單向免疫擴散實驗
實驗方法原理 在含有特異抗體的瓊脂板中打孔，并在孔中加入定量的抗原，當抗原向周圍擴散后與瓊脂中抗體相結合，即形成白色沉淀環，其直徑或面積與抗原濃度呈正相關。同時用標準抗原或國際參考蛋白制成標準曲線，即可用以定量檢測未知標本的抗原濃度(mg/ml 或U/ml)。實驗材料 馬抗人 IgG 血清試劑、試劑盒 離子瓊脂生理鹽水瓊脂 PBS標準參考蛋白儀器、耗材 微量加樣器打孔器濕盒瓊脂板紗布泡沫塑料實驗步驟 一、實驗材料2%離子瓊脂或生理鹽水瓊脂（內含2%NaN3）。標準馬抗人 IgG 血清（抗體）（北京生物制品研究所生產）工作標準參考蛋白（北京生物制品研究所生產）pH7.2 PBS打孔器（孔徑3 mm）及打孔模板微量加樣器濕盒（容器內加濕紗布或泡沫塑料）已制備好的含有 1%馬抗人IgG 抗體的瓊脂板1/50 稀釋的單人份待檢血清標本二、實驗方法1、標準曲線的制備（1）按照玻片的大小，準備制做瓊脂板所需要的1%離子瓊脂。首先分裝其1/2......閱讀全文
單向免疫擴散實驗
實驗方法原理 在含有特異抗體的瓊脂板中打孔，并在孔中加入定量的抗原，當抗原向周圍擴散后與瓊脂中抗體相結合，即形成白色沉淀環，其直徑或面積與抗原濃度呈正相關。同時用標準抗原或國際參考蛋白制成標準曲線，即可用以定量檢測未知標本的抗原濃度(mg/ml 或U/ml)。實驗材料 馬抗人 IgG 血清試劑、試劑
單向免疫擴散的概念
中文名稱單向免疫擴散英文名稱single immunodiffusion定 義將一定量的抗體混于瓊脂凝膠中制成瓊脂板，在適當位置打孔后將抗原加入孔中擴散，抗原在擴散過程中與板中抗體相遇，形成以抗原孔為中心的沉淀環。應用學科免疫學（一級學科），應用免疫（二級學科），免疫學檢測和診斷（三級學科）
單向免疫擴散的概念
中文名稱單向免疫擴散英文名稱single immunodiffusion定 義將一定量的抗體混于瓊脂凝膠中制成瓊脂板，在適當位置打孔后將抗原加入孔中擴散，抗原在擴散過程中與板中抗體相遇，形成以抗原孔為中心的沉淀環。應用學科免疫學（一級學科），應用免疫（二級學科），免疫學檢測和診斷（三級學科）
雙向免疫擴散與單向免疫擴散的區別
雙向免疫擴散是指可溶性抗原與相應抗體在瓊脂介質中相互擴散,彼此相遇后形成一定類型的特異性沉淀線。沉淀線的特征與位置不僅取決于抗原抗體的特異性及相互間比例，而且與其分子大小及擴散速度相關。當抗原、抗體存在多個系統時，可呈現多條沉淀線乃至交叉反應。依據沉淀線的形態、條數、清晰度及位置可了解抗原或抗體的若
單向免疫擴散基本原理
單向免疫擴散(Single immunodiffusion)基本原理：指抗原和抗體兩 種成分中只有一種擴散，另 一種被固定在凝膠中。
單向免疫擴散實驗——人群血清IgG－正常值測定示例法
單項免疫擴散實驗可以用于：檢測正常人群或患者血清中 IgG、IgA 及IgM 的水平。實驗方法原理在含有特異抗體的瓊脂板中打孔，并在孔中加入定量的抗原，當抗原向周圍擴散后與瓊脂中抗體相結合，即形成白色沉淀環，其直徑或面積與抗原濃度呈正相關。同時用標準抗原或國際參考蛋白制成標準曲線，即可用以定量檢測未
單向環狀免疫擴散法出現誤差的原因
出錯原因：①抗原或標準液溢出加樣孔；②加樣量不足或過多，或混有氣泡；③加樣孔破損，使沉淀環呈不規則狀；④擴散時濕盒不平，導致沉淀環不圓；⑤因抗體或抗原過量而致沉淀環過小或過大；⑥澆注瓊脂時不在水平臺面，使膠板厚薄不勻；⑦板澆注后保存時間長，引起板內水分蒸發或變形；⑧打孔后挑取瓊脂時將膠板挑起，與玻璃
單向免疫擴散技術的的技術特點和原理
中文名稱單向免疫擴散英文名稱single immunodiffusion定 義將一定量的抗體混于瓊脂凝膠中制成瓊脂板，在適當位置打孔后將抗原加入孔中擴散，抗原在擴散過程中與板中抗體相遇，形成以抗原孔為中心的沉淀環。應用學科免疫學（一級學科），應用免疫（二級學科），免疫學檢測和診斷（三級學科）
