RNAi實驗中雙鏈短RNA（dsRNA）制備過程
RNAi 實驗中雙鏈短RNA（dsRNA）制備過程，本實驗方法來自于加州大學Jim教授實驗，很權威！Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi1. Design polymerase chain reaction (PCR ) primers that will amplify 600-800 bp of sequence corresponding to the message of interest. Both primers should contain the following T7 RNA polymerase binding site at the 5’ end:GAA TTA ATA CGA CTC ACT ATA GGG AGA.Here's one for T3:AAT TAA CCC TCA CTA AAG GGA......閱讀全文
RNAi實驗中雙鏈短RNA（dsRNA）制備過程
RNAi 實驗中雙鏈短RNA（dsRNA）制備過程，本實驗方法來自于加州大學Jim教授實驗，很權威！Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi1.?Design polymerase chain reaction (PCR ) prim
果蠅RNAi的實驗中雙鏈短RNA的合成（dsRNA)方法
本文來自于哈佛大學醫學院果蠅RNAi篩選中心的經典實驗方法，專門用于果蠅RNAi實驗方法。感謝哈佛大學醫學院果蠅RNAi篩選中心的支持！Primer Designed dsRNATemplate SelectionPCRIn vitro?RNA TranscriptiondsRNA Purifica
果蠅RNAi的實驗中雙鏈短RNA的合成（dsRNA)方法
實驗概要We routinely produce dsRNA by in vitro transcription of a PCR generated DNA template containing the T7 promoter sequence on both ends (I. Prim
RNAi——雙鏈RNA引起的基因敲除（2）
在構建雙鏈RNA的表達載體時，使用RNA多聚酶Ⅲ來指導RNA的合成。這是因為RNA多聚酶Ⅲ有明確的啟始和終止序列，而且合成出的RNA不會帶有polyA尾。當RNA多聚酶Ⅲ遇到連續5個胸腺嘧啶時，它指導的轉錄就會終止，并且轉錄產物在第二個尿嘧啶處被切下來。U6啟動子能被RNA多聚酶Ⅲ識別， 合
RNAi——雙鏈RNA引起的基因敲除（1）
1995年，康奈爾大學的Su Guo博士用反義RNA阻斷線蟲基因表達的試驗中發現，反義和正義RNA都阻斷了基因的表達，他們對這個結果百思不得其解。直到1998年， Andrew Fire的研究證明，在正義RNA也阻斷了基因表達的試驗中，真正起作用的是雙鏈RNA[1]。這些雙鏈RNA是體外
RNAi表達載體構建
近年來的研究表明，一些短片斷的雙鏈RNA可以通過促使特定基因的mRNA降解來高效、特異的阻斷體內特定基因表達，誘使細胞表現出特定基因缺失的表型， 稱為RNA干擾（RNA interference，RNAi）。siRNA（small interfering RNAs）就是這種短片斷雙鏈RNA分子，能夠
RNAi表達載體構建（一）
近年來的研究表明,一些短片斷的雙鏈RNA可以通過促使特定基因的mRNA降解來高效、特異的阻斷體內特定基因表達,誘使細胞表現出特定基因缺失的表型, 稱為RNA干擾（RNA interference,RNAi）.siRNA（small interfering RNAs）就是這種短片斷雙鏈RNA分
RNAi表達載體構建
近年來的研究表明,一些短片斷的雙鏈RNA可以通過促使特定基因的mRNA降解來高效、特異的阻斷體內特定基因表達,誘使細胞表現出特定基因缺失的表型, 稱為RNA干擾（RNA interference,RNAi）.siRNA（small interfering RNAs）就是這種短片斷雙鏈RNA分子,能夠
RNAi的作用機制及siRNA的合成方法（一）
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是由雙鏈RNA(double strandedRNA， dsRNA)分子在mRNA水平關閉相應序列基因表達或使其沉默的過程。dsRNA可以抑制不同類型細胞的靶向基因表達，用特異性的抗體幾乎檢測不到靶向基因所表達的蛋白質。因此，RNAi技術又
RNAi的作用機制及siRNA的合成方法
RNAi的作用機制及siRNA的合成方法RNA干擾(RNA interference，RNAi)是由雙鏈RNA(double strandedRNA， dsRNA)分子在mRNA水平關閉相應序列基因表達或使其沉默的過程。dsRNA可以抑制不同類型細胞的靶向基因表達，用特異性的抗體幾乎檢測不到靶向
RNAi常見問題及問答（FAQs）
有關Stealth? RNAi的問題什么是Stealth? RNAi？Stealth? RNAi是RNAi化學的新一代產品。Stealth? RNAi分子是經過ZL化學修飾的、鈍末端、雙鏈25聚體（25mer）。這些化學修飾專門用來消除誘導的細胞應激反應。它也使Stealth? RNAi比標準的si
RNAi的研究進展（一）
RNA干擾(RNA interference ,RNAi) 現象是一種進化上保守的抵御轉基因或外來病毒侵犯的防御機制。將與靶基因的轉錄產物mRNA 存在同源互補序列的雙鏈RNA(double strand RNA ,dsRNA) 導入細胞后,能特異性地降解該mRNA ,從而產生相應的功能表型缺失
RNAi放大效應機制
由于在一些生物中RNAi的影響格外顯著，有人提出在RNAi 途徑中可能存在某個（信號）擴增的步驟。這種擴增可能是復制外源注入的dsRNA從而產生更多的siRNA ，也可能是直接擴增siRNA本身。這種擴增可能在RNA誘導沉默復合物（RISC）形成過程進行，作為RISC形成的補充，或者獨立于R
RNA干擾（轉錄后基因沉默）實驗
RNA干擾（RNA interference, RNAi）是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA（double-stranded RNA，dsRNA）誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。目前主要用于（1）特異性剔除或關閉特定基因的表達 （2）探索基因功能和傳染性疾病及惡性腫瘤的治療 （3）使
