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  • 免疫組化試驗抗體選擇及常用染色方法

    一、免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC)免疫組織化學是利用抗原抗體的特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究。免疫組織化學染色技術不僅有較高的敏感性和特異性,其特點是將形態學改變與功能、代謝變化結合起來,直接在組織切片,細胞涂片或培養細胞爬片上定位一些蛋白質和多肽類物質的存在,并可精確到亞細胞結構水平,結合電子計算機圖像分析系統或激光掃描共聚集顯微術等技術,對被檢物質進行定量分析。 免疫組化實驗所用的組織和細胞標本有哪些? 實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類,前者包括石蠟切片(病理大片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細胞爬片和細胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標本最常用、最基本的方法,對于組織形態保存好,且能作連續切片,有利于各種染色對照觀察;還能長期存檔,供回顧性研......閱讀全文

    免疫組化試驗抗體選擇及常用染色方法

    一、免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC)免疫組織化學是利用抗原抗體的特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究。免疫組織化學染色技術不僅有較高的敏感性

    常用免疫組化染色方法

    常用免疫組化染色方法,真空負壓免疫熒光染色法染細胞培養片。1. 將細胞爬于載玻片或蓋玻片的片子用生理鹽水浸洗數次,徹底洗去蛋白液。2.純丙酮固定5-10分鐘。3.PBS浸洗3次,每次1分鐘。4.加入選用的第一抗體孵育真空負壓處理15分鐘。5.PBS洗3次,每次2分鐘。6.加入熒光抗體孵育真空負壓處理

    免疫組化實驗中常用染色方法

    根據標記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標法,親和組織化學法,后者是以一種物質對某種組織成分具有高度親合力為基礎的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法最常用。

    免疫組化抗體選擇要點及流式抗體選擇常識

    一抗的選擇要點1.選擇單克隆還是多克隆抗體?由一種B細胞產生的單一特異性抗體叫做單克隆抗體,單克隆抗體能目標明確地與單一特異抗原決定簇結合,就像導彈精確地命中目標一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種B細胞產生抗體,形成抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應中,一般單克隆

    雙重染色抗體的選擇

    用未偶聯一抗進行細胞培養物或組織切片的雙重免疫染色要求一抗來源于不同物種并且二抗分別識別其中之一,二抗說明書應描述其與其它物種來源的免疫球蛋有否有交叉吸附。

    常用免疫組化方法

    目前幾種常用免疫組化方法簡單介紹1)免疫熒光方法是最早建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理,先將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后即會發出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進而還可

    免疫組化中抗體選擇要求

    1、一抗選擇要點 (1)選擇單克隆還是多克隆抗體。由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體,單克隆抗體能目標明確地與單一特異抗原決定簇結合,就象導彈精確地命中目標一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種克隆產生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應中,

    免疫組化中抗體選擇要求

      免疫組化中抗體選擇要求   1、一抗選擇要點   (1)選擇單克隆還是多克隆抗體。由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體,單克隆抗體能目標明確地與單一特異抗原決定簇結合,就象導彈精確地命中目標一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種克隆產生抗體,形成好幾種單克隆抗

    免疫組化中抗體選擇要求

      免疫組化中抗體選擇要求   1、一抗選擇要點   (1)選擇單克隆還是多克隆抗體。由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體,單克隆抗體能目標明確地與單一特異抗原決定簇結合,就象導彈精確地命中目標一樣。另一方面,即使是同一個抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種克隆產生抗體,形成好幾種單克隆抗

    酶標記抗體免疫組化染色知識點

      (一)直接法:將酶直接標記在特異性抗體上,與組織細胞內相應的抗原進行特異性反應,形成抗原-抗體-酶復合物,最后用酶底物顯色。直接法的優點在于操作簡便及特異性強,缺點是敏感性低,制備的抗體種類有限。  (二)間接法:將酶標記在第二抗體上,先將第一抗體(特異性抗體)與相應的組織抗原結合,形成抗原抗體

    免疫組化實驗中常用的抗體是什么?

    免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體,單克隆抗體是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體,應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細胞克隆所產生的抗體混合物。

    石蠟切片免疫組化染色方法

    1、載玻片的處理:抗原修復過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。為保證試驗的正常進行,可選用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等幾種試劑,對已清洗的載玻片進行處理。具體方法如下:1.1

    免疫組化染色方法大匯總

    免疫組化的方法很多,新方法層出不窮,如二步法,要不斷更新,與時俱進。雖然這些方法各有其特色,但總的來說,只要應用恰當均可獲得較為滿意的結果。方法的選擇并不是影響免疫組化結果的主要因素。問題在于一個單位應常規地、固定地使用一種方法,不宜交替使用不同的方法或經常更換方法。一旦選定一種方法,應務必使其標準

    常用的免疫組化技術方法

    根據生物技術實驗總結我們知道,免疫組化技術就是用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究,其又稱之為免疫細胞化學技術。下面簡單介紹幾種常用的免疫組化技術方法,希望能夠加深大家對免疫組化技術的了解。目前常用的幾種免疫組化技術www.biovo

    常用的涂片染色方法

    (1)巴氏染色法:本法染色特點是細胞具有多色性顏色,色彩鮮艷多彩。涂片染色的透明性好,胞質顆粒分明,胞核結構清晰,如鱗狀上皮過度角化細胞胞質呈橘黃色;角化細胞顯粉紅色;而角化前細胞顯淺綠色或淺藍色,適用于上皮細胞染色或觀察陰道涂片中激素水平對上皮細胞的影響。此方法的缺點是染色程序比較復雜。(2)蘇木

    常用染色方法有哪些?

