組織的分離實驗
試劑、試劑盒 Hanks儀器、耗材 鑷子網篩碟皿吸管注射器培養瓶實驗步驟 一、切割分離法在進行組織塊培養時，可采用剪切法，一般多剪切成1 mm3大小的塊。具體操作如下：1. 無菌切取1 cm3組織一塊，置入青霉素瓶或小燒杯中，左手斜持容器，右手持眼科尖剪或彎剪（剪柄較長為好）伸入容器中，反復剪切組織至1 mm3大小為止（成糊狀）。2. 用吸管吸取Hanks液把附著在剪刀上的組織小塊沖下，并再補加3~5 毫升Hanks液后，用吸管反復輕輕吸吹沖打片刻，低速離心、去上清、余下組織塊即可用于培養。3. 剪刀剪切法可能對組織有一定損傷，但操作比較方便。亦可用手術刀反復切割法，把組織塊放在凹窩玻璃中，兩手各持尖手術刀一把，交錯反復切害割至1 mm3為止。手術刀切割法對組織損傷較小，但在空氣中暴露時間較長，污染機會大些。以上兩方法都適用于組織塊培養法。二、機械分散法某些軟組織如腦、胚胎以及一些腫瘤組織等，......閱讀全文
組織的分離實驗
試劑、試劑盒 Hanks儀器、耗材 鑷子網篩碟皿吸管注射器培養瓶實驗步驟 一、切割分離法在進行組織塊培養時，可采用剪切法，一般多剪切成1 mm3大小的塊。具體操作如下：1. ?無菌切取1 cm3組織一塊，置入青霉素瓶或小燒杯中，左手斜持容器，右手持眼科尖剪或彎剪（剪柄較長為好）伸入容器中，反復剪切組
組織的分離實驗
機械分散法 胰蛋白酶消化消化分離法 膠原酶消化分離法 離心分離法 EDTA 消化分離法 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒
從豌豆組織分離葉綠體實驗_葉綠體分離
實驗材料葉子組織試劑、試劑盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA儀器、耗材聚碳酸酯離心管實驗步驟1. 制備 Percoll 梯度(1) 兩個 50 ml 的聚碳酸酯離心管中分別加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.
從豌豆組織分離葉綠體實驗
葉綠體分離 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 葉子組織 試劑、試劑盒
從豌豆組織分離葉綠體實驗
葉綠體分離實驗材料葉子組織 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒PBF-Percoll 溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
線粒體分離實驗—從組織中分離線粒體
實驗材料肝臟試劑、試劑盒MS儀器、耗材勻漿器實驗步驟1. 取出肝臟，注意不要弄破膽囊。放進一置于冰上的燒杯中，剪去任何結締組織。稱其質量后放回燒杯中。用鋒利的剪刀、手術刀或剃須刀片將之切成 1~2 mmol/L 的薄片，用勻漿緩沖液（1x MS) 沖洗兩次以去除大部分的血。轉移至勻漿器中。加入足夠的
組織的分離實驗_離心分離法
實驗方法原理如培養物為血液、羊水、腹水和胸水等細胞懸液時，可采用離心法分離。一般用低速500~1000 轉/分速度，離心5~10 分鐘即可。如懸液量大，離心時間可適當延長，但如離心速度過大和時間太長，易壓擠細胞使之受損或死亡。微量全血法淋巴細胞培養時，可不必進行淋巴細胞分離，可采用全血培養法。在需用
組織的分離實驗_EDTA－消化分離法
實驗方法原理EDTA是一種非酶性消化物，常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。關于EDTA的作用機制一般認為是：一些組織，尤其是上皮組織，在生存中需要Ca2+和Mg2+才能維持組織的完整性。EDTA能從這些組織生存環境中吸收這些離子，形成螯合物，能促進細胞相互分離。EDTA 作
組織的分離實驗_機械分散法
試劑、試劑盒Hanks儀器、耗材鑷子網篩碟皿吸管注射器培養瓶實驗步驟一、切割分離法在進行組織塊培養時，可采用剪切法，一般多剪切成1 mm3大小的塊。具體操作如下：1. ?無菌切取1 cm3組織一塊，置入青霉素瓶或小燒杯中，左手斜持容器，右手持眼科尖剪或彎剪（剪柄較長為好）伸入容器中，反復剪切組織至1
