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    如何選擇凝膠

    生物分子下游純化的對象一般包括蛋白、酶、重組蛋白、單抗、抗體及抗原、肽類、病毒、核酸等。純化前首先需要測定生物分子的各物理和化學特性,然后通過實驗選擇出最有效的純化流程。 1.測定------分子量、PI 當目標蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚時,可用PAGE電泳方法或層析方法加以測定。分離范圍廣闊的Superose HR預裝柱很適合測定未知蛋白的分子量。用少量離子交換介質在多個含不同PH緩沖液的試管中,可簡易地測出PI,并選擇純化用緩沖液的最佳PH。 2.選擇------層析方法 若對目標蛋白的特性或樣品成分不太了解,可嘗試幾種不同的純化方法:一] 使用最通用的凝膠......閱讀全文

    生化實驗講義(理論部分)——層析技術(五)

      柱床體積Vt可以通過加入一定量的水至層析柱預定標記處,然后測量水的體積來測定。外水體積Vo可以通過測定完全排阻的大分子物質的洗脫體積來測定,一般常用藍色葡聚糖-2000作為測定外水體積的物質。因為它的分子量大(為200萬),在各種型號的凝膠中都被排阻,并且它呈藍色,易于觀察和檢測。&n

    2-DE 蛋白質組學的 PROTICdb 數據庫實驗

    實驗步驟:3.1 PROTICdb 概述在輸入或瀏覽數據時,每個最終用戶需要一個 PROTICdb 賬戶(由您的管理員創建 ) 。作為一個新用戶,首先要創建一個新的項目。一旦建立,該項目就屬于這個用戶,這個用戶有權授予其他用戶訪問權限。為確保數據一致性的精確度,盡量不要用手動輸入操作。因此,

    凝膠過濾(gel filtration,GF)注意事項

    1.層析柱的選擇層析柱大小主要是根據樣品量的多少以及對分辨率的要求來進行選擇。一般來講,主要是層析柱的長度對分辨率影響較大,長的層析柱分辨率要比短的高;但層析柱長度不能過長,否則會引起柱子不均一、流速過慢等實驗上的一些困難。一般柱長度不超過100cm,為得到高分辨率,可以將柱子串聯使用。層析柱的直徑

    2-DE 蛋白質組學的 PROTICdb 數據庫實驗

    儀器、耗材DBMS實驗步驟3.1 PROTICdb 概述在輸入或瀏覽數據時,每個最終用戶需要一個 PROTICdb 賬戶(由您的管理員創建 ) 。作為一個新用戶,首先要創建一個新的項目。一旦建立,該項目就屬于這個用戶,這個用戶有權授予其他用戶訪問權限。為確保數據一致性的精確度,盡量不要用手動輸入操作

    生化實驗講義(理論部分)——層析技術(六)

    5. 洗脫速度洗脫速度也會影響凝膠層析的分離效果,一般洗脫速度要恒定而且合適。保持洗脫速度恒定通常有兩種方法,一種是使用恒流泵,另一種是恒壓重力洗脫。洗脫速度取決于很多因素,包括柱長、凝膠種類、顆粒大小等,一般來講,洗脫速度慢一些樣品可以與凝膠基質充分平衡,分離效果好。但洗脫速度過慢會造成樣品擴散加

    凝膠成像系統在選擇過程中需要注意哪些?

    隨著科學日新月異的發展,傳統的凝膠成像系統在使用過程當中,可能它的功能比較單一,但是隨著科技的不斷進步和發展,凝膠成像系統的功能和使用情況也在逐步得到提高。所以大家在凝膠成像系統的選擇上,需要根據自身的實際情況來做出相關的判斷和選擇,只要選擇出來的合適的凝膠成像系統,才能夠真正的為自己所用,幫助自己

    凝膠層析法概述

    凝膠層析法(gel chromatography)也稱分子篩層析法,是指混合物隨流動相經過凝膠層析柱時,其中各組分按其分子大小不同而被分離的技術。該法設備簡單、操作方便、重復性好、樣品回收率高,除常用于分離純化蛋白質、核酸、多糖、激素等物質外,還可用于測定蛋白質的相對分子質量,以及樣品的脫鹽和濃

    凝膠成像分析系統的選擇趨勢

        在生物學研究和生物學相關的分子生物交叉學科研究領域,凝膠成像分析系統的實際應用正在逐漸普遍化,但是絕大多數的用戶在面對市場上種類繁多的品牌國產和進口的凝膠成像分析系統時,往往是不知道如何去進行選擇,而從凝膠成像分析系統的選擇趨勢,其實用戶在選擇的時候只需要以自

    如何選擇Alpha凝膠成像?

