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  • 非洲豬瘟(ASF)的疫病與定量PCR檢測

    非洲豬瘟(ASF)病由非洲豬瘟病毒(ASFV)引起,ASFV感染家豬、疣豬和南非野豬。該病通過健康和患病動物之間的直接接觸,或通過受感染的飼料間接接觸,以及通過生物載體(軟蜱)進行傳播。有特急性、急性、亞急性和慢性的發病形式,其中,急性疾病潛伏期短,大約3-7天,伴隨高燒(可達42°C),并在5-10天內死亡。由于豬感染的病毒毒力的不同,死亡率從0%到100%不等,任何地區或國家暴發疫情時,都對當地的生豬養殖業及相關行業造成破壞性影響,但是,目前還沒有證實ASF有感染人的風險。賽默飛非洲豬瘟檢測方案:從樣品到結果1.簡便的樣品采集 GenoTube拭子采樣管,通過德國FLI(Friedrich-Loeffler-Institute)驗證,可用于非洲豬瘟的樣品采集。該采樣工具能實現樣品常溫運輸和保存,并對接實驗室qPCR、ELISA、膠體金檢測卡檢測。提高樣品運輸過程中的生物安全、提高物流速度的同時降低物流成本。 圖1.......閱讀全文

    熒光定量PCR檢測方法

      所謂實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。  檢測方法  1.SYBRGreenⅠ法:  在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信

    熒光定量PCR檢測流程

    熒光定量PCR檢測一般流程如下圖,選擇檢測靶標基因,進行引物篩選及體系構建,后續進行樣本處理核酸提取,檢測分析結果。? ??

    實時熒光定量PCR檢測方法

    聚合酶鏈式反應(PCR)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。目前,PCR成為分子生物學研究必不可少的一部分。實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)技術,是指在PCR反應

    熒光定量PCR檢測儀用途

      競道非洲豬瘟PCR檢測儀(實時熒光定量PCR儀支持變溫檢測)用于運行病毒檢測實驗,并對實驗數據進行分析;儀器既可在實驗室內操作,又可用于野外科學實驗,配合相應試劑,對取自待檢測樣本的分析物或其他分析物中的目標核酸進行快速、準確的定性檢測。  競道非洲豬瘟檢測儀配套非洲豬瘟病毒熒光pcr檢測試劑盒

    熒光定量PCR檢測儀特點

      1.體積小,重量輕,易于攜帶。輕松滿足外出實驗的需求。  2.內置10寸高清電容屏PDA,觸屏操作,簡便快捷。  3.Marlow高品質Peltier制冷片,結合德國高端PT1000溫度傳感器以及電性電阻加熱補償邊緣的溫度控制模式,最大升溫速度7℃,最大降溫速度5℃,大大縮短實驗時間。  4.整

    常見熒光定量PCR檢測方法比較

    定量PCR:以參照物為標準,對PCR終產物進行分析或對PCR過程進行監測,從而達到評估樣本中靶基因的拷貝數,稱為定量PCR。定量PCR的可行性定量一般是在PCR擴增的指數期進行的。   常見熒光定量PCR方法比較   SYBR Green I 檢測模式   SYBR

    常見熒光定量PCR檢測方法比較

      定量PCR:以參照物為標準,對PCR終產物進行分析或對PCR過程進行監測,從而達到評估樣本中靶基因的拷貝數,稱為定量PCR。定量PCR的可行性定量一般是在PCR擴增的指數期進行的。  常見熒光定量PCR方法比較  SYBR Green I 檢測模式  SYBR Green I 是一種能與雙鏈 D

    分級定量PCR檢測血清HBV-DNA

    引言 PCR技術對基因從定性到定量的測定是分子生物學方法研究一大飛躍,定量PCR已成為目前分子生物學技術研究的熱點之一. 迄今研究和應用的定量PCR方法有4種,即PCR產物的直接定量;極限稀釋法;靶基因與參照基因的同步擴增;競爭性PCR法. 以上方法各有利弊,選擇某一方法取決于靶基因的特性,對準確度

    定量PCR

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 定量PCR(即時聚合酶鏈鎖反應,Real-time Polymerase Chain Reaction,簡稱 Real-time PCR、即時PCR),又稱定量即時聚合酶鏈鎖反應(Quantitative real time