分離核仁實驗—從人肝臟或胎盤組織中分離核仁
實驗材料組織試劑、試劑盒NKM儀器、耗材粗孔濾紙Teflon-玻璃勻漿器實驗步驟1. 準備溶液：NKM：0.13 mol/L NaCl，5 mmol/L KCl，8 mmol/L 乙酸鎂2.2 mol/L 蔗糖，10 mmol/L MgCl20.88 mol/L 蔗糖0.34 mol/L 蔗糖，含
線粒體分離實驗—從組織培養細胞中分離線粒體
實驗材料細胞試劑、試劑盒RSBMS 緩沖液儀器、耗材Dounce 勻漿器實驗步驟1. 用 11 ml 冰上預冷過的 RSB 重新懸浮細胞，轉移到一個 15 ml 的 Dounce 勻漿器中RSB（使組織培養細胞膨脹的低滲緩沖液）10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol
組織的分離實驗_膠原酶消化分離法
實驗方法原理膠原酶是一種由細菌中提取出的酶，對膠原有很強的消化作用，適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織等。上皮細胞本身對膠原酶有一定耐性，但膠原酶對細胞間質有好的消化作用，可使上皮細胞與膠原成分脫離而不受傷害，效果甚好。此酶在鈣和鎂離子存在情況下仍有活性，故可用BSS和含有血清的培養液配制。實驗
中間絲的分離方法實驗——從組織中分離中間絲
實驗材料牛舌試劑、試劑盒解聚緩沖液組裝緩沖液勻漿緩沖液抽提緩沖液柱緩沖液PEM 緩沖液儀器、耗材離心機實驗步驟一、從牛舌上皮分離角蛋白中間絲1. 從當地屠宰場拿到新鮮牛舌。一條舌頭通常可以產出幾十毫克純化了的角蛋白中間絲。2. 用刀片切刮，把舌中的肌肉和黏膜分開。舌黏膜片（大約 1cmx1 cm )
組織的分離實驗_胰蛋白酶消化消化分離法
實驗方法原理胰蛋白酶適于消化細胞間質較小的軟組織，如胚胎組織、羊膜、上皮組織、肝、腎等軟組織，對傳代細胞也非常好。用于消化纖維性組織或較硬的癌組織則較差。Ca2+和Mg2+對胰蛋白酶的活性有一定抑制作用，故需用不含這些離子的BSS 配制。血清有抑制胰蛋白酶活性的作用，因此在做細胞傳代時，用胰蛋白酶消
牙髓組織的分離
試劑和材料：1.?無鎂和鈣的PBS平衡鹽溶液（PBSA）；2.?MSC培養基：含2mmol/L 谷氨酰胺的α-MEM，添加15%胎牛血清，0.1mmol/L左旋抗壞血酸磷酸鹽，100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素；3.?培養皿；4.?精細鑷（小號和大號）；5.?牙科碳化鉆頭；6.?牙挖器；7
新鮮組織分離原代細胞
新鮮手術取得或凍存的組織于37 ℃ 快速復溫，原代細胞培養工作液清洗3次，盡量修剪去除纖維組織，將組織塊剪成約1 mm3大小的小塊，彎頭吸管吸取組織塊均勻種植于75 cm2 培養瓶瓶底，瓶內加入少量原代細胞培養工作液，小心翻轉培養瓶使組織塊黏附于瓶底，置于37 ℃、5% CO2培養箱中培養6-8
從組織分離粗制質膜組分的另一實驗方法
從組織分離粗制質膜組分的另一實驗方法 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 勻漿緩沖液
從組織分離粗制質膜組分的另一實驗方法
Neville(1968) 所述的方法對分離鼠肝質膜的效果較好，但對分離其他組織的質膜不一定適用。這里，介紹一種從其他組織制備粗制質膜組分的方法。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南，作者：朱厚礎。試劑、試劑盒勻漿緩沖液儀器、耗材Dounce 氏玻璃勻漿器（15-ml)帶 A 杵實驗步驟設備Doun
純化DNA實驗_從哺乳動物細胞或組織分離DNA
基因純化，可以用于（1）對大量提取的質粒DNA進行純化；（2）常用的方法有柱層析法和氯化銫梯度離心法。實驗材料細胞試劑、試劑盒TBS抽提緩沖液儀器、耗材離心管實驗步驟1. 根據樣品類型，從下列方法中選一個作為步驟 1 進行操作。(1) 細胞樣品① 單層培養的細胞以用冰預冷的 TBS 將單層細胞洗滌
分離核仁實驗——分離核仁
