PCR拖尾及假陽性的原因及對策
拖尾 現象：產物在凝膠上呈Smear狀態。 原因： 1.模板不純 2.Buffer不合適 3.退火溫度偏低 4.酶量過多 5.dNTP、Mg2+濃度偏高 6.循環次數過多 對策： 1.純化模板 2.更換Buffer 3.適當提高退火溫度 4.適量用酶 5.適當降低dNTP和鎂離子的濃度 6.減少循環次數 假陽性 現象：空白對照出現目的擴增產物 原因： 靶序列或擴增產物的交叉污染 對策： 1.操作時應小心輕柔，防止將靶序列吸入加樣槍內或濺出離心管外； 2.除酶及不能耐高溫的物質外，所有試劑或器材均應高壓消毒。所用離心管 及加樣槍頭等均應一次性使用。 3.各種試劑最好先進行分裝，然后低溫貯存......閱讀全文
PCR拖尾及假陽性的原因及對策
拖尾 現象：產物在凝膠上呈Smear狀態。 原因： 1.模板不純 2.Buffer不合適 3.退火溫度偏低 4.酶量過多 5.dNTP、Mg2+濃度偏高 6.循環次數過多 對策： 1.純化模板 2.更換Buffer 3.適當提高退火溫度 4.適量用酶 5.適當降低dNTP
血培養假陽性的原因及對策
色原法血培養系統采用比色計傳感器和反射光原理，監測溶于培養基中的二氧化碳（CO2）的產生和存在狀況。樣本中存在的微生物在新陳代謝或分解糖類過程中產生CO2導致培養基酸堿度（PH）改變，從而導致培養瓶底部的半透硅膠材料（Liquid Emulsion Sensor ， LES）顏色變淺，通過照射感應器
血培養假陽性的原因及對策
?色原法血培養系統采用比色計傳感器和反射光原理，監測溶于培養基中的二氧化碳（CO2）的產生和存在狀況。樣本中存在的微生物在新陳代謝或分解糖類過程中產生CO2導致培養基酸堿度（PH）改變，從而導致培養瓶底部的半透硅膠材料（Liquid Emulsion Sensor ， LES）顏色變淺，通過
ELISA法測梅毒抗體假陽性原因分析及對策
梅毒血清學試驗對梅毒的診斷有很大的價值，但它存在著一定的假陽性和假陰性情況，其結果一定要結合病史和臨床、體格檢查綜合分析考慮。近年來梅毒在我國的發病率呈上升趨勢。梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的一種性傳播性疾病之一，可侵犯全身各臟器，幾乎可以引起全身所有組織器官的損害和病變，導致功能障礙。梅毒螺旋體抗體
PCR假陽性的原因分析及解決辦法
假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔，防止
PCR拖尾是什么原因
拖尾在生物專業詞匯叫做smear。造成此的原因有多種。一般來講，有以下幾點：1，引物設計不佳，造成了拖尾現象。2，PCR中DNA濃度加的太多，造成了拖尾。3，mg2+濃度加的太高，造成了拖尾。4，跑膠電壓不合適，造成了拖尾。5，退火溫度不合適，造成了拖尾。
PCR拖尾是什么原因
拖尾在生物專業詞匯叫做smear。造成此的原因有多種。一般來講，有以下幾點：1，引物設計不佳，造成了拖尾現象。2，PCR中DNA濃度加的太多，造成了拖尾。3，mg2+濃度加的太高，造成了拖尾。4，跑膠電壓不合適，造成了拖尾。5，退火溫度不合適，造成了拖尾。這些都可能造成拖尾，請認真分析之。謝謝。
PCR假陽性產生原因分析
假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔，防止
峰拖尾原因分析及解決辦法
1 襯管，色譜柱被污染或者襯管，色譜柱安裝不當，存在死體積；改進方法：注射甲烷，峰若拖尾，則重新安裝。2、進樣器溫度過高；3色譜柱柱頭不平；改進方法：用金剛砂切割。4 固定相的極性指標與樣品不匹配；改進方法：換匹配的柱子。5 樣品流通路線中有冷井；改進方法：消除路線中的過低溫度區。6襯管或色譜柱中有
