地衣酚顯色法測定RNA含量實驗原理和操作步驟
【實驗原理】 RNA與濃鹽酸共熱時發生降解，產生的戊糖又可轉變為糠醛，在FeCl3或CuCl2催化下，糠醛與地衣酚（3,5—二羥基甲苯）反應形成綠色復合物，該產物在670nm處有最大吸收。當RNA濃度為20μg／m1~250μg／m1時，吸光度與 RNA濃度成正比。 【實驗材料】 1.實驗器材 恒溫水浴,721分光光度計。 2.實驗試劑 （1）RNA標準液：稱取10mgRNA(需先定磷確定其純度)用少量水溶解(若不溶可用2mol／L NaOH溶液調至pH7.0)，定容至100m1，濃度為100μg／ml。 （2） RNA樣品液：用上述實驗方法提取的RNA樣品 （3） 地衣酚試劑：取0.1g地衣酚溶于100ml濃鹽酸，再加入0.1gFeCl3·6H20。該溶液使用前新鮮配制。 【實驗操作】 1．標準曲線的繪制 取干燥試管6支，編號，按表所示加入試劑。 ......閱讀全文
細胞RNA含量檢測
實驗步驟展開
細胞RNA含量檢測
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細胞RNA含量檢測
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如何測量RNA的純度和含量
RNA膠（凝膠成像）檢測。例如：原核生物的核糖體所含的rRNA有5S、16S及23S三種。在膠上就有三條明顯大小不一的條帶。凝膠遷移分析。可以用來研究RNA-蛋白相互作用。基本原理是：結合了蛋白的RNA在凝膠中的遷移速率更慢，因而可以區分出結合蛋白與未結合蛋白的RNA條帶。RNA-seq即轉錄組測序
細胞RNA－含量樣品的制備及分析
實驗材料 單細胞懸液試劑、試劑盒 PY 試劑醋酸緩沖液磷酸緩沖液DNA 酶消化液實驗步驟 一、試劑配制1. PY 試劑的配制：PY 1.0 g 以 100 ml 蒸餾水溶解，配成母液，置 4℃ 冰箱保存。PY 工作液：取 1 ml PY 母液，加入 1 mol/L pH 4.7 的醋酸緩沖液 100
細胞RNA含量樣品的制備及分析
實驗材料單細胞懸液試劑、試劑盒PY 試劑醋酸緩沖液磷酸緩沖液DNA 酶消化液實驗步驟一、試劑配制1. PY 試劑的配制：PY 1.0 g 以 100 ml 蒸餾水溶解，配成母液，置 4℃ 冰箱保存。PY 工作液：取 1 ml PY 母液，加入 1 mol/L pH 4.7 的醋酸緩沖液 100 ml
細胞RNA含量樣品的制備及分析
? ? ? ? ? ? 實驗材料 單細胞懸液 試劑、試劑盒 PY 試劑 醋酸緩沖液 磷酸緩沖液 DNA
動物總RNA的提取及含量測定
一、實驗目的（1）了解制備RNA幾種方法的原理及優缺點（2）掌握稀堿法提取兔肝RNA的原理和操作技術二、實驗原理?細胞內大部份RNA均與蛋白質結合在一起，并且多以核蛋白的形式存在。因此，分離制備RNA時，首先遇到的是必須使RNA與蛋白解離，并除去蛋白質。由于RNA的種類來源和存在形式不同，所用的制備
細胞RNA含量樣品的制備及分析
細胞RNA含量樣品的制備及分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 單細胞懸液 試劑、試劑
地衣酚顯色法測定RNA含量
原理?核糖核酸與濃鹽酸共熱時，即發生降解，形成的核糖繼而轉變為糠醛，后者與3，5-二羥基甲苯（地衣酚）反應呈鮮綠色，該反應需用三氯化鐵或氯化銅作催化劑，反應產物在670nm處有最大吸收。RNA在20～250μ?g范圍內，光吸收與RNA的濃度成正比。地衣酚反應特異性較差，凡戊糖均有此反應，DNA和其他
酵母RNA的提取及含量測定（地衣酚顯色法）
一、實驗目的??（1）熟悉酵母RNA的提取方法（2）掌握地衣酚顯色法測定酵母RNA含量的原理和方法二、實驗原理??RNA與濃鹽酸共熱時，即發生降解，形成的核糖繼而轉變成糠醛，后者與3， 5-二羥甲苯反應呈鮮綠色，該反應需用三氯化鐵和氯化銅作催化劑，反應產物在670nm處有最大吸收。RNA在20－25
地衣酚顯色法測定RNA含量實驗原理和操作步驟
【實驗原理】 RNA與濃鹽酸共熱時發生降解，產生的戊糖又可轉變為糠醛，在FeCl3或CuCl2催化下，糠醛與地衣酚（3,5—二羥基甲苯）反應形成綠色復合物，該產物在670nm處有最大吸收。當RNA濃度為20μg／m1~250μg／m1時，吸光度與 RNA濃度成正比。 【實驗材料】
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（2）
早期的 RNAi 技術可用在研究與胚胎發育相關基因的功能上，但是由于細胞分裂造成 dsRNA 的稀釋，使得這種方法在研究成體的基因功能時有一定的局限性。為彌補早期 RNAi 技術的不足，Tavernarakis 等將 RNAi 技術做了一些改進及更動，將目的基因之標的序列以反向重復的方式，由
RNA干擾技術(RNA－interference，RNAi)
1995年，康乃爾大學的Su Guo博士在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲（C. elegans）中的par-1基因時，發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷上述基因的表達，而同時在對照實驗中給線蟲注射正義RNA（sense RNA）以期觀察到基因表達的增強。但得到的結果
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（1）
基因沉默（gene silencing）是生物體內特定基因由于種種原因不表達的遺傳現象。一方面，基因沉默是生物遺傳操作創造新的遺傳修飾生物（genetically modified organisms）的障礙，另一方面，它又是植物抵抗外來核酸入侵（如病毒）的一種反應，為植物抗病毒的遺傳育
