制備電泳實驗
實驗方法原理 嚴格來說洗脫不能達到制備的目的,它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品通過某種電泳方法進一步分離純化后,再用擴散洗脫或電泳洗脫收集純樣品,繼而用作其他分析的需要。實驗材料 凝膠切片儀器、耗材 解剖刀勻漿器實驗步驟 1. 擴散洗脫擴散洗脫是用解剖刀或勻漿器將凝膠切片搗碎,以增加凝膠的表面積,然后用大約 3 倍體積的合適的緩沖液浸泡。如果蛋白對溫度不敏感,則可在 37℃ 或更高溫度下保溫,以改善洗脫的效果。對大體積的緩沖液雖然能得到良好的產率,但洗脫后樣品稀釋倍數太大,難以回收。洗脫后的凝膠碎片可簡單地用離心方法除去。2. 電泳洗脫電泳洗脫通常是用一定的裝置從某種電泳分離后的凝膠中電泳洗脫蛋白質,并分別移入小室中再收集。不管是擴散洗脫還是電泳洗脫,電極緩沖液和洗脫緩沖液的 pH,離子強度,凝膠的濃度和厚度,電壓梯度,收集物質的量,洗脫緩沖液的體積和操作溫度都影響洗脫效果。......閱讀全文
制備電泳實驗
實驗方法原理 嚴格來說洗脫不能達到制備的目的,它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品通過某種電泳方法進一步分離純化后,再用擴散洗脫或電泳洗脫收集純樣品,繼而用作其他分析的需要。實驗材料 凝膠切片儀器、耗材 解剖刀勻漿器實驗步驟 1. 擴散洗脫擴散洗脫是用解剖刀或勻漿器將凝膠切片搗
制備電泳實驗
洗脫 連續電泳 等電聚焦制備電泳 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 嚴格來說洗脫不能達到制備的目的,它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品
制備電泳實驗——連續電泳
儀器、耗材聚丙烯酰胺凝膠電泳瓊脂糖電泳實驗步驟1. 連續洗脫電泳使用連續洗脫的聚丙烯酰胺凝膠電泳或瓊脂糖電泳能制備微克到毫克級的多肽,蛋白或核酸。裝置可以是各種各樣的。有的是把樣品直接加在固體凝膠的表面,分子經過電泳分離后,由流動的緩沖液洗脫,純化后的分子被濃縮,并由蠕動泵和部分收集器收集。2. 連
制備電泳實驗——等電聚焦制備電泳
實驗方法原理等電聚焦制備電泳是一種非變性制備技術。由于等電聚焦電泳技術的特點,因而是一種理想的制備方法。試劑、試劑盒電極液兩性電解質Ultrodex實驗步驟一、液體介質垂直柱狀蔗糖密度梯度等電聚焦是原瑞典 LKB 公司早期用于制備和分析目的的等電聚焦方法。載體兩性電解質在蔗糖密度梯度柱中形成 pH
制備電泳實驗——洗脫
蛋白質的分離純化是研究其結構、特性和功能的基礎,諸如一級結構、溶液構象、晶體結構、免疫功能和生物機理等研究都必須用一定量并具有活性的純樣品作為研究材料。本實驗來源「蛋白質電泳實驗技術」主編:郭堯君。實驗方法原理嚴格來說洗脫不能達到制備的目的,它只能得到微克到毫克級的樣品。通常是用其他方法分離的粗樣品
微量制備毛細管電泳實驗
多次分離 單次分離 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料
微量制備毛細管電泳實驗
實驗方法原理 實驗材料 多肽:ACTH 4-10試劑、試劑盒 血管緊縮素I和血管緊縮素II 0.05 mmol/L 和 0.25 mmol/L 磷酸鈉緩沖液(pH 2.30 存儲于 4℃)0.1 mol/L 氫氧化鈉儀器、耗材 75 μm 內徑的融合硅毛細管柱CE 儀器錐形微量瓶實驗步驟 1. 低壓
微量制備毛細管電泳實驗——多次分離
實驗材料多肽:ACTH 4-10試劑、試劑盒血管緊縮素I和血管緊縮素II0.05 mmol/L 和 0.25 mmol/L 磷酸鈉緩沖液(pH 2.30 存儲于 4℃)0.1 mol/L 氫氧化鈉儀器、耗材75 μm 內徑的融合硅毛細管柱CE 儀器錐形微量瓶實驗步驟1. 低壓下(0.5 lb/in2
微量制備毛細管電泳實驗——單次分離
實驗材料多肽:ACTH 4-10試劑、試劑盒4:1(V/V)0.5 mol/L 磷酸鈉緩沖液(pH 2.50)/乙烯乙二醇0.1 mol/L 氫氧化鈉儀器、耗材150 μm 內徑的融合硅毛細管柱CE 儀器錐形微量瓶實驗步驟1. 制備多肽混合物和預處理柱子(見多次分離步驟 1 和 2)。2. 在 0.
用制備凝膠電泳純化寡核苷酸實驗
試劑、試劑盒丙烯酰胺雙丙烯酰胺尿素過硫酸銨NNN'N'-四甲基乙二胺合成的互補寡核苷酸仲丁醇(2-丁醇)二乙醚NaOAcMgCl2乙醇TBE甲酰胺加樣緩沖液TE儀器、耗材SpeedVac 旋轉濃縮儀實驗步驟材料與設備丙烯酰胺雙丙烯酰胺尿素過硫酸銨(10%;w/v)N,N,N'