甲基化特異性PCR
實驗方法原理 MSP是一種簡便、特異的、敏感的檢測單基因甲基化的方式。其基本原理是用亞硫酸氫鈉處理基因 組DNA,未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變,然后用3對特異性的引物對所測基因的同一核苷酸序列進行擴增。擴增產物用DNA瓊脂糖凝膠電泳,凝膠掃描觀察分析結果。實驗材料 DNA試劑、試劑盒 亞硫酸氫鈉氫醌石蠟油乙醇儀器、耗材 水浴鍋PCR儀實驗步驟 1. 在50 μl 體系中,DNA(2~5 μg)經NaOH(終濃度值0.2 mol/L)在37℃變性10 Min。2. 對于ng級別的人基因組DNA,在進行修飾前加入2μg蛙魚精DNA為載體。3. 加入30 μl 剛配制好的10 mmo/L 氫醌與520/1的40.5%亞硫酸氫鈉混勻。4. 然后用石蠟油隔絕空氣的條件下,避光在50%溫育16 h。5. 修飾后的DNA過WizerdDNA純化柱,用50/......閱讀全文
甲基化特異性PCR
亞硫酸氫鈉法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 MSP是一種簡便、特異的、敏感的檢測單基因甲基化的方式。其基本原理是用亞硫酸氫鈉處理基因 組DNA,未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶
甲基化特異性PCR
實驗方法原理 MSP是一種簡便、特異的、敏感的檢測單基因甲基化的方式。其基本原理是用亞硫酸氫鈉處理基因 組DNA,未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變,然后用3對特異性的引物對所測基因的同一核苷酸序列進行擴增。擴增產物用DNA瓊脂糖凝膠電泳,凝膠掃描觀察分析結果。實驗材料 DNA
甲基化特異性的PCR
用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,所有未發生甲基化的胞嘧啶被轉化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變;隨后設計針對甲基化和非甲基化序列的引物進行PCR。通過電泳檢測MSP擴增產物,如果用針對處理后甲基化DNA鏈的引物能得到擴增片段,則說明該位點存在甲基化;反之,說明被檢測的位點不存在甲基化。
甲基化特異性 PCR 實驗
實驗材料 樣本 DNA試劑、試劑盒 NaOH對苯二酚重亞硫酸鈉礦物油DNA Wizard cleanup kit (Promega) 或等同物異丙醇 糖苷配糖基乙酸胺乙醇10 X PCR 擴增緩沖液4dNTP 混合物Taq DNA 聚合酶儀器、耗材 水浴設備Vacuum manifold帶控制管溫度
MSP(甲基化特異性PCR)介紹
甲基化特異性?PCR(Methylmion Specific PCR,MSP)及其改進方法是檢測基因甲基化的經典方法.MSP法的原理是首先用亞硫酸氫鈉修飾處理基因組DNA,所有未發生甲基化的胞嘧啶都被轉化為 尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶則不變。然后設計針對甲基化和非甲基化序列的引物并進行聚合酶鏈反應(P
甲基化特異性 PCR 確定 DNA 甲基化的模式
用 PCR 來分析 DNA 甲基化的方法可以運用于:(1)對基因組中任何位置的 CpG 甲基化的分析;(2)檢測腫瘤患者的基因改變以及介人被印的基因的固定遺傳障礙的研究。實驗方法原理DNA甲基化(DNA methylation)是最早發現的修飾途徑之一,大量研究表明,DNA甲基化能引起染色質結構、D
甲基化特異性PCR——亞硫酸氫鈉法
甲基化特異性PCR主要用于特意位點甲基化的檢測。實驗方法原理MSP是一種簡便、特異的、敏感的檢測單基因甲基化的方式。其基本原理是用亞硫酸氫鈉處理基因 組DNA,未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變,然后用3對特異性的引物對所測基因的同一核苷酸序列進行擴增。擴增產物用DNA瓊脂糖凝膠電泳,
基本方案2 確定甲基化特異性 PCR 產物中 CpG 位點的甲基化
實驗材料甲基化特異性PCR (MSP) 產物試劑、試劑盒適合的限制性內切核酸酶和緩沖液牛血清白蛋白糖苷配糖基1 X 甲酰胺上樣緩沖液乙醇實驗步驟1.在 1.5 ml 管中加入 10ul MSP 產物。加入 15ul 10 X 限制性內切核酸酶和緩沖液,需要的話加 BSA,加水至 150ul。加入 1
基因甲基化特異性PCR擴增(MSP)試劑盒使用說明
基因甲基化特異性PCR擴增(MSP)試劑盒產品說明書(中文版) 主要用途 基因甲基化特異性PCR擴增(MSP)試劑盒是一種旨在通過設計符合胞嘧啶轉化的特殊引物,對轉化基因組的CpG島區域進行PCR擴增,探測基因甲基化信息的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。可以
基因甲基化特異性PCR擴增(MSP)試劑盒使用說明
主要用途基因甲基化特異性PCR擴增(MSP)試劑盒是一種旨在通過設計符合胞嘧啶轉化的特殊引物,對轉化基因組的CpG島區域進行PCR擴增,探測基因甲基化信息的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。可以被用于父母印記、X染色體研究、腫瘤抑制基因等表觀遺傳學研究。產品即到即用,性能穩定