RNA提取時RNA降解原因
1 ) 新鮮細胞： 裂解液的量不足，使得裂解不充分。 2 ) 新鮮組織： 某些含有內源性核酸酶的樣品，很難避免RNA酶的降解，建議采用的方法為在液氮條件下將組織研碎，并且，勻漿時采用更多的裂解液。 3 ) 冷凍樣品： 樣品取材后應該迅速置于液氮中冷凍存放，然后轉移到-70℃冰箱存
RNA提取心得（組織RNA提取和培養細胞的RNA提取）
一.組織RNA提取 1.最好新鮮組織，這樣RNA提取的效果比較好，這是肯定的。 2. 如果不是新鮮的（最好在半年之內，-80℃或者液氮中凍存的）組織，注意不要反復凍融，從冰凍狀態拿到0-4℃，注意不要拿到常溫，待組織解凍后，用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織，稱重后，放到預冷的勻漿器中，然后
RNA分離與分析實驗_分離RNA
實驗材料標記細胞試劑、試劑盒乙酸緩沖液儀器、耗材漩渦器實驗步驟1. 收獲標記細胞。2. 小心處置上清液，用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸緩沖液懸浮細胞沉淀，每 1 ml 壓積細胞用 10 ml 緩沖液。3. 于室溫用漩渦器振蕩裂解細胞。4. 加等體積的水飽和酚，充分混勻，于 60
RNA干擾相關知識RNARISC
RNA-induced silencing complex（RISC）：一種RNA-蛋白質復合物，通過與目標mRNA完全或者部分的互補配對來實施切割或者翻譯抑制功能。SiRNA組裝siRISC，miRNA組裝miRISC。RISCs（無論siRISC還是miRISC）包括兩種類型：切割型和不切割型。
反義技術——RNA干擾（RNA－interference，RNAi）
最近由于RNA干擾（RNA interference，RNAi）的發現使反義領域的研究增多。這種自然發生的現象最早是在秀麗線蟲中發現的（1），是序列特異性地使轉錄后的基因沉默的有力機制。由于最近兩年在RNAi領域取得的進步，已經有許多這方面的綜述發表（2-4）。RNA干擾是由長的雙鏈 RNA
RNA干擾相關知識RNARITS）
RNA-induced initiation of transcriptional gene silencing（RITS）：是一種組織染色質變型的復合物。RITS復合物也包含Dicer加工形成的siRNA和AGO蛋白質，通過結合到異染色質的基因池上來促使異染色質上基因的沉默。
RNA－Electrophoresis
Electrophoresis through agarose or polyacrylamide gels is the standard way to separate, identify and purify nucleic acid fragments. The location of th
RNA電泳
RNA Gel (Crawford Lab)Gel Electrophoresis of RNA (Beverly Faulkner-Jones)great tips on RNA gel electrophoresis.Northern Gel and ?TransferUsing glyoxal
RNA電泳
·?????????RNA Gel?(Crawford Lab)·?????????Gel Electrophoresis of RNA?(Beverly Faulkner-Jones)great tips on RNA gel electrophoresis.?·?????????Northern
RNA提取
RNA提取（主要內容如下）Tips for Handing RNA?Total RNA IsolationmRNA IsolationrRNA IsolationOthersQ & A posted in the Method Forum??Basic Procedures for Handing
Quantitating－RNA
RNA quantitation is an important and necessary step prior to most RNA analysis methods. Here we discuss three common methods used to quantitate RNA an
RNA標記
RNA labeling?(Amersham Pharmacia)For the generation of radiolabelled, single stranded RNA for use as hybridization probes??32P-pCp 3' End-labeling
RNA－電泳
①電泳RNA 所用器械如制膠的模具、梳子、電泳槽等用肥皂粉洗干凈后用雙蒸水沖洗二遍后在室溫晾干備用。②用新的1XTBE 配制1. 2 %瓊脂糖凝膠,倒膠時溴化乙錠(E直接加入凝膠中。③制備好的瓊脂糖凝膠板放入電泳槽后再加入經高壓滅菌過的1XTBE ,液面只能剛好同膠面平齊,緩沖液不要淹過膠面。④點樣
RNA－剪接
中文名稱RNA 剪接英文名稱RNA splicing定 義在真核細胞核中從RNA初始轉錄物切除內含子，連接外顯子形成成熟的mRNA的過程。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞遺傳（二級學科）
RNA降解
新鮮細胞：如果試劑沒有問題，且外源性污染也可以排除，那么降解幾乎都來自裂解液的用量不足。如? 果將裂解液直接加入培養皿中裂解細胞，一定要使裂解液能覆蓋住細胞。 2. 新鮮組織：某些富含內源核酸酶的樣品(如肝臟，胸腺等)，即使使用電動勻漿器勻漿也不能避免RNA的降解。更可靠的方法是：在液氮條件下將組織