    定量PCR

    定量PCR可以用于:(1)以外參或內參為標準,通過對PCR終產物的分析或PCR過程的監測,進行PCR起始模板量的定量;(2)用外標法(熒光雜交探針保證特異性)通過監測PCR過程(監測擴增效率)達到精確定量起始模板數的目的,同時以內對照有效排除假陰性結果(擴增效率為零)。實驗方法原理定量PCR(即時聚

    使用定量PCR方法檢測轉基因產品

    轉基因產品的檢測可以從核酸和蛋白質水平上進行檢測。定量檢測主要是基于核酸水平的檢測,由于目前轉基因技術中使用的基因構件主要來源于花椰菜花葉病毒(CaMV)的 35S 啟動子和膿桿菌的 Nos 終止子,絕大部分轉基因產品含有這兩個基因片段,所以檢測 35S 啟動子和 Nos 終止子基本可達到檢測轉基因

    熒光定量PCR技術檢測食品轉基因

    當前,國際社會對轉基因食品檢測技術路線主要有兩條:一是對外源基因表達產物蛋白質進行檢測;二是直接檢測外源基因DNA。隨檢測手段不斷提高,對食品轉基因檢測已從定性提高到定量水平 。對外源基因表達產物蛋白質檢測常用方法有酶聯免疫法(ELISA)、蛋白質印跡法(Westernblot)等,這些檢測方法大多

    多重熒光定量pcr最多檢測多少種

    這個看你自己的設置。qPCR儀一般是96孔板,最多有5個通道。理論上,你用一個通道作為內標,2個孔分別做陰陽性對照。那么可以做94*4=376個。當然這只是理論上的最大值,實際操作的時候受很多限制,如多重PCR之間的交叉反應導致無法合孔,樣本量不足等。具體到腫瘤相關的突變檢測試劑盒,目前拿到CFDA

    分級定量PCR檢測血清HBVDNA

    ?PCR技術對基因從定性到定量的測定是分子生物學方法研究一大飛躍,定量PCR已成為目前分子生物學技術研究的熱點之一. 迄今研究和應用的定量PCR方法有4種,即PCR產物的直接定量;極限稀釋法;靶基因與參照基因的同步擴增;競爭性PCR法. 以上方法各有利弊,選擇某一方法取決于靶基因的特性,對準確度的要

    實時熒光定量PCR,檢測指標是什么

    實時熒光定量PCR是檢測模板DNA的拷貝數、基因表達量、基因突變等的

    熒光定量PCR技術的檢測技術原理

    將標記有將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環,并遵守聚合酶鏈反應規律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發下發出熒光,隨著循環次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長,通過實時檢測與之對應的隨

    熒光定量PCR技術檢測-霍亂弧菌

    ?霍亂弧菌檢測一直是微生物檢驗工作一個難點,尤其是食品中霍亂弧菌檢測,常常由于菌量少、菌株變異大及霍亂弧菌越冬機制不明瞭,使常規培養法、血清學檢測法等無法檢出。在研究霍亂弧菌不同血清型NhaA基因變異基礎上,選取不同血清型間NhaA基因共有保守序列,建立熒光定量PCR檢測方法,并比較其與常規檢測方法

    實時熒光定量PCR檢測系統的介紹

      實時熒光定量PCR檢測系統也叫實時熒光定量核酸擴增檢測系統(英文全名是Real-time Quantitative PCR Detection System),簡稱實時熒光qPCR,qPCR的核心是實時熒光定量PCR儀及與其配套的檢測分析軟件系統。聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain

    實時熒光定量PCR檢測及臨床應用

    實時熒光定量PCR技術的應用定量PCR是在定性PCR技術基礎上發展起來的核酸定量技術。實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Appliedbiosystems公司推出,它是一種在PCR反應體系中加入熒光基團,利用對熒光信號積累的實時檢測來監測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的

