質粒
Extrachromosomal Elements-Plasmids (Michael Blaber)What's plasmid? Find answer here. It provides background information on the features of plasmid, selection marker and more... Rescuing Integrated Plasmids from Genomic DNA (LTI)Use this protocol to isolate plasmids integrated into genomic DNA prepared from tissues such as liver and spleen. Amplifying Plasmid Libraries&n......閱讀全文
質粒的定義及質粒的生物學功能
定義：質粒是細胞染色體外能夠自主復制的很小的環狀DNA分子，主要存在于一些細菌和酵母菌中；生物學功能：有一些質粒攜帶的基因則可以賦予細胞額外的生理代謝能力，乃至于在一些細菌中提高它的致病力。一般來說，質粒的存在與否對宿主細胞生存沒有決定性的作用。
堿裂解法提取質粒后質粒被降解可能原因
還有可能是你的瓊脂糖凝膠濃度太高了，濃度越高，分子篩效應越大，質粒又比較大，當然容易拖尾了。其次也可能是你的電泳電壓過大；還有就是RNA污染，你提完質粒后沒有用RNase降解，不過這就不叫拖尾了，稱作有雜帶。至于注意事項，你搞清每一步的原理后自己仔細想想就知道了。時刻記住不要讓質粒因為機械損傷而打斷
質粒的小量制備
·?????????Standard (alkaline lysis) Mini-Prep?(Goldberg Lab)Standard protocol for mini-prep and recipe for solution I, II and III.Alkaline Lysis Minip
質粒的Midi制備
·?????????Plasmid Midi-preps?(NWSFC)Diatomaceous Earth-based midi-prep. This procedure is the method of choice for isolating double stranded plasmid-b
質粒復制的定義
中文名稱質粒復制英文名稱plasmid replication定 義質粒在宿主細胞內獨立于細菌染色體通過復制機制增加其拷貝數的過程。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
質粒的大量制備
·?????????Plasmid Mini and Maxi Prep Methods?(Gimila Lab)?·?????????Maxi-preps and all media, solutions?(NWFSC)Isolation of cosmid, plasmid and P1 DNA
表達質粒的定義
中文名稱表達質粒英文名稱expression plasmid定 義用做表達載體的質粒。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
質粒DNA提取實驗
實驗方法原理?質粒多為一些雙鏈、環狀的DNA分子，是獨立于細菌染色體之外進行復制和遺傳的輔助性遺傳單位。質粒是進行分子生物學實驗操作，進行遺傳工程改良物種等工作時最主要的DNA載體。?提取質粒的基本步驟分為三步：①細菌的培養和質粒的擴增②細菌菌體的裂解③質粒DNA的純化實驗材料?大腸桿菌試劑、試劑盒
質粒的種類劃分
根據質粒能否通過細菌的接合作用，可分為接合性質粒和非接合性質粒。接合性質粒帶有與接合傳遞有關的基因。非接合質粒在一定條件下通過與其共存的接合質粒的誘動或轉導而傳遞。根據質粒在細菌內的復制類型可分為兩類：嚴緊控制型和松弛控制型。嚴緊控制復制型質粒的復制酶系與染色體DNA復制共用，只能在細胞周期的一定階
質粒的小量制備
·?????????Standard (alkaline lysis) Mini-Prep?(Goldberg Lab)Standard protocol for mini-prep and recipe for solution I, II and III.Alkaline Lysis Minip
質粒DNA提取實驗
堿解法SDS堿裂解法（試劑盒提取）實驗方法原理堿裂解法是基于DNA的變性與復性差異而達到分離目的的。堿性使質粒DNA變性，再將pH值調至中性使其復性，復性的為質粒DNA，而染色體DNA不會復性，纏結成網狀物質，通過離心除去。實驗材料大腸桿菌 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
質粒圖譜的閱讀
載體主要有病毒和非病毒兩大類,其中質粒DNA是一種新的非病毒轉基因載體。一、一個合格質粒的組成要素???復制起始位點Ori 即控制復制起始的位點。原核生物DNA分子中只有一個復制起始點。而真核生物DNA分子有多個復制起始位點。???抗生素抗性基因 可以便于加以檢測，如Amp+ ,Kan+???多克隆
質粒DNA的純化
聚乙二醇沉淀法質粒DNA氯化銫-溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA(一)聚乙二醇沉淀法提取質粒DNA1)將核酸溶液所得]轉入15mlCorex 管中，再加3ml 用冰預冷的5mol/L LiCl溶液，充分混勻，用合適轉頭于4℃下以10 000轉/分離心10分鐘。LiCl可沉淀高分子RNA。2)將上
質粒DNA提取實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 堿裂解法是基于DNA的變性與復性差異而達到分離目的的。堿性使質粒DNA變性，再將pH值調至中性使其復性，復性的為質粒DNA，而染色體DNA不會復性，纏結成網狀物質，通過離心除去。
