可被單一限制酶切割用作克隆載體的λ噬菌體DNA的制備...
實驗方法原理 在某些情況下，制備好的 λ 噬菌體 DNA 經限制酶的簡單消化即可用于克隆。但只有當所用載體能用遺傳學方法篩選含有外源 DNA 序列的重組噬菌體時（如 EMBL 系列、λ2001、λDASH、λZAP、λgt10），這種方案才是可行的。因為在這種情況下，不必采取步驟來減少非重組噬菌體的形成。實驗材料 噬菌體 T4 DNA 連接酶帶有合適緩沖液的限制性內切核酸酶試劑、試劑盒 ATP氯仿EDTA乙醇酚：氯仿乙酸鈉焦糖凝膠上樣緩沖液儀器、耗材 瓊脂糖凝膠實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液ATP ( 10 mmol/L )氯仿EDTA ( 0.5 mol/L，pH 8.0)乙醇酚：氯仿（1:1，V/V)乙酸鈉（3 mol/L，pH 7.0）（使用 pH 7.0 而不是常用的 pH 5.2 的乙酸鈉非常重要。因為對在消化后用來除去緩沖液中二價陽離子的 EDTA 來說，在 pH 5.2 且濃度超過 5~10 mmol......閱讀全文
反義RNA的制備實驗
RNA 也可以由線狀 DNA 為模板，通過 RNA 聚合酶（如T3、T7 或 SP6 ) 在體外合成。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編：鄭曉飛。實驗材料限制性內切核酸酶酶水解模板 DNA大腸桿菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ試劑、試劑盒氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液轉錄緩沖液Tris-Cl鹽
磷酸酶制備實驗
蛋白絲/蘇氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A) 膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP） ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
制備肌動蛋白實驗
實驗材料 肌球蛋白試劑、試劑盒 肌球蛋白抽提溶液儀器、耗材 離心機實驗步驟 1. 抽提肌球蛋白時得到的沉淀物用 3 倍于沉淀物體積的肌球蛋白抽提溶液抽提 10 分鐘。肌球蛋白抽提溶液：0.5 mol/L KCl0.1 mol/L K2HPO42. 抽提物離心（GSA 轉頭，13000 r/min，1
磷酸酶制備實驗
蛋白絲/蘇氨酸磷酸酶,1型和2A型(PP-1和PP-2A)膜蛋白酪氨酸磷酸酶（PTP）實驗材料細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒緩沖鹽清洗液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
轉基因小鼠制備實驗
1、 選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。?2、 47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合籠；另取數只適齡母鼠（2月齡以上）作為受體，陰道口潮紅，與結扎公鼠合籠。?3、第二天上午9:00前觀察供體、受
轉基因小鼠制備實驗
轉基因小鼠制備實驗可應用于：（1）動物發育研究；（2）研究細胞功能調控機制。實驗方法原理遺傳的基本物質是DNA，基因是位于染色體上有遺傳效應的DNA片段，對于儲存在生物全套染色體中的全部遺傳信息，可稱其為基因組。不同種類、不同個體的生物基因組成是不同的，對動物個體來說，非自身的基因成分屬于外源基因，
轉基因小鼠制備實驗
實驗步驟 1. 選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2. 47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合籠；另取數只適齡母鼠（2月齡以上）作為受體，陰道口潮紅，與結扎公鼠合籠。3. 第二天上午9:00前觀察
poly（A）+－RNA的制備實驗
利用cND A微陣列技術可用于：（1）并行分析檢測成千上萬個基因的表達情況；（2）在新基因的發現、基因組功能的研究、疾病的預測和診斷、藥物靶標的確定和藥物毒性預測等多方面發揮著重要的作用。實驗方法原理大多數的信使RNA（mRNA）都帶有poly（A）尾，而結構RNA沒有。使用本工作方案，可以將帶po
反義RNA的制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 限制性內切核酸酶酶水解 模板 DNA 大腸桿菌 DNA 多聚酶 胰 DNaseⅠ 試劑、試劑盒
反義RNA的制備實驗
