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  • 細胞生物基本方法:神經組織細胞培養

    神經組織細胞培養1.獲取腦組織后,先仔細剝除腦膜和血管等纖維成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍的Hanks液中,腦組織比較柔軟,反復吹打即可制成細胞懸液。2.為排除脂肪成分和其它碎塊,把懸液注入離心管中,在室溫直立5~10分鐘后,細胞或細胞團塊自然下沉,脂肪等雜物易漂浮于懸液表層,吸除上清,如此反復二三次可獲得較多的細胞成分。3.向末次沉淀物中加入適量營養液,通過紗網或紗布濾過,計數細胞并調整好細胞密度,接種入培養瓶或皿中,置5%CO2溫箱中培養。4.細胞生長匯合后,可用0.25%胰蛋白酶消化法做傳代處理,加消化液的量以能覆蓋細胞層即可,待細胞開始從瓶壁脫離(平均5~10分鐘),加入含有血清培養液,吹打制成細胞懸液。......閱讀全文

    細胞培養方法

    一、準備工作?  準備工作對開展細胞培養異常重要,工作量也較大,應給予足夠的重視,推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養箱及其他儀器的檢查與調試,具體內容可參閱有關文獻。?二、取

    細胞培養方法

    一、準備工作 準備工作對開展細胞培養異常重要,工作量也較大,應給予足夠的重視,推備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養箱及其他儀器的檢查與調試,具體內容可參閱有關文獻。 二、取材

    細胞培養方法

    1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯系。2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。因路途耽擱等因素,細胞會有部分脫落。請在超凈臺中將培養瓶里的培養基吸出一部分,保留大約5-6ml左右在培養瓶里。將培養瓶置于37℃培養箱中培養,蓋子微微擰松。吸出的培養基可以

    細胞培養方法

    細胞培養方法:1.玻璃吸管和玻璃培養瓶的消毒:高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時以上;2.無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養板照射3小時以上;3.培養基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗:將血清按10%加入培養基內,用無菌的玻璃離心管或玻

    結締組織類細胞培養實驗——成纖維細胞培養實驗

    實驗方法原理包括人在內的各種成纖維細胞都很容易培養,也是其它組織培養時的副產物,極易獲得。人的成纖維細胞不僅容易培養,而且生物性狀穩定,很難發生轉化,成為二倍體細胞培養的主要對象,人的二倍體細胞系,主要為成纖維細胞。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶儀器、耗材剪刀實驗步驟為獲取大量成纖維細胞培養,以便

    細胞生物基本方法:凍存

    凍存方法1.細胞:選對數生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。2.計數:按常規方法把細胞制成細胞懸液,計數,令細胞密度達5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸

    細胞培養的基本技術

    一、清洗新采用和重新使用的培養器皿,都要嚴格清洗,以防各種有害物質對培養細胞損害。培養用的塑料器皿目前主要依靠進口,均已無菌密封包裝,可直接使用。對于塑料瓶蓋或膠塞等,可水中浸泡后用2%NaOH煮沸10~20min,自來水中浸泡和蒸餾水漂洗2~3次,晾干備用。細胞培養中的絕大部分器皿系玻璃制品,清洗

    細胞培養的基本條

    細胞培養是指從體內組織取出細胞在體外模擬體內環境下,使其生長繁殖,并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物可以是單個細胞,也可以是細胞群。以下是細胞培養的基本條件:?一、合適的細胞培養基?合適的細胞培養基是體外細胞生長增殖的重要的條件之一,培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質

    細胞培養基本技術

    實驗概要無菌操作基本技術?1. 實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌,以70 % ethanol 擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養基相同亦不共享培養基,以避免失

    組織源性原代細胞培養實驗室組建的基本要求

    一、實驗室設計1、細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。2、細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。3、細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側,常規操作和封閉培養于一室,為

    組織細胞培養的要點有哪些?