質粒轉化的定義
中文名稱質粒轉化英文名稱plasmid transformation定 義將外源質粒導入原核細胞的過程。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
質粒的大量制備
·?????????Plasmid Mini and Maxi Prep Methods?(Gimila Lab)?·?????????Maxi-preps and all media, solutions?(NWFSC)Isolation of cosmid, plasmid and P1 DNA
質粒DNA的轉化
實驗概要本實驗將人Bcl-2重組質粒轉化DH5α擴增菌，轉化后在含Amp的培養基上進行篩選，生長的菌落即為含重組質粒的工程菌。含人Bcl-2重組質粒的DH5α菌用于質粒DNA的擴增，獲得的質粒將作為限制性內切酶的酶切底物DNA。實驗原理轉化是將外源DNA分子導入到受體細胞，使之獲得新的遺傳特性的一種
什么是質粒載體？
質粒載體是在天然質粒的基礎上為適應實驗室操作而進行人工構建的質粒。與天然質粒相比，質粒載體通常帶有一個或一個以上的選擇性標記基因（如抗生素抗性基因）和一個人工合成的含有多個限制性內切酶識別位點的多克隆位點序列，并去掉了大部分非必需序列，使分子量盡可能減少，以便于基因工程操作。
質粒DNA的提取
實驗概要? ? ? ? 通過本實驗學習和掌握堿裂解法提取質粒。實驗原理? ? ? ? ?堿裂解法提取質粒是根據共價閉合環狀質粒DNA與線性染色體DNA在拓撲學上的差異來分離它們。在pH值介于12.0～12.5這個狹窄的范圍內，線性的DNA雙螺旋結構解開而被變性，盡管在這樣的條件下，共價閉環質粒DNA
pUC質粒載體結構
（1）來自于pBR322的Ori（2）氨芐青霉素的抗性基因(ampr)。 但核苷酸序列發生了變化（3） LacZ′基因編碼β—半乳糖酶的α—肽鏈即氨基末端。（4）MCS區段是一段用于插入外源DNA片段的特定區域，由一系列的緊密相連的限制性內切酶位點組成，而且每個限制性內切酶位點在整個載體中是唯一的。
重組質粒的構建
[實驗原理]外源DNA與載體分子的連接就是DNA重組，這樣重新組合的DNA叫做重組體或重組子。重組的DNA分子是在DNA連接酶的作用下，有Mg2+、ATP存在的連接緩沖系統中，將分別經酶切的載體分子與外源DNA分子進行連接。DNA連接酶有兩種：T4噬菌體DNA連接酶和大腸桿菌DNA連接酶。兩種DNA
質粒DNA電泳鑒定
1．目的學會常用的DNA瓊脂糖凝膠電泳。2．原理DNA雙螺旋分子骨架兩側帶有含負電荷的磷酸根，在電場中會向正極方向移動。不同長度的DNA由于受到凝膠介質的阻力不同，表現為不同的遷移率而被分開。3．器材電泳儀，水平凝膠電泳槽和梳子及其制膠模塊，250ml三角瓶，微波爐，臺式離心機，旋渦混合器，凝膠成像
質粒提取實驗步驟
實驗原理現在較常用的質粒提取方法有三種:堿裂解法、煮沸法和去污劑裂解法，前兩種方法較為劇烈，適用于較小的質粒（＜15Kb），而去污劑裂解法則比較溫合，一般用于分子量較大的質粒（＞15Kb）。堿裂解法是一種最廣泛使用的制備質粒DNA的方法。其原理為：染色體DNA遠大于質粒DNA，且染色體DNA為線狀分
質粒載體是什么？
質粒載體是基因工程重要的載體之一。它是以質粒 DNA 分子為基礎構建而成，主要用 于原核生物和植物的基因轉移以及建立基因組文庫和cDNA 文庫。現在分子生物學使用的質粒載體都已不是原來細菌或細胞中天然存在的質粒，而是經過了許多的人工改造，從不同的實驗目的出發，人們設計了各種不同類型的質粒載體。近年來
如何查找質粒圖譜
方法一：使用Vector NT 軟件 做分子實驗，經常和不同的質粒打交道，了解各種質粒的圖譜信息是必需的，invitrogen公司的這款軟件絕對是分子生物學蟲子們的福音，要想對質粒圖譜了解更直觀，安裝這款軟件是非常必要的。這款軟件的軟件包里面會包括invitrogen公司的所有質粒圖譜信息和
質粒DNA提取技術
實驗概要通過本實驗，學習和掌握堿裂解法提取質粒的方法和技術。實驗原理質粒是基因工程中常用的載體之一。質粒是染色體外小型雙鏈環狀的DNA，大小在1～200kb之間。堿裂解法提取質粒是根據共價閉合環狀DNA與線性染色體DNA在拓撲學上的差異來分離它們的。在pH值介于12.0～12.5這個狹窄的范圍內，線
質粒載體的分類
按復制形式分為嚴緊型和松弛型復制。根據質粒DNA復制與宿主之間的關系或在宿主細胞的拷貝數的多少，可以將質粒分為兩種不同的復制類型：嚴緊型和松弛型。嚴緊型質粒復制受宿主染色體DNA復制的嚴格控制，拷貝數較小一般只有1~3個拷貝。疏松型質粒的復制宿主的控制比較松，在宿主中的拷貝數比較多，一般有10~20
未提出質粒或質粒得率較低的解決辦法
大腸桿菌老化：請涂布平板培養后，重新挑選新菌落進行液體培養。2. 質粒拷貝數低：由于使用低拷貝數載體引起的質粒DNA提取量低，可更換具有相同功能的高拷貝數載體。???????????? 3. 菌體中無質粒：有些質粒本身不能在某些菌種中穩定存在，經多次轉接后有可能造成質粒丟失。例如，柯斯質粒在大腸桿菌
3分鐘了解提取質粒時質粒濃度較低的原因
1、增加收菌次數,相對提高了質粒的量5261,這樣的話裂解液的量可以適當增加； 2、裂解要充分,變性和復性按說明應該是不超過5分鐘,合理控制時間,一般在3分到4分半的時4102間都是可以的； 3、過柱子時,吸附的時間盡量長一些,可以在這期間做做其他實驗或者吃個飯什么的； 4、如果沒有必要,
細胞化學詞匯質粒復制
中文名稱：質粒復制英文名稱：plasmid replication定 義：質粒在宿主細胞內獨立于細菌染色體通過復制機制增加其拷貝數的過程。應用學科：生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）