DegeneratePCR,ashortguide.
What is degenerate PCR? Degenerate PCR is in most respect identical to ordinary PCR, but with one major difference. Instead of using specific PCR primers with a given sequence, you use mixed PCR primers. That is, if you do not know exactly the sequence of the gene you are going to amplify, you insert "wobbles" in the PCR primers where there is more than one possibility. For instance if you ......閱讀全文
Degenerate－PCR,－a－short－guide.
What is degenerate PCR????Degenerate PCR is in most respect identical to ordinary PCR, but with one major difference. Instead of using specific PCR pr
Degenerate－PCR
Degenerate PCR is in most respects identical to ordinary PCR, but with one major difference. Instead of using specific PCR primers with a given sequen
其它PCR方法
·?????????Standard PCR Protocol?(Molecular Biology Techniques Manual)The followings are described in detailRecommended Reagent ConcentrationsRecommend
標準PCR
What's?PCR??(Michael Blaber's Lab)Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not only for thos
標準PCR
·?????????What's PCR??(Michael Blaber's Lab)Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not onl
PCR實驗指導與常見問題分析4
Fig. 25.?Multiplex PCR of mixtures A-D comparing PCR programs with 2 (green) and 1 (yellow) minute extension time at 54° C annealing temperature. Comp
Detection－of－Viruses－in－Infected－Plant－Extracts－using－ImmunocapturePCR
?1) Immunocapture stageCoating buffer: 15 mM Na2CO3; 35 mM NaHCO3, and 3 mM NaN3, per liter (pH 9.6).Extraction buffer: (20 mM Tris-HCL (pH 8.0), 138
Detection－of－Viruses－in－Infected－Plant－Extracts－using－ImmunocapturePCR
?1) Immunocapture stageCoating buffer: 15 mM Na2CO3; 35 mM NaHCO3, and 3 mM NaN3, per liter (pH 9.6).Extraction buffer: (20 mM Tris-HCL (pH 8.0), 138
DIRECT－AND－SHORTTERM－PROCEDURE－FOR－HARVESTING－BONE－MARROW－CHROMOSOMES
I. PurposeTo identify chromosome anomalies in hematopoietic cells. Used especially for chromosome studies for hematological disorders such as preleuke
PCR實驗指導與常見問題分析5
MgCl2?concentrationRelationship between MgCl2?and dNTP concentrationdNTP concentrations of about 200μM each are usually recommended for the Taq polyme
TAIL－PCR－Protocol
TAIL is a series of reactions that are intended to map where a T-DNA (transfer DNA) has inserted within the genome. The main components of the 3 react
分析細胞鑒定金標準STR（Short－TandemRepeat）短串聯重復...
分析細胞鑒定金標準-STR（Short TandemRepeat）短串聯重復序列STR（Short TandemRepeat，短串聯重復序列）分析已被ICLAC、ATCC等權威機構作為金標準應用于細胞鑒定。由于目前使用錯誤細胞情況非常嚴重，越來越多的雜志要求在投稿時提供細胞STR分析數據。經常有小伙
Competitive－RTPCR－Strategy－for－Quantitative－Evaluation－1
Competitive RT-PCR Strategy for Quantitative Evaluation of the Expression of Tilapia (Oreochromis niloticus) Growth Hormone Receptor Type IQuantizatio
CORE－SAMPLE－PCR:－A－method－to－rePCR－unique－bands－from－products－of－mixed－s
INTRODUCTIONThe products of a PCR reaction - especially when this is done on eukaryotic genomic DNA, and when using degenerate primers - often contain
