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瓊脂糖凝膠電泳檢測調亡細胞1．用不同方法誘導細胞調亡后，取106調亡細胞，置1.5ml離心管中，用PBS洗滌一次。在微量離心機上全速離心5秒鐘，去上清液。加入100μl含5mol/L異硫氰酸胍，100mmol/L 2-巰基乙醇的25mmol/L枸櫞酸鈉緩沖液pH7.0，在旋渦混懸器上混懸20秒鐘，破壞細胞，變性蛋白質。2．加入50μl含7.5mol/L醋酸氨和0.8mg/ml糖原的水溶液，混勻；加入300μl 100％乙醇，4℃保存過夜。3．在微量離心機上全速離心30分鐘，去上清液。加入75％乙醇同樣離心洗滌沉淀物2次。用20μl含100μg/ml無DNA酶的RNA酶的TE緩沖液消化RNA，37℃ 30分鐘。加入10μl甘油和少量溴酚藍，直接點樣。4．用50ml TAE溶解2g瓊脂糖，加入0.25μg/ml溴乙啶。倒板后加樣，用100bp DNA標記物作為標記。25mV電泳過夜。在紫外線下觀察結果。調亡細胞的DNA呈相......閱讀全文
細胞凋亡的圖片5細胞凋亡的圖片6細胞凋亡的研究方法一、定性和定量研究只定性的研究方法：常規瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態學觀察（普通光學顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡）進行定量或半定量的研究方法：各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。二、區分凋亡和壞死可將二
◆ TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較TUNEL法 細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3
二、細胞凋亡的細胞化學測定細胞凋亡的細胞化學測定包括細胞表面（細胞膜）的結構和通透性改變的測定和細胞核DNA改變的測定。根據應用的范圍，又可分為細胞群休和單個細胞測定兩種，以下僅介紹其中幾種較為常用的方法。碘化丙啶（propidium iodide,PI）檢測早期死亡細胞膜通透性狀態的不同是區分細胞
實驗四 逆轉錄PCR (RT-PCR )【實驗目的】1．了解用逆轉錄PCR 法獲取目的基因的原理。2．學習和掌握逆轉錄PCR 的技術和方法。【實驗原理】聚合酶鏈式反應（PCR）過程利用模板變性，引物退火和引物延伸的多個循環來擴增DNA序列。因為上一輪的擴增產物