      組織培養技術是在人為創造的無菌條件下將生物的離體器官(如根、莖、葉、莖段、原生質體)、組織或細胞置于培養基內,并放在適宜的環境中,進行連續培養以獲得細胞、組織或個體的技術。這種技術已廣泛應用于農業和生物、醫藥的研究。  體內組織細胞在體外培養時,所需培養環境基本相似,但由于物種、個體遺傳背 景及

    腫瘤組織源性的原代細胞培養

    一、腫瘤細胞培養的概述????????腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用腫瘤原代細胞培養基礎培養基、5~10%血清濃度、細胞培養添加劑、抗生素等等即可。或在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物,或原患者血清(1~2%)以利細胞生長。用細胞生長因子如胰島素、氫化可的松、

    多細胞神經組織工程方法-美3D打印出生物工程脊髓

    美國明尼蘇達大學研究人員近日在《先進功能材料》雜志線上版發表研究論文稱,他們開發出一種新的多細胞神經組織工程方法,利用3D打印設備制出生物工程脊髓。研究人員稱,該技術有朝一日或可幫助長期遭受脊髓損傷困擾的患者恢復某些功能。 該方法將先進的細胞生物工程技術和獨特的3D打印技術有效結合,利用生

    大鼠視神經少突膠質細胞培養

    實驗方法原理 采用視神經,DMEM/F12條件培養基培養,觀察細胞形態及生長,并進行免疫組織化學鑒定。實驗材料 Wistar大鼠試劑、試劑盒 亞硒酸鈉腐胺轉鐵蛋白胰島素甲狀腺素黃體酮谷氨酰胺小牛血清兔抗鼠GC抗體儀器、耗材 眼科剪滴管離心機培養皿 CO2培養箱實驗步驟 一、實驗步驟1. ?取新生2

    神經膠質細胞培養實驗_酶消化法

    神經膠質細胞培養可以:(1)獲得神經膠質細胞;(2)用于神經膠質細胞電生理特性,如膜電位、去極化等;(3)用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物,它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子,并能分泌多種神

    神經膠質細胞培養實驗_酶消化法

    神經膠質細胞培養可以:(1)獲得神經膠質細胞;(2)用于神經膠質細胞電生理特性,如膜電位、去極化等;(3)用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物,它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子,并能分泌多種神

    神經細胞培養基總結2

    許多PNS類型的神經元在離體狀態時表現出簡單的營養需求,只需提供單一的營養因子就足以使其在低密度時增殖。例如,大鼠交感神經元僅需NGF即能存活,在其生存期間,這些神經元可在嚴格局限條件下生長好幾個月(即在無血清培養基中、或缺乏膠質細胞、或在化學限定基質上)。有證據表明NGF是活體中交感神經元存活的生

    小鼠神經元原代細胞培養步驟

      小鼠大腦皮層神經元原代培養步驟:  1、 于無菌條件下切取鼠頭并以75%酒精浸泡1min,解剖出完整鼠腦;  2、 預冷解剖液中分離去除軟膜、血管、取大腦皮質漂洗,用眼科剪將皮質反復剪切成碎塊;  3、 移入培養皿中,吸除解剖液加入0.25%胰蛋白酶2m1,37℃培養箱中消化30min;  4、

    神經細胞培養基總結1

    培養細胞的完全培養基由基礎培養基(如MEM)和添加劑(如血清或無血清培養用的某些確定的激素及生長因子)組成,培養基的配方一直在改進,其中包括抗生素和抗有絲分裂劑等等。 基礎培養基 絕大多數培養基是建立在平衡鹽溶液(BSS) 基礎上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養物質。最廣泛

    細胞培養基本概念和細胞培養的環境

    一、細胞培養基本概念細胞培養是指從體內組織取出細胞摹擬體內出現環境,在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下,使期生長繁殖,并維持其結構和功能的一種培養技術。 細胞培養 的培養物為單個細胞或細胞群。在醫學遺傳學研究中應用最廣泛的是外周血淋巴細胞、皮膚或纖維細胞和各種能在體外長期生長的細胞系。外周血淋

