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使用方法1. 接種細胞：用膠原酶消化細胞并計數（不建議用胰酶）。轉染前 18-24 小時進行細胞的鋪板，以便在轉染時，貼壁細胞的密度大約在 80%左右。注：培養液中的血清和抗生素不影響轉染效率。2. 準備 EZ Trans-DNA 復合物1）轉染前將所有試劑置于室溫 10 分鐘。下面，以轉染 24 孔板培養皿為例，說明轉染的具體方法（如果在別的培養器皿中進行轉染，各試劑建議使用量見表 1.：2）將 1 μg 質粒 DNA 稀釋到 40 μL 無血清的高糖 DMEM 培養基，用移液槍吹吸 3-4 次。3）將 3 μL EZ Trans 轉染試劑稀釋到 40 μL 無血清的高糖 DMEM 培養基，用移液槍吹吸 3-4 次。注： 無血清的高糖 DMEM 培養基是稀釋液， 不能使用含血清的培養基進行 DNA 和 EZ Trans 轉染試劑的稀釋！因為 EZ Trans-DNA 轉染復合物的形成過程不能含有血清。4）將稀釋好的 EZ Tr......閱讀全文
使用方法1. 接種細胞：用膠原酶消化細胞并計數（不建議用胰酶）。轉染前 18-24 小時進行細胞的鋪板，以便在轉染時，貼壁細胞的密度大約在 80%左右。注：培養液中的血清和抗生素不影響轉染效率。2. 準備 EZ Trans-DNA 復合物1）轉染前將所有試劑置于室溫 10 分鐘。下面，以轉染 24
材料： 質粒DNA 指數生長的真核細胞 PEI （聚乙烯亞胺） 1×HBS （pH7.4） 配方： PEI 儲存液（100 μM）：稱取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS （pH7.4）中， 0.2 μm 濾膜過濾，儲存于4℃備用。 1×HBS （pH7.4）： 將8.76 g
材料：質粒DNA指數生長的真核細胞PEI （聚乙烯亞胺）1×HBS （pH7.4）配方：PEI 儲存液（100 μM）：稱取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS （pH7.4）中， 0.2 μm 濾膜過濾，儲存于4℃備用。1×HBS （pH7.4）： 將8.76 g NaCl 溶解
實驗概要 Use PEI (Linear 25 kDa Reagent) to transfect in HEK293T cells. 主要試劑 PEI is polyethyleimine, a 25 kDa linear from Polysciences Inc. Make up
Polysciences轉染試劑系列是基于PEI（Polyethylenimine）的產品，因其有效的瞬轉效率和蛋白產量，已廣泛應用于工業化生產和基礎科研中的蛋白表達研究，年文獻發表量已達上千篇。PEI是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質子化的氨基氮
?? 就在上推出了一些陽離子聚合物基因轉染技術，以其適用宿主范圍廣，操作簡便，對細胞毒性小，轉染效 ?轉染試劑率高受到研究者們的青睞。 ? ? 在這其中，樹枝狀聚合物和聚乙烯亞胺的轉染性能*佳，但樹枝狀聚合物的結構不易于進一步改性，且其合成工藝復雜。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密
常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染（永久轉染）.前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平的表達,但通常只持續幾天,多用于啟動子和其它調控元件的分析.一般來說,超螺旋質粒DNA轉染效率較高,在轉染后24-72小時內（依賴于各種不同
線型PEI（Line PEI，LPEI）與其衍生物用作基因轉染載體的研究比分枝狀PEI（Branched PEI，BPEI）要早一些，過去的研究認為在不考慮具體條件，LPEI/DNA轉染復合物的細胞毒性較低，有利于細胞定位，因此與BPEI相比應該轉染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有
脂質體介導法 磷酸鈣沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 外源基因進入細胞主要有四種方法：電擊法、磷酸鈣法和脂質體介導法和病毒介導法。電擊法是在細胞上短時間暫時性的
? ? 寡核苷酸作為重要的特異性調控基因表達物質，已廣泛的應用于藥物開發治療以及相關基因功能研究。但是，寡核苷酸易被核酸酶降解，具有較高的負電荷等缺點，使其直接作為治療藥物穩定性差，跨越細胞膜能力弱，治療效果不好，為了解決以上問題我們采用聚乙烯亞胺800（PEI800）為原料，通過氮-酰化作用結合亞