如何消除PCR的拖尾
消除PCR拖尾的方法：1、純化模板2、更換Buffer3、適當提高退火溫度4、適量用酶5、適當降低dNTP和鎂離子的濃度6、減少循環次數PCR拖尾產生的原因：1、模板不純2、Buffer不合適3、退火溫度偏低4、酶量過多5、dNTP、Mg 2*濃度偏高6、循環次數過多
如何消除PCR的拖尾
消除PCR拖尾的方法：1、純化模板2、更換Buffer3、適當提高退火溫度4、適量用酶5、適當降低dNTP和鎂離子的濃度6、減少循環次數PCR拖尾產生的原因：1、模板不純2、Buffer不合適3、退火溫度偏低4、酶量過多5、dNTP、Mg 2*濃度偏高6、循環次數過多
如何消除PCR的拖尾
消除PCR拖尾的方法：1、純化模板2、更換Buffer3、適當提高退火溫度4、適量用酶5、適當降低dNTP和鎂離子的濃度6、減少循環次數PCR拖尾產生的原因：1、模板不純2、Buffer不合適3、退火溫度偏低4、酶量過多5、dNTP、Mg 2*濃度偏高6、循環次數過多
如何消除PCR的拖尾
消除PCR拖尾的方法：1、純化模板2、更換Buffer3、適當提高退火溫度4、適量用酶5、適當降低dNTP和鎂離子的濃度6、減少循環次數PCR拖尾產生的原因：1、模板不純2、Buffer不合適3、退火溫度偏低4、酶量過多5、dNTP、Mg 2*濃度偏高6、循環次數過多
如何消除PCR的拖尾
消除PCR拖尾的方法：1、純化模板2、更換Buffer3、適當提高退火溫度4、適量用酶5、適當降低dNTP和鎂離子的濃度6、減少循環次數PCR拖尾產生的原因：1、模板不純2、Buffer不合適3、退火溫度偏低4、酶量過多5、dNTP、Mg 2*濃度偏高6、循環次數過多
PCR－反應出現假陽性結果原因
1 ) 引物設計不合適： 選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而，在進行PCR擴增時，擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出現假陽性。需重新設計引物。 2 ) 靶序列或擴增產物的交叉污染： 這種污染有兩種原因： 一是整個基因組或大片段的交叉污染，導致假
氣相色譜峰拖尾原因分析及處理方法
氣相色譜峰拖尾原因分析及處理方法每個實驗猿的實驗生涯，總會遇到那么n次色譜峰拖尾。那么色譜峰為什么會拖尾呢？是柱子壞了？還是操作失誤？一般處理氣相色譜峰拖尾問題時總結成一句話就是：XXX樣品在XXX色譜柱拖尾啦，什么原因？1.活性組分拖尾極性或活性化合物容易被樣品流經途徑中的活性位點吸附而呈現出拖尾
PCR儀PCR結果出現假陽性是什么原因？
假陽性假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔
基因擴增PCR的擴增結果假陽性的原因
出現的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致,有時其條帶更整齊,亮度更高。?引物設計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行PCR擴增時,擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出現假陽性。需重新設計引物。?靶序列或擴增產物的交叉污染:這種污染有兩種原因:一是整個
峰形后拖尾的原因
[柱物理損壞]????? 色譜柱有物理損壞是造成峰形拖尾的根源。*的解決方法就是更換新柱。[柱內填料污染]????? 流動相和樣品中的雜質是色譜柱主要污染源。????? 流動相所用的各種溶劑至少是分析純，盡量使用色譜純試劑。流動相所用的水zui好是超純水或全玻璃器皿雙蒸水。用前先用0.45um溶
