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實驗概要本實驗介紹了SABC法親和素與生物素系統的操作步驟。實驗原理SABC法或稱S-P法、LSAB法，它是采用生物素標記的第二抗體與結合有HRP或AKP酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質，相對分子質量60000，不含糖鏈，等電點pI為6.0～6.5。鏈霉親和素同一定濃度的生物素化酶混合后，就能形成鏈霉親和素-酶復合物，這種復合物中至少存在1個尚未被生物素占據的親和素結合位點，可以和各種生物素標記抗體結合。由于采用了改良的親和純化技術和酶標技術，LSAB法敏感性更高、背景更清晰。實驗步驟1. 石蠟切片常規脫蠟至水，PBS洗3X3min。2. IHC的前處理視特異性一抗不同，可采用蛋白酶消化或熱誘導的微波抗原修復(AR)，PBS洗3X3min。3. 3％過氧化氫孵育10min(可省略)，以阻斷內源性過氧化物酶活性。4. PBS洗3X3min。5. 1......閱讀全文
實驗概要本實驗介紹了SABC法親和素與生物素系統的操作步驟。實驗原理SABC法或稱S-P法、LSAB法，它是采用生物素標記的第二抗體與結合有HRP或AKP酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質，相對分子質量60000，不含
實驗概要本實驗介紹了SABC法親和素與生物素系統的操作步驟。實驗原理SABC法或稱S-P法、LSAB法，它是采用生物素標記的第二抗體與結合有HRP或AKP酶的鏈霉親和素(streptavidin)連接來測定細胞及組織中的抗原。鏈霉親和素是一種從鏈霉菌培養物中提取的蛋白質，相對分子質量60000，不含
生物素－親和素系統（Biotin-Avidin—System，BAS）是70年代末發展起來的一種新型生物反應放大系統。生物素與親和素之間高親合力的牢固結合以及多級放大效應，使BAS免疫標記和有關示蹤分析更加靈敏。BAS目前已廣泛用于抗原、抗體的定性、定量檢測及定位觀察研究。生物素（biotin，B）
檢測未知抗原 檢測未知抗體 實驗方法原理 親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋
基本類型有兩種，一類以游離親和素為中間物，分別連接包含生物素大分子的待檢反應體系和標記生物素，稱為BAB法；后來又在此基礎上發展了親和素-生物素化酶復合物技術（ABC）。另一類是直接用標記親和素連接生物素化大分子反應體系進行檢測的BA法，或稱標記親和素-生物素法（LAB）。此外，依據待檢反應體系中所
生物素即維生素H，是一種堿性蛋白。親和素具有4個與生物素親和力極高的結合位點。能夠彼此牢固結合而不影響彼此的生物學活性。常用的技術類型有： （一）親和素-生物素-過氧化物酶復合物技術（ABC） 原理：親和素與酶標生物素結合，形成可溶性親和素-生物素-過氧化物酶復合物（ABC）。其與生物素化抗
實驗方法原理親和素是卵白蛋白中提取的一種堿性糖蛋白，對生物素有非常高的親和力（結合常數高達1015M-1）。生物素很易與蛋白質（如抗體等）以共價鍵結合。這樣，結合了酶的親和素分子與結合有特異性抗體的生物素分子產生反應，既起到了多級放大作用，又由于酶在遇到相應底物時的催化作用而呈色，達到檢測未知抗原（
實驗方法原理包被抗原：用0.05 mol/L pH9.6碳酸鹽緩沖液將已知的抗原作適當稀釋，于聚苯乙烯酶標板的孔中加0.1 ml，于4 ℃放置18～24 h。用洗滌緩沖液洗3次，每次3 min。 加樣：加適當稀釋的待檢樣品（未知抗體）于反應孔中，同時作空白、陰性和陽性對照孔。37 ℃孵育1
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒TTBS緩沖液TBS緩沖液過氧化物酶堿性磷酸酶儀器、耗材搖床硝酸纖維素膜尼龍膜實驗步驟1. 在旋轉搖床或擺動平臺中持續搖動使膜與合適的封閉液平衡。對于硝酸纖維素膜或PVDF膜，需在室溫封閉30~60 min。尼龍膜則需在37℃封閉2 h。2. 用TT
親和素-生物素系統：如何減少干擾更好地應用于免疫檢測-1-什么是親和素-生物素系統（鏈霉）親和素-生物素是免疫檢測中常用的信號放大系統。親和素是蛋清中常見的糖類蛋白，由四個相同的亞基組成。每一個亞基都包含一個生物素結合位點，因此一個理論上正常的親和素能夠結合4個生物素。親和素與生物素具有非常強烈的親