雙向免疫擴散實驗
實驗方法原理 雙向免疫擴散試驗不僅可對抗原或抗體進行定性鑒定和測定效價，還可對抗原或抗體進行純度分析和同時對兩種不同來源的抗原或抗體進行比較，分析其所含成分的異同。若在兩孔內有兩對或兩對以上的抗原抗體系統，就能產生相應數量的分離的沉淀線（圖 1）。因此，利用此法可進行抗原或抗體的純度分析。圖 1 雙
雙向免疫擴散實驗
抗原、抗體在凝膠中擴散，并進行沉淀反應，叫做免疫擴散反應（immunodiffusion）。將抗原與其相應抗體放在凝膠（如瓊脂）平板中的鄰近孔內，使它們互相擴散，當擴散到兩者濃度比例合適的部位相遇時，即出現乳白色的沉淀線，稱為雙向免疫擴散試驗。此方法是由 Ouchterlony 所提出，因此又稱 O
單向瓊脂擴散實驗
一、原理單向瓊脂擴散實驗又稱單向免疫擴散實驗。指可溶性抗原在相應抗體的瓊脂介質中的擴散，可定性、定量抗原。二、操作步驟?1.取一塊干凈的玻璃板，用少量75%乙醇沖洗，晾干后置于水平臺，將1%瓊脂糖融化，56℃水浴中保溫。2.取15ml瓊脂糖加到56℃預熱玻璃管中，加入約200微升抗血清，充分混勻后鋪
瓊脂擴散實驗——單向瓊脂擴散
實驗材料待檢血清試劑、試劑盒生理鹽水瓊脂粉儀器、耗材微量進樣器打孔器玻璃板濕盒實驗步驟1. ?將適當稀釋（事先滴定）的診斷血清與予溶化的2%瓊脂在60℃水浴預熱數分鐘后等量混合均勻制成免疫瓊脂板。2. ?在免疫瓊脂板上按一定距離（1.2~1.5厘米）打孔，見圖1。圖1 ?單向瓊脂擴散試驗抗原孔位置示
單向定量免疫電泳實驗
實驗方法原理火箭電泳(rocketimmunoelectrophoresis)又稱單向定量免疫電泳，將抗原樣品放在含有專一性抗體的凝膠孔中，抗體靜電荷為零不移動；而抗原分子在電場作用下移動，形成抗原-抗體復合物沉淀下來。后面的抗原繼續向正極泳動遇到沉淀的抗原-抗體復合物，抗原過量使復合物沉淀溶解，與
單向定量免疫電泳實驗
實驗方法原理 火箭電泳(rocketimmunoelectrophoresis)又稱單向定量免疫電泳，將抗原樣品放在含有專一性抗體的凝膠孔中，抗體靜電荷為零不移動；而抗原分子在電場作用下移動，形成抗原-抗體復合物沉淀下來。后面的抗原繼續向正極泳動遇到沉淀的抗原-抗體復合物，抗原過量使復合物沉淀溶解，
雙向免疫擴散法測定抗血清效價實驗—雙向免疫擴散法
雙向免疫擴散法可用于：（1）診斷疾病；（2）測定抗體的效價。實驗方法原理將抗原和相應抗體分別加入同一凝膠板中的相鄰小孔中，使兩者互相擴散，當擴散到它們的濃度達當量點時(濃度相當)形成沉淀線。如果抗原-抗體的濃度合適時，沉淀線在兩孔的中間。如抗體過量，沉淀線靠近抗原孔。如抗原過量，沉淀線靠近抗體孔。此
免疫擴散的實驗的注意事項
1、玻片要清潔，邊緣無破損。2、澆制瓊脂板時要均勻、無氣泡。3、孔要打得圓整光滑，邊緣不要破裂。4、 加樣時應盡量避免氣泡或加到孔外，以保證結果的準確性。5、 注意微量進樣器每加一個樣品之后，就得清洗。
雙向免疫擴散試驗的實驗方法
1．將已溶化的1%瓊脂鹽水管放56~60℃水浴箱中平衡溫度備用。2．將載玻片置于水平桌面上，傾注已溶化瓊脂3.5~4ml，使成厚度約1.5mm瓊脂板。 3．凝固后，將打孔模板置于瓊脂板下，然后用打孔器打孔，根據不同需要可制成三角型、方陣型或梅花型。本次實驗采用三角型，即每一個三角型的三個孔為一組。（
雙向免疫擴散試驗的實驗結果分析
（1）融合性沉淀弧，說明兩孔中抗原相同，為同一性反應。（2）兩沉淀線獨自形成并形成交叉，說明兩孔中的抗原完全不同，為非同一性反應。（3）融合性沉淀弧出現支線，或同時有另一條或兩條沉淀線，說明兩孔中抗原有相同部分又有不同部分，此為部分同一性反應。
免疫擴散的作用
根據沉淀線的有無、形狀和位置對抗原或抗體進行定性分析，也可用于抗體的半定量檢測，還可進行抗體效價的測定。