    定量PCR技術基本原理和方法以及PCR產物的檢測與定量1

    聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)是微量核酸擴增的有效工具,由于其靈敏、特異、快速等優點,在醫學上已廣泛應用與病毒、細菌病原體及遺傳病、腫瘤的早期診斷。隨著PCR技術的發展,特別是病毒或腫瘤的治療監測、疾病的診斷、機體基因表達調控方面,不僅需要檢測其存在

    定量PCR技術基本原理和方法以及PCR產物的檢測與定量3

    1) 特異性捕獲檢測法(非探針雜交捕獲)本法是非特異性檢測PCR產物的一種方法,用生物素標記引物和地高辛標記duTP或用生物素和地高辛分別標記其引物。經PCR擴增后,PCR產物中同時摻入了生物素和地高辛。用生物素包被孔捕獲PCR產物,用酶(AKP)標抗地高辛和產物反應,加底物顯色進行定量,此法是非序

    定量PCR技術基本原理和方法以及PCR產物的檢測與定量2

    1、非競爭內標定量PCR從細胞類標本中提取靶基因(核酸)時,同時會提取大量與靶基因無關的DNA或RNA;可以把這些靶基因無關DNA或 RNA作為內標與靶基因同步擴增,即在同樣的反應條件下,在一個反應試管內同步擴增來自同一標本的一段靶基因序列和另一段無關的內標序列,不享受同一引物和引物結合位點,內

    傳統定量PCR

      1.傳統定量PCR方法簡介  1)內參照法:在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為

    定量PCR簡介

    PCR反應通過變性、退火、延伸三個循環步驟,使目標DNA片段曾指數擴增。因此,PCR系統是一個極其靈敏的信號放大系統,能將極微弱、甚至是單拷貝的基因信號檢測出來。但是常規的PCR不能反映起始樣本中目的基因的含量水平,從而限制了它在臨床檢測中的應用。熒光定量PCR是指通過實時監控PCR體系中的熒光信號

    定量PCR技術

     定量PCR(Polymerase Chain Reaction)技術有廣義概念和狹義概念。廣義概念的定量PCR技術是指以外參或內參為標準,通過對PCR終產物的分析或PCR過程的監測,進行PCR起始模板量的定量。  廣義概念下的定量PCR技術可以分為五種類型:(1)外參法+終產物分析。所謂“外參法”

    定量PCR實驗

    實驗材料?限制性內切核酸酶反轉錄酶熱穩定 DNA 聚合酶dCTP靶核酸試劑、試劑盒?擴增緩沖液dNTP 貯存液胎盤 RNase 抑制劑儀器、耗材?瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠屏蔽型槍頭離心管正向排液式移液器PCR 儀實驗步驟?一、材料1. 緩沖液與溶液10X 擴增緩沖液4 種 dNTP 貯存液(20

    定量PCR技術

    ? 定量PCR(Polymerase Chain Reaction)技術有廣義概念和狹義概念。廣義概念的定量PCR技術是指以外參或內參為標準,通過對PCR終產物的分析或PCR過程的監測,進行PCR起始模板量的定量。  廣義概念下的定量PCR技術可以分為五種類型:  (1)外參法+終產物分析。所謂“外

    熒光定量PCR

      熒光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美國Applied Biosystems 公司推出的一種新定量試驗技術,它是通過熒光染料或熒光標記的特異性的探針,對PCR產物進行標記跟蹤,實時在線監控反應過程,結

    關于傳統定量PCR內標對定量PCR的影響

      若在待測樣品中加入已知起始拷貝數的內標,則PCR反應變為雙重PCR,雙重PCR反應中存在兩種模板之間的干擾和競爭,尤其當兩種模板的起始拷貝數相差比較大時,這種競爭會表現得更為顯著。但由于待測樣品的起始拷貝數是未知的,所以無法加入合適數量的已知模板作為內標。也正是這個原因,傳統定量方法雖然加入內標

    實時熒光定量PCR儀【實時熒光定量PCR儀】

      【FT-PCR】實時熒光定量PCR儀【實時熒光定量PCR儀】_風途廠家_Kgaolet?o ya dikarolo t?e bopago seswant?ho t?a kgole ya PCR  具體來講撲殺無害化處理染疫動物,禁止泔水飼喂生豬,加強生豬養殖運輸屠宰等各個環節的清洗和消毒,包括養

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