    如何選擇Alpha凝膠成像,Alpha公司是一家專注于凝膠成像的研發,特別是高端產品的開發和生產的公司。其化學發光成像、多色熒光凝膠成像產品在高端凝膠成像市場一直深的用戶青睞。目前是美國ProteinSimple公司的一部分,但產品與品牌仍保持一定的獨立性,被收購后在高端產品部分又陸續推出幾款很好的

    實驗室常用成像設備選購要點

      成像設備是生物實驗室最為常用的儀器之一,直接為您的論文提供影像依據。而這些影像質量的好壞,有時候甚至決定著您的論文能否發表。擁有一臺好的、運行穩定的設備也是導師和技術主管的心愿。那么,如何從紛繁的市場上選擇到一款好的成像設備呢?很多號稱“王牌”的設備是否真的能夠打滿分呢?本文教您

    實驗室常用成像設備選購要點

    成像設備是生物實驗室最為常用的儀器之一,直接為您的論文提供影像依據。而這些影像質量的好壞,有時候甚至決定著您的論文能否發表。擁有一臺好的、運行穩定的設備也是導師和技術主管的心愿。那么,如何從紛繁的市場上選擇到一款好的成像設備呢?很多號稱“王牌”的設備是否真的能夠打滿分呢?本文教您選擇成像系統的三大要

    凝膠成像分析儀的相機區分

       在組成凝膠成像分析儀的配件中,相機絕對是其中最重要的一個部件,因為凝膠成像分析的基礎,首先就是要獲取圖像,而獲取圖像的部件就是相機。而隨著影像技術的發展,在相機的選擇上,已經有了較大的選擇余地,那么凝膠成像分析儀的相機有哪些區分呢?    一般來說凝膠

    凝膠成像系統的基本選購原則(一)

      如何從紛繁的市場上選擇到一款好的成像設備呢?很多號稱-的設備是否真的能夠打滿分呢?擁有一臺好的、運行穩定的設備是實驗者的心愿。下面的文章就向您介紹選擇成像系統的“四個基本選購原則”。   原則一:   “只選對的,不選貴的”市場上各品牌、各型號的成像儀林林種種,但是從成像原理上可以分成兩

    凝膠成像系統的基本選購原則(一)

    如何從紛繁的市場上選擇到一款好的成像設備呢?很多號稱-的設備是否真的能夠打滿分呢?擁有一臺好的、運行穩定的設備是實驗者的心愿。下面的文章就向您介紹選擇成像系統的“四個基本選購原則”。原則一:“只選對的,不選貴的”市場上各品牌、各型號的成像儀林林種種,但是從成像原理上可以分成兩大類,分別是拍照成像和掃

    凝膠成像系統的四個基本選購原則

    如何從紛繁的市場上選擇到一款好的成像設備呢?很多號稱“王牌”的設備是否真的能夠打滿分呢?擁有一臺好的、運行穩定的設備是實驗者的心愿。下面的文章就向您介紹選擇成像系統的“四個基本選購原則”。原則一:“只選對的,不選貴的”市場上各品牌、各型號的成像儀林林種種,但是從成像原理上可以分成兩大類,分別是拍照成

    凝膠色譜儀的操作使用說明

    凝膠色譜儀的操作使用包括凝膠的選擇與預處理、色譜柱的選擇、裝柱、平衡、加樣、洗脫、檢測、收集和凝膠的保存等。一、凝膠的選擇:1、根據樣品確定分離范圍,選擇合適的凝膠。應將大分子完全排阻而小分子完全滲透。2、顆粒度適當:顆粒小,分辨率高,但相對流速慢,有時會造成嚴重擴散。顆粒大,流速快,分辨率低。3