      根據標記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標法,親和組織化學法,后者是以一種物質對某種組織成分具有高度親合力為基礎的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位,其中生物素——抗生物素染色法最常用。

    細菌染色標本檢查常用的染色方法

      細菌染色標本檢查常用的染色方法是檢驗主管技師考試輔導的部分內容,以下是醫學教育網對這塊內容的整理,希望對考生有所幫助:  細菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→染色(初染→媒染→脫色→復染)。  1.單染色法:用一種染料將細菌和周圍物體染成同一種顏色。細菌經單染色法處理后,可觀察其形態、排列、

    細菌染色標本檢查常用的染色方法

      細菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→染色(初染→媒染→脫色→復染)。  1.單染色法:用一種染料將細菌和周圍物體染成同一種顏色。細菌經單染色法處理后,可觀察其形態、排列、大小及簡單的結構,但不能顯示各種細菌染色性的差異。  2.復染色法:用兩種或兩種以上的染料染色的方法,稱為復染色法或鑒別染

    免疫組化非特異性染色及控制方法

    一、非特異性染色的識別常出現在組織邊緣、膠原纖維及血漿滲出處,壞死組織及固定不良的組織中心處。表現為彌漫性,均勻性的背景染色。也可以是隨機分布的陽性反應產物點、團或塊狀。二、非特異性染色的原因1. Ig與Fc受體結合多見于冰凍切片(特別是淋巴造血組織,淋巴細胞,單核細胞,組織細胞表面多),主要是和二

    如何選擇實驗抗體(一抗的選擇原理及方法)?

    檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,在同一個抗體公司,可能會有好幾種,甚至好幾十種;在不同的抗體公司,那就更多了。那怎樣在琳瑯滿目的抗體中,選擇自己實驗需要的抗體呢?主要考慮如下幾種因素:分析自己實驗應用的實驗方法是哪種?分析自己實驗中標本的種屬是哪種動物或人的?分析樣本中的蛋白質的結構性質

    常用的免疫組化技術方法介紹

       根據生物技術實驗總結我們知道,免疫組化技術就是用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究,其又稱之為免疫細胞化學技術。下面簡單介紹幾種常用的免疫組化技術方法,希望能夠加深大家對免疫組化技術的了解。    目前常用的幾種免疫組化技術w

    免疫組化的概念和常用方法

    概念和常用方法介紹1、定義用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究,這種技術稱為免疫組織化學(immunohistochemistry)技術或免疫細胞化學(immunocytochemistry)技術。2、原理根據抗原抗體反應和化學顯色原

    常用HE染色試劑配制方法

    ?蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining) ,簡稱HE染色法,石蠟切片技術里常用的染色法之一。  一、蘇木素  (1) Harris蘇木素液  配方: labdd.com  蘇木精1 g ;無水乙醇10 ml;蒸餾水200 ml;鉀明礬20g;HgO 0.5 g  

    常用HE染色試劑配制方法

    蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosinstaining),簡稱HE染色法,石蠟切片技術里常用的染色法之一。 一、蘇木素 (1)Harris蘇木素液 配方:labdd.com 蘇木精1g;無水乙醇10ml;蒸餾水200ml;鉀明礬20g;HgO0.5g 先將蘇木精溶于無水乙醇中,備

    血細胞常用的染色方法

    血細胞常用的染色方法是檢驗技師需要了解的知識,醫學教育網搜索整理如下: 細胞涂片,在用普通光學顯微鏡觀察之前需要固定和染色。固定是將細胞蛋白質和多糖等成分迅速交聯凝固,以保持其原有結構不發生變化。染色的目的是使細胞的主要結構,如細胞質、細胞核、細胞器等染上不同的顏色,便于顯微鏡下觀察。各種細胞涂片

    微生物常用染色法及染色程序

    微生物染色的基本原理,是借助物理因素和化學因素的作用而進行的。物理因素如細胞及細胞物質對染料的毛細現象、滲透、吸附作用等。化學因素則是根據細胞物質和染料的不同性質而發生地各種化學反應。酸性物質對于堿性染料較易吸附,且吸附作用穩固;同樣,堿性物質對酸性染料較易于吸附。如酸性物質細胞核對于堿性染料就有化

    免疫組化染色步驟

    石蠟切片免疫組化染色步驟1、載玻片的處理:??? 抗原修復過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。為保證試驗的正常進行,可選用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine 等幾種試劑,對已清洗的載玻

    細菌染色標本檢查常用的染色方法是什么

      細菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→染色(初染→媒染→脫色→復染)。  1.單染色法:用一種染料將細菌和周圍物體染成同一種顏色。細菌經單染色法處理后,可觀察其形態、排列、大小及簡單的結構,但不能顯示各種細菌染色性的差異。  2.復染色法:用兩種或兩種以上的染料染色的方法,稱為復染色法或鑒別染

    解析免疫組化染色出現無色片的原因及解決方法

    良好的免疫組化染色切片是正確判斷染色結果的基礎和前提。由于免疫組化染色過程中存在很多步驟或環節,每一個步驟或環節都可能影響到染色的最終結果,因此,要做好一張高質量的免疫組化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技術員和病理醫生密切配合、相互協調、共同努力才能保證做出合格的免疫組化切片。雖然免疫組化染色

    脫落細胞標本制作常用染色方法

    1.HE染色 此法染色效果也好,只是胞質色彩不豐富,不能用于觀察陰道涂片對雌激素水平測定。優點是操作簡易,試劑易配制。2.巴氏染色 此法染色特點是細胞具有多色性,色彩豐富鮮艷,胞內結構清晰,染色效果好,是細胞病理學檢查常用的方法,尤其是觀察女性雌激素水平對陰道上皮細胞的影響。此法的缺點是操作程序復雜

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