WIKI資訊
Protein表達是一個非常復雜的過程，因此很難預測表達的蛋白是否是可溶性的、包涵體形式還是部分降解的。為了預防各種可能的困難條件，在重組蛋白上導入兩種Tag可以提供獲得高純度均質蛋白的靈活性。 蛋白含有兩種不同親和純化Tag的重要原因： 純化全長的蛋白 獲得最高純化的蛋白 適合變性或生理條件下純化 優化的操作過程，可以直接從培養基中純化蛋白 與Strep- tag®配合最有效的是6xHistidine-tag，總之推薦一個Tag在蛋白的N-端，另外一個Tag在蛋白的C-端。 純化全長蛋白： 重組的蛋白在表達時會有部分降解，即使在下游的處理過程中加入蛋白酶抑制劑也無法避免。可溶性降解蛋白仍然帶有純化tag，在純化時會引起純化蛋白的不純（由于有不同長度片段的蛋白混入）。這種問題可以通過在蛋白的另一端加入第二種Tag來解決。經過第二種Tag的純化，即可獲得全長的蛋白。 最高純度的蛋......閱讀全文
淺述蛋白質分離純化的新技術摘 要： 本文主要介紹了濁點萃取法、置換色譜法、親和層析法、親和色譜法、凝膠電泳、雙水相萃取等蛋白質的最新分離純化技術，綜和近年來國內外的一些研究結果，結合實際應用的例子，分析了各種分離純化方法的優點，同時指出其不足之處。文章最后展望了蛋白質分離純化技術的發展趨勢。&nbs
1.2.7重組融合蛋白的純化 PrP-pET-32a（+）轉化表達菌E.coli BL21（DE3），TB培養基中，25℃，AMP 200 ug/ml，搖床（250 r／min）培養至OD600約為1.5，更換等體積新鮮TB培養基，加入IPTG至終濃度1 mM，AMP 200 ug/ml，
關于包涵體的純化是一個令人頭疼的問題，包涵體的復性已經成為生物制藥的瓶頸，關于包涵體的處理一般包括這么幾步：菌體的破碎、包涵體的洗滌、溶解、復性以及純化，內容比較龐雜 一、菌體的裂解 1、怎樣裂解細菌？ 細胞的破碎方法 1.高速組織搗碎
下村修 做出應獲諾貝爾獎工作的科學家，幾十年默默無聞； 被廣泛應用的分子，很少人知其發現者； 原始論文鮮為人知，后繼論文倒很熱門； 曾失明的人，發現了美麗的發光蛋白； 低調的父親，出了高調的兒子。 這里簡介一項生物化學研究，講一個科學家的故事，
3.3 小結 本文的研究結果表明： 中空纖維 750k超濾膜成功的用于狂犬病毒收獲液的濃縮和洗濾，膜處理量大于 70L/m2，平均處理速度達 61 LMH，處理時間僅 1.2小時，病毒收率近 100%，濃縮后產品外觀澄清度好
做完裂解之后加Triton X－100輕搖３０min，蛋白溶解的會多些！ 四、包涵體的復性 1、包涵體如何復性 包涵體的復性主要有兩種方式： 1，稀釋溶液，但是操作的液體量大，蛋白稀釋 2，透析，超濾或電滲透析去除變性劑 其中透析很適合實驗
微陣列技術在單個實驗中能同時分析數千個參數。捕獲分子微點在固體支持物上固定成行列并暴露在含相應結合分子的樣品中。基于熒光、化學發光、質譜、放射性或電化學的讀出系統能檢測每個微點形成的復合物。這些微小化和平行的結合分析高度靈敏，方法的分析能力又能被微陣列基因表達分析所放大。在這些系統中，檢測固定的DN
選擇材料及預處理 以蛋白質和結構與功能為基礎，從分子水平上認識生命現象，已經成為現代生物學發展的主要方向，研究蛋白質，首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識，但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別，把它們分配到
研究者們在分離到某一基因后，要對其編碼蛋白質進行研究最理所當然的工作就是表達——即：有目的性地合成外源基因產物。在重組DNA技術的發展早期，人們認為在基因的前面有一個強啟動子和一個起始密碼子就足以在大腸桿菌中獲得很好的表達。隨后，認識到獲得有效的翻譯所需的條件要復雜得多，除了要有強啟動子
層析方法 1. 用去離子水稀釋細菌裂解物至電導率為 35-40mS / cm。稀釋取決于樣品制備過程中添加的 CaCl2 濃度。2. 將稀釋的樣品用 0.45μm 過濾器進行過濾。3. 將 20CV 的緩沖液 A1 平衡 DEAE 柱。4.