實驗材料肝臟試劑、試劑盒NKM儀器、耗材粗孔濾紙Teflon-玻璃勻漿器實驗步驟1. 制備溶液：NKM：0.13 mol/L NaCl，5 mmol/L KCl，8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖，3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖，10 mmol/L MgCl
牙髓干細胞的分離培養——牙隨組織的分離
實驗材料牙試劑、試劑盒滅菌無Ca2+和Mg2+的PBS(PBSA)MSC培養基消毒液（如聚維酮碘）儀器、耗材非滅菌使用高速牙科鉆時的裝備（如空氣壓縮機）培養皿精細鑷（小號和大號）牙科碳化鉆頭牙挖器高速牙科鉆實驗步驟(a)用PBSA洗三遍，充分清潔牙齒表面。(b)用消毒液消毒，然后再用PBSA充分清洗
分離核仁實驗
實驗材料 肝臟試劑、試劑盒 NKM儀器、耗材 粗孔濾紙Teflon-玻璃勻漿器實驗步驟 1. 制備溶液：NKM：0.13 mol/L NaCl，5 mmol/L KCl，8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖，3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖，10 mmol/L
線粒體分離實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 RSBMS 緩沖液儀器、耗材 Dounce 勻漿器實驗步驟 1. 用 11 ml 冰上預冷過的 RSB 重新懸浮細胞，轉移到一個 15 ml 的 Dounce 勻漿器中RSB（使組織培養細胞膨脹的低滲緩沖液）10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210
分離核仁實驗
分離核仁從人肝臟或胎盤組織中分離核仁HeLa細胞細胞核或核仁的制備高鎂法分離核仁實驗材料肝臟 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒NKM ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
分離核仁實驗
分離核仁 從人肝臟或胎盤組織中分離核仁 HeLa細胞細胞核或核仁的制備 高鎂法分離核仁 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 肝臟
線粒體分離實驗
從組織培養細胞中分離線粒體 從組織中分離線粒體 用蔗糖密度梯度法純化線粒體 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
從植物組織中分離高爾基體
實驗材料新鮮組織試劑、試劑盒勻漿介質儀器、耗材研缽和杵離心機實驗步驟1. 先用剪刀大致剪切葉片或莖桿，然后在少量的介質中用刀片切成碎片。2. 對于 1 g 新鮮組織，在 1 ml 介質中用研缽和杵搗碎使組織勻漿化。勻漿介質：50 mmol/L FiEPES10 mmol/L KCI1 mmol/L
RNA分離與分析實驗_分離RNA
實驗材料標記細胞試劑、試劑盒乙酸緩沖液儀器、耗材漩渦器實驗步驟1. 收獲標記細胞。2. 小心處置上清液，用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸緩沖液懸浮細胞沉淀，每 1 ml 壓積細胞用 10 ml 緩沖液。3. 于室溫用漩渦器振蕩裂解細胞。4. 加等體積的水飽和酚，充分混勻，于 60
人體活檢組織實驗
實驗方法原理 與醫院人員協商，提供已標記的裝有培養基的容器，安排好從手術室或病理醫生處取樣品。儀器、耗材 樣品管實驗步驟 1. 提供含收集培養基的容器，標注明確，送進手術準備室或病理實驗室。2. 做好準備，隨時取材。3. 手術后裝入收集容器，或派人收集后迅速送達，并告知確切的切取時間。4.
神經組織染色實驗
實驗方法原理 神經元細胞核周含有尼氏小體，在一定條件影響下或神經元受到損傷時，尼氏小體可減少或消失。常用 olszwski 法能夠較好地顯示尼氏小體。實驗材料 石蠟組織切片試劑、試劑盒 焦油紫乙酸鈉蒸餾水冰醋酸二甲苯乙醇樹膠實驗步驟 焦油紫染色液：焦油紫 1 g，乙酸鈉 2.2 g，蒸餾水 97 m