基因技術專題1
專題一：RNA干擾技術（RNAi）1995年，康奈爾大學的Su Guo博士用反義RNA阻斷線蟲基因表達的試驗中發現，反義和正義RNA都阻斷了基因的表達，他們對這個結果百思不得其解。直到1998年， Andrew Fire的研究證明，在正義RNA也阻斷了基因表達的試驗中，真正起作用的是雙鏈RNA。這些
關于小干擾RNA的簡介
小干擾RNA（siRNA），有時稱為短干擾RNA或沉默RNA，是一類雙鏈RNA分子，長度為20-25個堿基對，類似于miRNA，并且在RNA干擾（RNAi）途徑內操作。它干擾了表達與互補的核苷酸序列的特定基因的轉錄后降解的mRNA，從而防止翻譯。 siRNA由雙鏈RNA (double str
RNA干擾（轉錄后基因沉默）實驗
RNA干擾 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1. 病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsR
RNA干擾（RNAi）實驗原理與方法（1）
近年來的研究表明，將與mRNA對應的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導入細胞，可以使mRNA發生特異性的降解，導致其相應的基因沉默。這種轉錄后基因沉默機制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被稱為RNA干擾（RNAi）。一、R
miRNA、siRNA、dsRNA與shRNA－表示什么意思？
siRNA，shRNA，dsRNA，miRNA間的區別RNA干擾（RNAi），即用20多個核苷酸組成的短的雙鏈RNA（siRNA）代替傳統反義核酸進行轉錄后基因沉默，已經迅速而廣泛地應用到基因功能，基因表達調控機制研究等熱門領域，并為基因治療開辟了新的途徑。近兩年來，這方面的科學論文及報道爆炸性增長
RNA干擾技術(RNA－interference，RNAi)
1995年，康乃爾大學的Su Guo博士在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲（C. elegans）中的par-1基因時，發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷上述基因的表達，而同時在對照實驗中給線蟲注射正義RNA（sense RNA）以期觀察到基因表達的增強。但得到的結果
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（1）
基因沉默（gene silencing）是生物體內特定基因由于種種原因不表達的遺傳現象。一方面，基因沉默是生物遺傳操作創造新的遺傳修飾生物（genetically modified organisms）的障礙，另一方面，它又是植物抵抗外來核酸入侵（如病毒）的一種反應，為植物抗病毒的遺傳育
RNA干擾的作用機制
病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsRNA。宿主細胞對這些dsRNA迅即產生反應，其胞質中的核酸內切酶Dicer將dsRNA切割成多個具有特定長度和結構的小片段RNA（大約21～23 bp），即siRNA。siRNA在細胞內R
RNA干擾技術的作用機制
病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsRNA。宿主細胞對這些dsRNA迅即產生反應，其胞質中的核酸內切酶Dicer將dsRNA切割成多個具有特定長度和結構的小片段RNA（大約21～23 bp），即siRNA。siRNA在細胞內R
冷泉港實驗室：劃算的基因沉默方法
大約在十年前，2006年諾貝爾生理/醫學獎得主Craig Mello和Andrew Fire發現，他們能夠將短RNA分子插入到線蟲中并沉默特定基因的表達。今天，研究人員也常常使用這種強大的RNA干擾方法來研究哺乳動物系統中的特定基因功能。 為了進行這種基因沉默實驗，研究人員通常需要依賴化學合成的
RNAi的機理與應用（二）
首先，外源的或體內產生的長雙鏈 RNA(long double stranded RNA, dsRNA) 首先被 Dicer 酶降解為長 21 ～ 23bp （堿基對）長度的小分子雙鏈 RNA （稱為小干擾核酸， small interfering RNA, siRNA), 這是一個依賴 A
RNAi實驗原理與方法
RNAi實驗原理與方法近年來的研究表明，將與mRNA對應的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導入細胞，可以使mRNA發生特異性的降解，導致其相應的基因沉默。這種轉錄后基因沉默機制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被稱為RNA干擾（
RNAi的實驗原理和操作實用技術(1)
幾十年來生物學上最重要的進展，也許是關于RNA分子能調節基因表達的發現。RNA干涉（RNAi）是指雙鏈RNA分子使基因表達沉寂的現象，是在線蟲中發現的，在 1998年的一篇Nature論文中被公諸于眾。此后，科學家們明白，RNAi還有其他形式，它既是一種了解基因功能的強大工具，又是很多生物的基因組所
RNAi技術研究進展
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現，植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post transcri
miRNA和siRNA簡介及區別
1998年，Andrew Fire和Craig Mello提出了一項新技術：通過dsRNA誘導特異基因的沉默，即所謂RNAi。2000年，Amy Pasquinelli等將lin-4和let-7作小時序RNAs(stRNAs，mall temporal RNAs)。RNA干涉（RNAi）在實驗室
miRNA和siRNA的基本介紹及區別
1998年，Andrew Fire和Craig Mello提出了一項新技術：通過dsRNA誘導特異基因的沉默，即所謂RNAi。2000年，Amy Pasquinelli等將lin-4和let-7作小時序RNAs(stRNAs，mall temporal RNAs)。RNA干涉（RNAi）在實驗室中是