免疫擴散技術概述
抗原與抗體成分的一種定性與半定量分析方法，通常采用半固態透明瓊脂凝膠作為支持介質。置于孔中的抗原和抗體相向擴散，在兩者濃度比例適當處相遇后如能結合形成復合物則形成沉淀線。分為單向擴散（single immunodiffusion）、放射狀擴散（radial immunodiffusion）和雙向擴散
免疫擴散的定義
免疫擴散指可溶性抗原與相應抗體在瓊脂介質中相互擴散，彼此相遇，在比例適當處形成沉淀線。
單向擴散試驗
單向擴散試驗：瓊脂內混入抗體，待測抗原從局部向瓊脂內自由擴散，如抗原和相應抗體結合，則形成沉淀環。1、試管法：將一定量的抗體混入0.7%瓊脂糖溶液中，注入小試管內，上層加抗原溶液使待測抗原在凝膠中自由擴散，在抗原抗體比例恰當位置形成沉淀環。2、平板法：是將抗體或抗血清混入0.9%瓊脂糖內，未凝固前傾
蛋白質的單向SDS凝膠電泳實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 Tris·ClSDS儀器、耗材 電泳儀離心機真空泵實驗步驟 1. ?按廠商的使用指南用兩塊干凈的玻璃平板和0.75 mm 墊片組裝電泳裝置中的玻璃平板夾層，并固定在灌膠支架上2. ?配置分離膠液體并脫氣，然后加10%的過硫酸銨和TEMED，輕輕攪拌混勻。3. ?用一根巴
蛋白質的單向SDS凝膠電泳實驗
Laemmli凝膠電泳法 無尿素條件下用Tris緩沖液分離多肽 連續SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 超薄凝膠的灌制和電泳 均一濃度的微型凝膠電泳 制備多塊梯度膠 ? ? ?
免疫擴散的分型
單向免疫擴散和雙向免疫擴散。
氨基酸單向紙層析實驗原理和步驟(2)
（4）濾紙：層析濾紙由高純度棉花制成，要求濾紙要清潔，質地均一，厚薄一致，纖維松緊度適中，具有一定的機械強度，要被溶劑所飽和。不同型號的濾紙，其厚薄程度、纖維松緊度各不相同，因此，濾紙纖維結合水的量不一樣，兩相的體積比也就不同，Rf也不同；另外，濾紙的雜質也會影響Rf，必要時進行預處理（可用0.01
氨基酸單向紙層析實驗原理和步驟(1)
一、實驗目的：1、通過氨基酸的分離，學習并掌握紙層析的原理和操作技術；2、掌握分配層析法；3、掌握影響分配系數的因素。層析分離技術是利用被分離的混合物中各組分物理化學的性質（分子的形狀和大小、分子極性、吸附力、分子親和力、分配系數等）的不同，使各組分以不同程度分布在兩相（流動相和固定相）中，當流動相
單向聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗
實驗材料 蛋白質溶液團粒狀細胞蛋白試劑、試劑盒 4X濃縮膠緩沖4X分離膠緩沖10X電泳緩沖液2XSDS-PAGE上樣緩沖液正丁醇甲醇SDS儲存液儀器、耗材 離心機電泳裝置凝膠上樣吸頭玻璃板加熱器實驗步驟 一、灌制平板膠1.清洗玻璃板。a.將玻璃板放人 2%PCC-54 清洗液中浸泡 3?24 h。b
單向聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗
蛋白質的SDS-PAGE實驗 傳統的考馬斯亮藍染色實驗 快速考馬斯亮藍染色實驗 InstaStain Blue 凝膠紙染色實驗 InstaStain Blue 凝膠紙染色實驗 SYPRO Ruby 熒光染色實驗 SYPR
免疫膠乳濁度分析在自動生化分析儀上的應用
?免疫比濁技術是在免疫沉淀反應（Precipitation）檢測法的基礎上建立的。最早應用的免疫沉淀反應是Ouchterlony在1948年建立的瓊脂雙向擴散法。??1965年Mancini等和Fahey等分別建立了可以定量的單向（輻射狀）免疫擴散技術。??Laurell等1966年建立了電免疫擴散