實驗材料 限制性內切核酸酶酶水解模板 DNA大腸桿菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ試劑、試劑盒 氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液轉錄緩沖液Tris-Cl鹽酸亞精胺NaCl胎盤RNase抑制物牛血清白蛋白RNA聚合酶DEPC儀器、耗材 DNA合成儀瓊脂糖凝膠電泳微量離心管實驗步驟 一、化學合成的 RN
血涂片的制備實驗
實驗材料血液試劑、試劑盒消毒酒精瑞特染色液蒸餾水儀器、耗材載玻片蓋玻片脫脂棉刺血針油鏡用油顯微鏡實驗步驟一、血涂片的制備按以下各步驟進行操作。（一）采血采血之前先揉搓需要采血的部位，如耳垂或手指尖，使血流旺盛。用酒精消毒皮膚，待干。以左手拇指及食指夾持局部，再用消毒過的刺血針刺之，血液自然流出。如血
poly（A）+－RNA的制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大多數的信使RNA（mRNA）都帶有poly（A）尾，而結構RNA沒有。使用本工作方案，可以將帶poly（A）的RNA從rRNA和tRNA中分離出來。 實驗材料
腺苷的實驗制備方法
1、對照品溶液的制備精密稱取腺苷對照品適量，加甲醇配制成1mL含40μg的對照品溶液。2、供試品溶液的制備取供試品20mL置100mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻超聲處理5分鐘，放置待沉淀完全，濾過，取許濾液50mL蒸干，殘渣加水20mL溶解，以水飽和的正丁醇提取4次，合并正丁醇提取液蒸干，殘渣加50
制備肌動蛋白實驗
從肌肉制備丙酮粉用于純化肌動蛋白 由骨骼肌丙酮粉制備肌動蛋白 將肌動蛋白純化成純品 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 肌球蛋白
營養瓊脂平板制備實驗
實驗方法原理用于純化菌種，保存菌種。實驗步驟成分：蛋白胨：????????????????? 10 g牛肉膏：????????????????? 5 g氯化鈉：????????????????? 5 g瓊脂：??????????????????? 20 g蒸餾水：?????????????????
poly（A）+－RNA的制備實驗
實驗材料 RNA試劑、試劑盒 NaOH寡聚脫氧胸苷纖維素poly（A）樣品緩沖液LiClEDTATE乙酸鈉儀器、耗材 離心機分光光度計搖床實驗步驟 1. ?先用10 ml 5 mol/l NaOH清洗硅化的層析柱，然后用水沖洗。2. ?取0.5 g oligo（dT）纖維素干粉加1 ml 0.1 m
制備電泳實驗——連續電泳
儀器、耗材聚丙烯酰胺凝膠電泳瓊脂糖電泳實驗步驟1. 連續洗脫電泳使用連續洗脫的聚丙烯酰胺凝膠電泳或瓊脂糖電泳能制備微克到毫克級的多肽，蛋白或核酸。裝置可以是各種各樣的。有的是把樣品直接加在固體凝膠的表面，分子經過電泳分離后，由流動的緩沖液洗脫，純化后的分子被濃縮，并由蠕動泵和部分收集器收集。2. 連
血涂片的制備實驗
實驗材料 血液試劑、試劑盒 消毒酒精瑞特染色液蒸餾水儀器、耗材 載玻片蓋玻片脫脂棉刺血針油鏡用油顯微鏡實驗步驟 一、血涂片的制備按以下各步驟進行操作。（一）采血采血之前先揉搓需要采血的部位，如耳垂或手指尖，使血流旺盛。用酒精消毒皮膚，待干。以左手拇指及食指夾持局部，再用消毒過的刺血針刺之，血液自然流
PAGE膠制備方法實驗
實驗試劑1. 5x樣品緩沖液（10ml）:0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH6.8),5ml 50％甘油，2ml 10％的SDS，0.5ml巰基乙醇，1ml 1％溴酚藍，0.9ml蒸餾水。可在4℃保存數周，或在－20℃保存數月。2. 凝膠貯液：在通風櫥中，稱取丙烯酰胺30g，甲叉雙丙烯
磷酸酶制備實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 緩沖鹽清洗液抽提緩沖液實驗步驟 一、組織/細胞制備和提取1. 配制下列溶液：(1) 緩沖鹽清洗液：20 mmol/L 的 MOPS 緩沖液，pH 7.5（配成 100 ml）5 mmol/L 的 EDTA5 mmol/L 的 EGTA120 mmol/L 的 NaCl(2
金相試樣的制備實驗
一、實驗目的 1. 學會金相試樣的制備方法。 2. 熟悉常用化學浸蝕試劑及其使用方法。 二、實驗內容 按照金相試樣的制備方法，每人制備出碳鋼金相試樣一塊，用金相顯微鏡觀察自己制備的試樣，要求試樣在顯微鏡下觀察應沒有磨痕、組織清晰。 三、實驗原理 要對金屬材料的顯微組織進行觀察，首先就
營養瓊脂平板制備實驗
實驗方法原理用于純化菌種，保存菌種。實驗步驟成分：蛋白胨：????????????????? 10 g牛肉膏：????????????????? 5 g氯化鈉：????????????????? 5 g瓊脂：??????????????????? 20 g蒸餾水：?????????????????
