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    細胞轉染方法、轉染效率低的原因及其解決方案

    細胞轉染常用方法概述 轉染是將外源性基因導入細胞內的一種技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例;化學介導方法很多,如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法和多種陽離子物質介導的技術;生物介導方法,有較為原始的原生質體轉染和現在比較常用的各種病毒介導的轉染技術。 理想的細胞轉染方法應該具有轉染效率高、細胞毒性小等特點。病毒介導的轉染技術是目前轉染效率最高的方法,同時具有細胞毒性很低的優勢。但是,病毒轉染方法的準備程序復雜,常常對細胞類型有很強的選擇性,在一般實驗室中很難普及。目前非病毒介導的轉染技術中,轉染效率最高的方法是以陽離子非脂性物質為主的混合物配方。該類轉染物質介導的細胞轉染具有廣譜、細胞毒性小、性能穩定等特點,而且不受培養液中的血清和抗生素的干擾,比脂質體......閱讀全文

    如何提高轉染實驗的效率

    在本章節我們解釋了轉染體系的關鍵組分對細胞轉染  實驗的效率有何影響,并且合理的給予您一些關于如何使它們更有利于您研究方面的提示。 【組織培養試劑】 一般提示:優化您的細胞生長條件。只使用新鮮配制的培養基和添加劑,并經可能減少所用試劑的變更。 基礎培養基—目前所使用的各

    腫瘤免疫治療新貴——CAR-T

      免疫療法是當下腫瘤治療領域最具前景的發展方向之一。隨著PD-(L)1等免疫檢查點抑制劑應用范圍逐漸擴大,CAR-T療法研究不斷出現新的進展,CAR-T療法作為有別于傳統藥物的“活藥”,不僅對復發、難治性腫瘤患者表現出了突破性療效,其生產體系和使用場景也有別于普通藥物。鑒于當下生物技術的更新速度,

    嵌合抗原受體T細胞介紹

      過繼性細胞免疫治療是目前較為有效的惡性腫瘤的治療方法之一。隨著技術的日趨成熟, 已在多種實體瘤和血液腫瘤的臨床治療中取得較好療效。  摘要: 過繼性細胞免疫治療(adoptive cellular immunotherapy, ACI)是目前較為有效的惡性腫瘤的治療方法之一。隨著技術的日趨成熟,

    超分辨率顯微鏡實現自由運動神經環路高分辨成像

      提到在體小動物神經成像,人們自然會聯想到鈣離子熒光探針局部注射或遺傳鈣指示劑(如Gcamp家族)結合雙/三光子顯微鏡的經典在體成像組合。  隨著基因改造技術的突飛猛進,通過病毒轉染和轉基因技術,在神經元內源性表達“基因編碼類鈣指示劑(genetically encoded calcium ind

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