分特性,但是此類模型未考慮到天然的組織結構和微環境,而且大量的細胞從生理環境中取出都會改變其特性。  這篇研究中使用了正常膀胱干細胞或膀胱腫

    從皮膚里提取萬能細胞:無倫理學爭論的重大發現

    干細胞的另一個名字叫“萬能細胞”,它們通常能夠成為受損組織與器官的“個性化”替代品。身體里有個類似于女媧的“干細胞”。女媧是摶土造人,干細胞的任務就是分化出各種功能細胞。然后這些細胞再進行特定的組合,行成我們身體內的各個組織和器官。故稱為讓生命延續的干細胞。我們的皮膚劃破了,過兩天自己就會愈合,又或

    腫瘤細胞的培養(二)

    二、培養方法 腫瘤細胞培養成功關鍵在于:取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面,腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養并無原則差別,初代培養應用組織塊和消化培養法均可。 1.取材: 人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要,體積較大的腫瘤組織中有退變或壞

    劉伯寧:評全球首個胚胎干細胞藥物

    獲準進入臨床研究  實現組織器官的修復和再生是臨床醫學研究人員和生物學家多年來夢寐以求的事情。1996年,當英國科學家利用動物體細胞克隆技術制造出克隆羊“多莉”時,人們看到這一夢想實現的可能。但隨后由于“體細胞克隆技術”備受爭議,政策等因素的限制,“人的體細胞克隆技術”在近十余年進展緩慢。

    蛋白質組最新研究進展

      蛋白質組(Proteome)的概念最先由Marc Wilkins提出,指由一個基因組,或一個細胞、組織表達的所有蛋白質。 蛋白質組的概念與基因組的概念有許多差別,它隨著組織、甚至環境狀態的不同而改變。 在轉錄時,一個基因可以多種mRNA形式剪接,一個蛋白質組不是一個基因組的直接產物,蛋白質組中蛋

    原代細胞的培養與建系-3

    下面為美國標準細胞庫或細胞銀行(ATCC)入庫細胞的基本要求:   (1)培養簡歷 組織來源日期、物種、組織來源、性別、年齡、供體正常或異常健康狀態,細胞已傳代數等。   (2)凍存液 培養基和保護劑名稱。 &

    合適的小鼠胚胎干細胞胞質分裂阻斷微核試驗CBMn分析

    實驗概要觀察表明,加入細胞松弛素-B到小鼠胚胎干細胞(mESC)的培養誘導細胞凋亡作CBMn分析。另一方面,加入 cyt-B是(CBMn)技術的最關鍵的部分。因此,改變傳統CBMn分析方法是必要的。在本實驗中,我們試圖解決這個問題。研究表明,CBMn可作為一個可靠的工具用于胚胎干細胞研究,特

    小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養實驗_胰酶消化法2

    小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)分子生物學研究;(3)基因治療相關研究。實驗方法原理將小鼠的成纖維細胞(MEF)從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置MEF生長培養基培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料小鼠試劑、試劑盒PB

    挑戰細胞分化宿命: 細胞重編程又出新法

      在生物醫藥領域具有劃時代意義的是,只需共表達4個基因就可將胚胎成纖維細胞(fibroblast)和成體成纖維細胞重編程為多能干細胞,這項研究使得英國、日本2位科學家獲得2012年諾貝爾生理學或醫學獎,激起了科學家對細胞重編程技術的空前熱情。   在這項開創性發現之后,科學家在很短時間

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