    關于細胞培養生物反應器的基本介紹

      細胞培養生物反應器主要用于動植物細胞培養、微載體培養、轉基因制藥工程等。目前生命科學及生物制藥領域應用較多。上海楚怡的QC系列細胞培養生物反應器主要有三種即:貼壁細胞培養、懸浮細胞培養和微載體培養,根據自己實驗需要可以選擇不同的規格,其中2L/5L/7.5L/15L 多為硅硼玻璃材質,主要用在實

    腫瘤細胞培養方法

    腫瘤細胞培養成功關鍵在于:取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養液和培養底物等幾個方面。在具體培養方法方面,腫瘤細胞培養與正常組織細胞培養并無原則差別,初代培養應用組織塊和消化培養法均可。1、取材:人腫瘤細胞來自外科手術或活檢瘤組織。取材部位非常重要,體積較大的腫瘤組織中有退變或壞死區,取材時盡量避

    常規細胞培養方法

    原理?1? 將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養。???儀器、材料及試劑?儀器:培養箱(調整至37℃),培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗

    細胞培養常規方法

    . 凍存細胞的復蘇應遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調至37-37。5度,取出凍存的細胞迅速放入后將細胞面浸至水面以下不斷搖動至融化。在無菌臺內將完全培養基加入50ml的小培養瓶內,約5ml左右,然后用無菌吸管從凍存管內取出細胞,置培養并內輕輕搖晃,使細胞均勻后置培養箱內培養。2. 傳代:對于貼壁細胞

    ATCC細胞培養方法

    基本原理?通過在支持物(如蓋玻片)上培養貼壁細胞,可以應用抗體檢測細胞表面抗原的表達或進行酶細胞化學以及免疫細胞化學檢測。該方法的優點是細胞貼壁牢固,能夠維持細胞生長時的狀態。?試劑和設備?細胞懸浮液;?6孔平底組織培養板,或φ60 mm培養皿;?18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于

    ATCC細胞培養方法

    基本原理?通過在支持物(如蓋玻片)上培養貼壁細胞,可以應用抗體檢測細胞表面抗原的表達或進行酶細胞化學以及免疫細胞化學檢測。該方法的優點是細胞貼壁牢固,能夠維持細胞生長時的狀態。?試劑和設備?細胞懸浮液;?6孔平底組織培養板,或φ60 mm培養皿;?18mm x 18mm 或20mm x 20mm浸于

    病理學的研究方法之組織培養與細胞培養

      將某種組織或單細胞用適宜的培養基在體外加以培養,以觀察細胞、組織病變的發生發展、如腫瘤的生長、細胞的癌變、病毒的復制、染色體的變異等等。此外,也可以對其施加諸如射線、藥物等外來因子,以觀察其對細胞、組織的影響等。這種方法的優點是,可以較方便地在體外觀察研究各種疾病或病變過程,研究加以影響的方法,

    光照培養箱廣泛適用于微生物組織細胞培養

    用途概述:? ?光照培養箱,采用品環保無氟制冷壓縮機和的微電腦可編程控器。? ? ? 廣泛適用于微生物組織細胞培養、種子發芽、育苗試驗、植物栽培以及昆蟲、小動物等,與其他用途的恒溫光照實驗等。產品點:1.微電腦智能控制溫度,光照控制穩定、準確、可靠,可設定多段程序,每段設置時間范圍1-99小時。2.

    細胞生物基本方法:特殊培養法

    特殊培養法1)二倍體細胞培養法二倍體細胞培養法與一般培養相同,關鍵在于傳代,其傳代程序為:1.??????吸除舊培養液注入另瓶中。2.??????用溫BSS沖洗1次。3.??????用0.25%溫胰蛋白酶消化,加入消化液量以僅覆蓋細胞層即可;作用1~5分鐘。4.??????待細胞附著松動、細胞質邊緣

    細胞培養基本知識

    一.細胞培育的基本概念體外培育(in vitro culture)包含一切構造層次的培育,即:安排培育(tissue culture)、細胞培育(cell culture)和器官培育(organ culture)。細胞培育(Cell culture)指從生物機體取出有些安排渙散成單個細胞或直接從機體

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