什么是PCR假陽性？
假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔，防止
RNA電泳條帶拖尾原因
提得RNA溶液降解，有DNA污染。需要處理耗材，臺面，電泳槽，儀器的RNA酶污染，防止RNA降解，外源RNA酶清除劑，能有效替代致癌物DEPC使用，能夠高效清除各種外源RNA酶，如RNase H,RNase T等。
PCR假陰性的原因分析及解決辦法
假陰性是指不出現特異擴增帶。可能原因：引物設計不合理，酶失活或酶量不足，模板量太少，退火溫度不合適，循環次數過少，產物未及時電泳檢測等。解決方法有：重新設計引物，增加酶量或調換酶，增加模板量，調整退火溫度，增加循環次數，及時檢測擴增產物，一般在 48h 以內進行。
HPLC造成峰拖尾的原因分析
a.篩板阻塞；反沖色譜柱、更換進口篩板b.色譜柱塌陷；填充色譜柱c.有干擾物質的存在；使用更長的色譜柱、改變流動相或更換色譜柱e.流動相PH值不合適；調整PH值，對于堿性化合物，低PH值更有利于得到對稱峰f.樣品與填料表面的溶化點發生反應；加入離子對試劑或堿性揮發性修飾劑或更改色譜柱
PCR污染及解決對策
?聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)是一種選擇性體外擴增DNA或RNA片段的方法，在微生物感染的診斷中具有重要的價值。在PCR擴增過程中，擴增的DNA產量是呈指數上升的，經過n個循環的擴增，一個DNA分子的產量便達到2n個拷貝。PCR產物一般為1013拷貝/
為什么pcr會有不同程度的拖尾
模板濃度太高了,把模板稀釋10倍,100倍試試看,可以找到最合適的濃度,或者減少擴增的循環數,減個10個循環
什么是菌落pcr假陽性
利用菌落作為模板進行PCR擴增，驗證該菌落里是否帶有目標片段。但是由于PCR是一個級聯放大的過程，所以即使菌落中不含有目標片段，而是菌落表面沾有一部分之前連接，轉化中用的目標DNA，也會導致PCR獲得擴增條帶，從而誤認為這個菌落已經帶有了目標片段，稱之為假陽性。可以通過提質粒酶切，或者測序驗證，排除
氣相色譜儀分析中峰拖尾的原因及處理方法
氣相色譜儀分析中峰拖尾的原因及處理方法：一、可能原因：襯管和色譜柱被污染，有活性點。??????? 處理方法：清洗，更換（如有必要）。二、可能原因：襯管和色譜柱安裝不當，存在死體積。??????? 處理方法：重新安裝。三、可能原因：色譜柱柱頭不平。??????? 處理方法：用金剛砂切割，使之平。四、
western轉膜后marker拖尾原因
western轉膜有時候marker深，有時候淺是很正常的事情因為不同批次轉膜的時候，電壓電流緩沖液溫度等等條件不可能完全保持一致，在各種條件變化的情況下，很容易造成批次間的差異，具體表現就是有時候marker深，有時候淺所以western轉膜有時候marker深，有時候淺是很正常的事情
總結氣相色譜拖尾可能原因
氣相色譜拖尾可能的原因： 1) 汽化管破損或未安裝好，使得樣品只能以拖尾的形式進入色譜柱； 2) 汽化溫度偏低，樣品未完全汽化； 3) 汽化室被樣品中高沸點雜質，或隔墊污染物污染； 4) 載氣流量偏低； 5) 進樣量過大； 6) 進樣口泄露，如進樣隔墊泄露； 7) 色譜柱安裝不正確
PCR實驗中假陽性和假陰性的防治
1，標本采集必須合格，否則不做。2，嚴格按照操作規程，避免人為實驗誤差。3，用于操作的各種儀器，加樣器，必須通過審核驗收，儀器選貴的，進口的！4，最主要的就是試劑，選擇公認的，優質試劑