諾華（Novartis）制藥 Wang, Karen（王瑛琪）教授 來自諾華（Novartis）制藥的Wang, Karen（王瑛琪）教授，做了題為“Application of Mass Spectrometry in Pharmaceutical Drug Discovery Research
在細胞培養過程中會出現這樣或那樣的問題，這些問題從細胞生長角度來說，針對細胞不貼壁、生長緩慢、生長不好，甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養細胞不貼壁可能原因： ?胰蛋白酶消化過度；?支原體污染；?培養基pH值過堿（NaHCO3分解）；?細胞老化；?接種細胞起始濃
摘 要： 目的 建立一種快速、簡易的檢測血清中抗幽門螺桿菌(Hp)細胞毒素相關蛋白A(CagA)抗體的膠體金免疫層析法(GICA)。 方法 采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金顆粒，標記葡萄球菌A蛋白(SPA)，將重組 的CagA抗原劃線固定于硝酸纖維素膜上，制成免疫層析檢測試條。 血清中IgG
一、什么是CelCradleTM生物反應器CelCradleTM生物反應器根據潮汐漲落原理設計而成，其中波紋管的壓縮和解壓可使細胞不斷接觸培養基的營養與空氣，提供了一個低細胞撕裂、無泡沫、高氧氣飽和度以及高營養濃度的細胞培養環境。CelCradleTM是用于高密度細胞培養的一款易于使用的經濟型臺式生
一，蛋白質（包括酶）的提取 大部分蛋白質都可溶于水、稀鹽、稀酸或堿溶液，少數與脂類結合的蛋白質則溶于乙醇、丙酮、丁醇等有機溶劑中，因些，可采用不同溶劑提取分離和純化蛋白質及酶。（一）水溶液提取法 稀鹽和緩沖系統的水溶液對蛋白質穩定性好、溶解度大、是提取蛋白質最常用的溶劑，通常用量是原材料體積的1
二、蛋白質的分離純化蛋白質的分離純化方法很多，主要有：（一）根據蛋白質溶解度不同的分離方法1、蛋白質的鹽析 中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響，一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高，蛋白質的溶解度增加，此稱鹽溶；當鹽濃度繼續升高時，蛋白質的溶解度不同程度下降并先后析出，這種現象稱鹽析，將大量鹽加到蛋白質溶
1 微流控技術概述 微流控技術是一種在微米尺寸級別下處理或操縱液體的技術手段，將混合器、執行器、反應器、分離器、傳感器等集于一體，從而優化檢測過程。其涉及到電子、機械、化學、物理和生物等多門學科，具有通量高、靈敏度高、樣本分析時間短、樣本量少、可控性強等優勢，被廣泛應用于現代分析化學、藥劑
來自紐約8月3日的消息，Thermo Fisher Scientific這一世界領先的科技公司宣布推出SurePrep? RNA Purification Kits，這一試劑盒可以從生物樣品中捕獲所有大小的RNA分子，比如經純化的全長大分子RNAs，或者是在信號途徑中調控基因表達，在細胞死亡，器官發
2、等電點沉淀法 蛋白質在靜電狀態時顆粒之間的靜電斥力最小，因而溶解度也最小，各種蛋白質的等電點有差別，可利用調節溶液的pH達到某一蛋白質的等電點使之沉淀，但此法很少單獨使用，可與鹽析法結合用。3、低溫有機溶劑沉淀法 用與水可混溶的有機溶劑，甲醇，乙醇或丙酮，可使多數蛋白質溶解度降低并析出，此法分辨
