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    單細胞凝膠電泳標準操作規程(本室SOP)

    原理:在細胞核中,DNA是環狀附著在核基質上,細胞裂解過程中,核基質被溶解、抽提,DNA的結構則未發生變化。如果DNA鏈上存在缺口,則使DNA超螺旋變的松弛,DNA環向外展,同時由于暴露了陰電荷,在電場力的作用下,松動的DNA環向陽極遷移,但是由于這種松動的DNA環一端仍附著于核DNA,其遷移距離受到限制,因此尾長并不總是真實反映鏈缺口的多少。實際應當依靠尾長與尾部的熒光強度同時來進行分析。操作步驟:1. 分離制備單細胞懸液:(1) 體外培養的細胞株:用胰酶消化,吹打成單細胞懸液(2) 體內臟器細胞:處死動物,取出臟器,于Hanks’液中制備成單個細胞懸液。2. 膠板制備:(1) 取20~50μl于56℃水浴中保溫的0.5%普通熔點瓊脂糖,鋪于磨沙載玻片上,形成底膠。(2) 取100~150μl 0......閱讀全文

    單細胞凝膠電泳標準操作規程(本室SOP)

    原理:在細胞核中,DNA是環狀附著在核基質上,細胞裂解過程中,核基質被溶解、抽提,DNA的結構則未發生變化。如果DNA鏈上存在缺口,則使DNA超螺旋變的松弛,DNA環向外展,同時由于暴露了陰電荷,在電場力的作用下,松動的DNA環向陽極遷移,但是由于這種松動的DNA環一端仍附著于核DNA,其遷移距離受

    單細胞凝膠電泳標準操作

    實驗概要本實驗介紹了單細胞凝膠電泳標準操作流程。實驗原理在細胞核中,DNA是環狀附著在核基質上,細胞裂解過程中,核基質被溶解、抽提,DNA的結構則未發生變化。如果DNA鏈上存在缺口,則使DNA超螺旋變的松弛,DNA環向外展,同時由于暴露了陰電荷,在電場力的作用下,松動的DNA環向陽極遷移,但是由于這

    單細胞凝膠電泳標準操作

    實驗原理在細胞核中,DNA是環狀附著在核基質上,細胞裂解過程中,核基質被溶解、抽提,DNA的結構則未發生變化。如果DNA鏈上存在缺口,則使DNA超螺旋變的松弛,DNA環向外展,同時由于暴露了陰電荷,在電場力的作用下,松動的DNA環向陽極遷移,但是由于這種松動的DNA環一端仍附著于核DNA,其遷移距離

    凝膠色譜儀標準操作規程(SOP)

    背景知識:凝膠色譜技術是六十年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離分技術,由于設備簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質有很高的分離效果。目前已經被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫學等有關領域廣泛采用,不但應用于科學實驗研究,而且已經大規模地用于工業生產。一、基本理論(一)分

    Western blot 標準操作規程(SOP)

    關鍵詞:western blot 聚丙烯酰胺 分離膠 積層膠 電泳目的:蛋白質的檢測與分析【原理】一個基因表達終極結果是產生相應的蛋白質(或酶)。因此檢測蛋白質是測定基因表達的主要標志,檢測蛋白質的方法很多,除ELISA法外,也可用與檢測DNA和RNA相類似的吸印方法。前兩法有“南”和“北”之意,故

    細胞凍存與細胞復蘇標準操作規程(SOP)

    背景知識 :細胞培養的傳代及日常維持過程中,在培養器具、培養液及各種準備工作方面都需大量的耗費,而且細胞一旦離開活體開始原代培養,它的各種生物特性都將逐漸發生變化并隨著傳代次數的增加和體外環境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久;細胞

    單細胞凝膠電泳法檢測單細胞DNA損傷

    單細胞凝膠電泳(single-cell gel eiectrophoresis,SCGE)又稱慧星試驗(comet assay)是一項較新的電泳方法。自1978年被Rydcbert B.等人成功地用于檢驗DNA單鏈斷裂以來,經過不斷的改進,已成為一種快速、靈敏、簡便的檢測DNA損傷的方法,廣泛地應用

    豚鼠飼育管理標準操作規程(SOP)

    名稱:豚鼠飼育管理標準操作規程(SOP)關鍵詞:豚鼠飼育管理目的:本操作規程是關于怎樣飼育豚鼠才能使其被最有效的用于實驗的具體操作規程。主體內容:1.飼育管理指標(1)環境衛生管理的指標(2)外觀健康檢查指標(3) 生產數量指標 按平面飼養設備,每人負責飼養管理種母為150只,種公30只,育種60只

    BECKMAN流式細胞儀標準操作規程(SOP)

    1. 主題內容和使用范圍本規程規定了流式細胞儀的標準操作程序。本規程主要使用于組織、血液的檢測和定量2. 應用標準聯科流式細胞儀應用手冊3. 術語和定義術語、定義應用于EPICS  XL流式細胞儀用戶培訓手冊4. 流式細胞儀組成:(1)流動室及液流驅動系統;(2)激光光源及光束成形系統;(

    BECKMAN流式細胞儀標準操作規程(SOP)

    1. 主題內容和使用范圍本規程規定了流式細胞儀的標準操作程序。  本規程主要使用于組織、血液的檢測和定量2. 應用標準聯科流式細胞儀應用手冊3. 術語和定義術語、定義應用于EPICS  XL流式細胞儀用戶培訓手冊  4. 流式細胞儀組成:(1)流動室

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