酪蛋白的制備實驗
等電點沉淀法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 牛乳中主要的蛋白質是酪蛋白，含量約為35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物，等電點為4.7。利用等電點時溶解度最低的原理，將牛
質粒DNA的小量制備實驗——煮沸小量制備法
實驗方法原理當菌體在NaOH和?SDS溶液中裂解時，蛋白質與DNA發生變性，當加入中和液后，質粒DNA分子能夠迅速復性，呈溶解狀態，離心時留在上清中；蛋白質與染色體DNA不變性而呈絮狀，離心時可沉淀下來。推薦采用本方案從1-24個菌落培養液中制備少量的質粒DNA，盡管該方案十分快捷，但制備的DNA的
細菌中制備基因組DNA實驗——小量制備
真核生物的一切有核細胞（包括培養細胞）都能用來制備基因組 DNA。真核生物的DNA是以染色體的形式存在于細胞核內，因此，制備DNA的原則是既要將DNA與蛋白質、脂類和糖類等分離，又要保持DNA分子的完整。實驗方法原理提取DNA的一般過程是將分散好的組織細胞在含SDS（十二烷基硫酸鈉）和蛋白酶K的溶液
動物實驗技術：轉基因小鼠制備實驗
1、 選取7~8周齡雌性小鼠，陰道口封閉，作為供體，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2、 47~48小時后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并與正常公鼠合籠；另取數只適齡母鼠（2月齡以上）作為受體，陰道口潮紅，與結扎公鼠合籠。3、第二天上午9:00前觀察供體、受體，
SDS堿裂解法制備質粒DNA：大量制備實驗
用堿和SDS處理可以從大規模（500ml）的細菌培養物中分離質粒DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化實驗方法原理用堿和SDS處理可以從大規模（500ml）的細菌培養物中分離質粒DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化實驗步驟材料：緩
質粒DNA的小量制備實驗——堿裂解小量制備法
實驗采用國產的質粒小量抽提試劑盒。它是一種新型的離子交換柱，在特定的條件下，使質粒能在離心過柱的瞬間，結合到質粒純化柱上，在一定條件下又能將質粒充分洗脫，從而實現質粒的快速純化。實驗材料DNA試劑、試劑盒葡萄糖TrisEDTATENaOHSDS乙酸甲乙醇儀器、耗材離心機漩渦混合器分光光度計實驗步驟1
轉運反應成分的制備實驗——胞質液的制備
實驗材料血試劑、試劑盒酸-檸檬酸鹽-葡萄糖溶液裂解緩沖液儀器、耗材離心機實驗步驟一、網狀細胞和紅細胞胞質液的制備1. 自動物身上采血，每 7 ml 血加 1 ml 酸-檸檬酸鹽-葡萄糖溶液（ACD；75 mmol/L 檸檬酸三鈉，38 mmol/L 檸檬酸，136 mmol/L 葡萄糖，pH 5.0
SDS堿裂解法制備質粒DNA：大量制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用堿和SDS處理可以從大規模（500ml）的細菌培養物中分離質粒DNA，所獲得的質粒則可通過柱層析或CsCl-溴化乙錠梯度離心進一步純化 實驗步驟