蛋白質的分離純化方法很多，主要有：（一）根據蛋白質溶解度不同的分離方法1、蛋白質的鹽析 中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響，一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高，蛋白質的溶解度增加，此稱鹽溶；當鹽濃度繼續升高時，蛋白質的溶解度不同程度下降并先后析出，這種現象稱鹽析，將大量鹽加到蛋白質溶液中，高濃度的鹽離子
芯片毛細管電泳具有進樣量少，靈敏度高，分析速度快等特點，非常適合法醫DNA-STR的快速檢驗。毛細管電泳芯片由于尺寸小，可施加較大場強，所以在幾秒鐘內就可完成對樣品的分離，微陣列毛細管電泳芯片可實現高通量檢測則成為目前學者研究的熱點。2002年Emrich CA等[31]報道的將高通量384孔毛
由中國物理學會質譜分會主辦，西北核技術研究所承辦的2011年第31屆中國質譜學會年會，將于2011年8月6日至8月10日在西安未央湖大酒店召開，會期五天。本屆年會的主題是：前沿質譜新方法、新技術及其應用的最新進展。本次年會將邀請知名質譜專家，做高水平的學術報告;并組
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布
【摘要】 目的 探討小鼠精原細胞的分離純化。 方法 用組合酶消化法制備7～8d小鼠的生殖細胞懸液；用Percoll不連續密度梯度法分離精原細胞。 結果 所獲細胞懸液內活細胞、死細胞及細胞團的百分比分別為90.08%、9.92%及8.91%；平均每個睪丸可獲得4.136×105個細胞；精原細胞主要分布
自然界中硼同位素組成δ11B有非常大的變化范圍，是良好的地球化學示蹤劑，在海洋酸化、水巖相互作用和殼幔物質循環等方面研究均具有重要應用價值。然而，硅酸鹽物質的高精度δ11B分析，受制于化學處理過程中的低回收率和高污染風險，以及質譜測量過程中難以有效控制分餾等原因，到目前一直都是個難題，導致硼同位
太陽能作為一種清潔可持續的綠色能源成為近年來能源轉化利用的焦點，已經被廣泛應用于光伏發電、光催化及光熱轉化等領域。其中利用光熱轉化原理進行海水淡化，是一種低成本、低維護的海水淡化技術。目前的光熱轉化材料主要有碳基材料、等離激元材料以及半導體材料等，上述材料由于其自身的物理化學穩定性，在高鹽霧、高
脂肪酸及其衍生物在能源、化工、材料等工業領域具有廣泛的應用前景。近日，中科院青島生物能源與過程研究所生物基化學品團隊咸漠研究員等對生物法制備脂肪酸及其衍生物(脂肪醇、羥基脂肪酸等)作了系列研究，相關成果已發表在Microbial Cell Factories、Bioresource Tech
《Cell Stem Cell》雜志是2007年Cell出版社新增兩名新成員之一(另外一個雜志是Cell Host & Microbe)，這一雜志內容涵蓋了從最基本的細胞和發育機制到醫療軟件臨床應用等整個干細胞生物學研究內容。這一雜志特別關注胚胎干細胞、組織特異性和癌癥干細胞的最新成
分子蒸餾在精油加工中的應用植物及其提取物自古以來就被人們用來消除疼痛，愈合傷口及殺菌，從而達到治療和保健的效果[2]。在現代醫學尚未成形的17世紀時，人們對植物精油的認識和利用就已經相對發達，當時大約就有60種精油用于香料和醫療領域[3]。l8世紀后，由于有機化學的發展，人們在對植物精油的提取、成份