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    增加RTPCR靈敏度

    分離高質量RNA成功的cDNA合成來自高質量的RNA。高質量的RNA至少應保證全長并且不含逆轉錄酶的抑制劑,如EDTA或SDS。RNA的質量決定了你能夠轉錄到cDNA上的序列信息量的最大值。一般的RNA純化方法是使用異硫氰酸胍/酸性酚的一步法。Trizol試劑法(見下圖)將一步法加以提高,可以從多種組織和細胞中提取高質量的非降解RNA。Trizol試劑法可以從最少100個細胞或1mg組織中提取RNA。TRIzol?試劑步驟略圖一般不必使用oligo(dT)選擇性分離poly(A)+RNA。不管起始模板是總RNA還是poly(A)+ RNA,都可以檢測到擴增結果(圖2)。另外,分離poly(A)+ RNA會導致樣品間mRNA豐度的波動變化,從而使信息的檢出和定量產生偏差。然而,當分析稀有mRNA時,poly(A)+ RNA會增加檢測的靈敏度。圖2. 總RNA和poly(A)+ RNA在RT-PCR中的比較以5或1μg H......閱讀全文

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       液相芯片,也稱為微球體懸浮芯片(suspension array,liquid chip),是基于xMAP(flexible Multi Analyte Profiling)技術的新型生物芯片技術平臺,它是在不同熒光編碼的微球上進行抗原 抗體、酶 底物、配體 受體的結合

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