    蛋白質組數據的多元分析實驗

    儀器、耗材掃描儀圖像分析軟件Excel 程序多元數據分析的軟件實驗步驟用 Progenesis、Excel 和 The  Unscrambler 對 2D 凝膠進行多元分析。3.1 確定研究方案后建立蛋白的 2D 凝膠在本章節中不再闡述,但要確定染色方法以便進行凝膠的定量分析(見注釋 1

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    蛋白質組數據的多元分析實驗

    儀器、耗材:掃描儀                                        

    凝膠成像系統的四個基本選購原則

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    凝膠成像工作原理及使用方法

       凝膠成像系統是,樣品在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣,以標準品或者其他的替代標準品相比較就會對未知樣品作一個定性分析。這個就是圖像分析系統定性的基礎。根據未知樣品在圖譜中的位置可以對其作定性分析,就可以確定它的成份和性質。    樣品對投射或者反射光有部分的吸收,從而照相所得到的圖像上

    凝膠成像工作原理及使用方法

    凝膠成像系統是,樣品在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣,以標準品或者其他的替代標準品相比較就會對未知樣品作一個定性分析。這個就是圖像分析系統定性的基礎。根據未知樣品在圖譜中的位置可以對其作定性分析,就可以確定它的成份和性質。樣品對投射或者反射光有部分的吸收,從而照相所得到的圖像上面的樣品條帶的光

    核酸凝膠電泳-3

    3、電泳:電壓<10V/cm,電泳至溴酚蘭移出樣品槽到凝膠板的2/3距離時,關閉電源。4、取出凝膠塊,置紫外透射反射分析儀上觀察,即可見桔紅的DNA區帶。【注意事項】1、加樣時槍頭不要碰壞孔壁,否則DNA帶型不整齊。大多情況下,加樣時不必更換槍頭,可在陰極槽中反復吸打電泳緩沖液清洗,但對Southe

    聚丙烯酰胺凝膠(polyacrylamide gel)選擇指導

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    聚丙烯酰胺凝膠電泳原理特性和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電...-1

    聚丙烯酰胺凝膠是由單體丙烯酰胺(acrylamide,簡稱Acr)和交聯劑又稱為共聚體的N, N-甲叉雙丙烯酰胺(methylene-bisacrylamide,簡稱Bis)在加速劑和催化劑的作用下聚合交聯成三維網狀結構的凝膠,以此凝膠為支持物的電泳稱為聚丙烯酰胺凝膠電泳簡稱PAGE)。與

    2-DE 蛋白質組學的 PROTICdb 數據庫實驗(四)

    4. 質譜鑒定報告文件上傳PROTICdb 兼容以制表分隔的文本格式輸出的 Sequest 鑒定報告(見注釋 13) 。( 1 ) 為演示,訪問 http: //location 一 of/your/proticdb/home/demo. php。點擊  “formto  o

    2-DE 蛋白質組學的 PROTICdb 數據庫實驗(二)

    4. 梅拉尼生成的輸出文件的上傳( 1 ) 由梅拉尼軟件生成一個檢測報告,并把它輸出到一制表分隔的文本格式文件 ( 見注釋 9)。 文件擴展名為 “ txt.  ” 。 本演示中,使用 PROTICdb  Demo,   zip 中的 detections

    多糖的分離和純化幾種方法

      經過前期對多糖的提取,去除蛋白質、色素、小分子等物質得到粗多糖,而這些粗多糖其實是由很多分子量、結構不同的多糖混合而成。為了得到純的多糖即均一性多糖,仍需進一步對這些粗多糖進行分離純化。  1、分步沉淀法  多糖的結構和分子量不同,其極性大小不同,在有機溶劑(如醇或酮)中的溶解度不同,根據這一原

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    2-DE 蛋白質組學的 PROTICdb 數據庫實驗(五)

    ( 10 ) 鼠標左鍵點擊同一個點(342 號)(見注釋 20) ,激活蛋白點信息框。蛋白點的數據按以下 4 個條目排列:概要、關系、鑒定和量化。每個條目對應的信息可被不斷充實。其中鑒定包括質譜的詳細數據。( 11 ) 開發鑒定、質譜詳細數據和下一個子目錄。從質譜數據分析得到了每個匹配結果,首先得到

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