細菌生長檢測之AlamarBlueTM攝入法
1、按MTT檢測法培養細胞和用不同稀釋度的細胞因子處理細胞。 2、在培養結束前24小時加入Alamar Blue染料,96孔細胞培養板每孔20μl。 3、在培養結束后,直接在酶聯檢測儀上測定光吸收值。氧化型Alamar Blue的最大光吸收在570nm,用OD570減去OD600即為活細胞還原的Alamar Blue染料,顏色深淺與活細胞數成正比。......閱讀全文
細菌生長檢測之AlamarBlueTM攝入法
1、按MTT檢測法培養細胞和用不同稀釋度的細胞因子處理細胞。 2、在培養結束前24小時加入Alamar Blue染料,96孔細胞培養板每孔20μl。 3、在培養結束后,直接在酶聯檢測儀上測定光吸收值。氧化型Alamar Blue的最大光吸收在570nm,用OD570減去OD600即為活細胞還
細胞生長檢測方法:AlamarBlueTM攝入法
AlamarBlueTM 攝入法 1、按MTT檢測法培養細胞和用不同稀釋度的細胞因子處理細胞。 2、在培養結束前24小時加入Alamar Blue染料,96孔細胞培養板每孔20μl。 3、在培養結束后,直接在酶聯檢測儀上測定光吸收值。氧化型Alamar Blue的最大光吸收在570nm,
細胞生長檢測6:AlamarBlueTM攝入法
AlamarBlueTM攝入法1.按MTT檢測法培養細胞和用不同稀釋度的細胞因子處理細胞。2.在培養結束前24小時加入Alamar Blue染料,96孔細胞培養板每孔20μl。3.在培養結束后,直接在酶聯檢測儀上測定光吸收值。氧化型Alamar Blue的最大光吸收在570nm,用OD570減去OD
細菌生長檢測之堿性磷酸酶檢測法(AKP法)
堿性磷酸酶檢測法(AKP法):1、按MTT法用細胞因子處理靶細胞適當時間,用PBS洗去死亡細胞,洗兩次。2、向96孔細胞培養板各孔中加0.2ml新鮮配制的底物液(0.2mol/L 硼酸,1mmol/L MgCl2,1.2mmol/L甲傘基磷酸)。在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養3
NAG檢測法檢測細菌生長
1、按MTT檢測法培養細胞和用不同稀釋度的細胞因子處理細胞。 2、吸去培養液,用PBS洗滌兩次(如為懸浮細胞,應在吸去上清液前先離心)。 3、每孔加60μl NAG染液,在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養4小時。 4、每孔加90μl終止液,混勻后置酶聯檢測儀上測定光密度
MTS檢測法檢測細菌生長
1、培養IL-2依賴細胞株CTLL-2細胞或HT-2細胞(檢測IL-2),或者IL-3依賴細胞株FDC-P1細胞或FL5.12細胞(檢測IL-3)到對數生長期。 2、取96孔細胞培養板,每孔加0.1ml含1×104~2×104上述細胞之一的DMEM培養液(加10%小牛血清)。 3、每孔加0.
XTT檢測法檢測細菌生長
用XTT代替MTT可省去溶解還原產物結晶的步驟,XTT可以被活細胞中的代謝酶還原成黃色水溶性的代謝產物(formazan)。代謝產物在OD450處有吸收峰。
MTT檢測法檢測細菌生長
1、取96孔細胞培養板,每孔中加0.1ml含2×104~10×104靶細胞的培養液(含10%小牛血清的RPMI-1640培養液),在37℃ 5% CO2的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養2~3小時讓細胞帖壁(如果是懸浮細胞可直接進行下一步) 2、用RPMI-1640培養液2~10倍遞次稀釋細胞因子標
細菌生長檢測之三磷酸腺苷檢測法(ATP法)
1、ATP反應液(Bio-Orbit)是粉末狀混合物,含有熒光素、熒光素酶、0.5mmol醋酸鎂、50mg BSA和0.1μmol無機焦磷酸。在4℃可以保存1個月。用前用10ml含2mmol/L EDTA的0.1mol/L pH7.75 Tris-醋酸緩沖液稀釋。稀釋液分裝后可在-20℃長期
NAG檢測法檢測細胞生長
1.按MTT檢測法培養細胞和用不同稀釋度的 細胞因子 處理細胞。 2.吸去培養液,用PBS洗滌兩次(如為懸浮細胞,應在吸去上清液前先離心)。 3.每孔加60μl NAG染液,在37℃ 5% CO 2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養4小時。