遞減聚合酶鏈式反應的簡介
遞減PCR，亦稱降落PCR(touchdown PCR)是一種PCR（聚合酶鏈式反應）方法，用來避免非特異性序列的擴增。PCR中引物的黏合溫度(annealing temperature)決定了黏合的特異性，溫度越高特異性越強，但過高則不能實現引物和模板的結合，而過低會產生大量非特異性產物。因此
CORE－SAMPLE－PCR
A method to re-PCR unique bands from products of mixed sizeContentsINTRODUCTIONPROTOCOLCOMMENTSINTRODUCTIONThe products of a PCR reaction - especially
PCR－PRIMER－DESIGN－AND－REACTION－OPTIMISATION
ContentsFactors Affecting the PCR??Nested Primer PCRPrimer LengthDegenerate PrimersElongation Temperature and TimeReaction BufferCycle NumberDenaturin
Molecular－Analysis－and－Results－－DNA
Theory of CGHComparative genomic hybridization (CGH) is a fairly new molecular cytogenetic technique that allows detection of DNA sequence copy number
PCR－Primer－Design（三）
References Albert, J., and Fenyo, E.M. 1990. Simple, sensitive and specific detection of human immunodeficiency virus type 1 in clinical speci
常規雜交反應存在的問題
常規雜交反應由于受到探針解鏈溫度、溶液中靶序列的初始濃度及探針長度的影響。樣品中不同探針所對應的靶序列的拷貝數不盡相同，探針的解鏈溫度也難以保持一致，這樣不同位點的雜交速度并不完全與各自靶序列的拷貝數成正比，檢測結果也就不具有良好的平行性。所以必需選擇最理想的條件以盡可能使正確配對的序列不被遺漏
TAILPCR（thermal－asymmetric－interlaced－PCR)簡介
在分子生物學研究中,基因克隆和分子雜交的探針制備等操作常需分離與已知DNA序列鄰近的未知序列，TAIL-PCR又叫熱不對稱交錯PCR，能夠較好地解決上述難題。該技術通過3個嵌套的特異性引物分別和簡并引物組合進行連續的PCR循環，利用不同的退火溫度選擇性地擴增目標片段，所獲得的片段可以直接用做探針標記
微型高速離心機介紹
BLF-15K離心機簡述：微型高速離心機是一款實用、小巧、可靠的實驗室工作助手，轉速可達14,500rpm。人性化的設計，簡約小巧的外型，特殊處理的低噪音設計為您創造安靜、舒暢的實驗環境；效的速度控制，加速至轉速僅需15s，從速減速也僅需15s；另外，便于操作的數字顯示屏，簡單上手的操作鍵以及Sho
多重PCR（Multiplex－PCR）
一般PCR僅應用一對引物，通過PCR擴增產生一個核酸片段，主要用于單一致病因子等的鑒定.多重PCR(multiplex PCR)，又稱多重引物PCR或復合PCR，它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物，同時擴增出多個核酸片段的PCR反應，其反應原理，反應試劑和操作過程與一般PCR相同.??? 多
多重PCR（Multiplex－PCR）
一般PCR僅應用一對引物，通過PCR擴增產生一個核酸片段，主要用于單一致病因子等的鑒定.多重PCR(multiplex PCR)，又稱多重引物PCR或復合PCR，它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物，同時擴增出多個核酸片段的PCR反應，其反應原理，反應試劑和操作過程與一般PCR相同.??? 多
PCR簡介/PCR儀
PCR的要素基本的PCR須具備PCR儀圖冊1.要被復制的DNA模板 Template2.界定復制范圍兩端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq. Polymearse4.合成的原料（四種脫氧核苷酸）及水。 PCR儀工作原理利用升溫使DNA變性，在聚合酶的作用下使單鏈復制成雙鏈，進而達到基因復制
重疊PCR—overlap－PCR
1、簡介?重疊PCR也是基本的PCR原理：變性-退火-延伸。不同的是在重疊PCR過程是兩個或者幾個片段重疊延伸之后，再進行指數擴增的PCR過程。 ?2、基本原理*步：PCR產生兩個或者幾個片段，這幾個片段之間必須有重疊區。?第二步：以兩個片段為例，見上圖，*步產生的兩個片段，A D鏈之間有互補，B
Troubleshooting－for－PCR－and－multiplex－PCR
Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles.COMPONENTVOLUMEFINALCONCE
普通PCR梯度PCR－原位PCR－熒光定量PCR儀的區別
普通PCR儀： 一般把一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀，稱之為普通PCR儀，也就是傳統的PCR儀。如果要用它做不同的退火溫度則需要多次運行。如；（ABI 2720） 梯度PCR儀： 一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件（通常12種溫度梯度）的稱
PCR各處應用模式
?一、兼并引物（Degenerate primer）PCR密碼子具有兼并性，如表22-4，單以氨基酸順序推測編碼的DNA序列是不精確的，但可以設計成對兼并引物，擴增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時寡核苷酸中核苷酸序列可以改變，但核苷酸的數量應相同。兼并度越低，產物特異性越強，設計引物時應盡量
PCR基本實驗方法（三）
Temperature?Cycling:92 - 94oC for 30 - 60 sec (denature)37 - 72oC for 30 - 60 sec (anneal)72oC for 30 - 60 sec (elongate) (60 sec per kb target sequen