如何選擇流式熒光
這個問題有點不好說,每個熒光都有自己在某個波長的最大吸收峰,原則上最大吸收峰差的越遠補償越小,FITC PE APC 最常用的三個熒光,一般一管染三種抗體就選這三個顏色,便宜,而且好染。如果再加的話可以選PE-cy7或APC-cy7,個人覺得可以,一管不宜染太多種抗體,到時候很難分析,補償也大,結果不準確。 同時,建議你做原代細胞流式考慮染死亡細胞(7AAD)。對了,最好不用Percy 5.5,不好染。......閱讀全文
流式熒光技術
流式熒光技術又稱液態芯片技術(Luminex xMAP技術),其整和了熒光編碼微球、激光分析、應用流體學及高速數字信號處理等多項最新科技,是美國Luminex公司于上世紀末開發出的新一代高通量發光檢測技術。目前該技術已被廣泛應用于免疫分析、核酸研究、酶學分析、受體和配體識別等領域,并得到各權威機構和
如何選擇流式熒光
這個問題有點不好說,每個熒光都有自己在某個波長的最大吸收峰,原則上最大吸收峰差的越遠補償越小,FITC PE APC 最常用的三個熒光,一般一管染三種抗體就選這三個顏色,便宜,而且好染。如果再加的話可以選PE-cy7或APC-cy7,個人覺得可以,一管不宜染太多種抗體,到時候很難分析,補償也大,結果
流式熒光的應用介紹
白血病是嚴重威脅人類健康的惡性疾病,既往的細胞形態學分型診斷符合率及正確率受檢測者主觀成分影響較大,近兩年白血病分子特征的研究取得了明顯進展,尤其是對染色體易位形成的融合基因,有一些已作為診斷不同類型白血病的分子生物學特異性標志和確定診斷的唯一依據。基于此,在流式熒光技術基礎上推出的白血病融合基因檢
流式熒光的檢測意義
1.融合基因檢測對白血病診斷的意義評價白血病的急性程度、克隆特性及分型,使白血病的診斷分型更加科學化和規范化;可檢出1×106個有核細胞中的一個白血病細胞,在白血病的早期診斷方面有著其它方法無可比擬的特異性和敏感性。2.融合基因檢測對白血病治療和預后判斷的意義細胞遺傳學分型與疾病的預后關系密切,對于
流式熒光的技術原理
將熒光標記后的單細胞(或顆粒)懸液進入吸樣管,進而隨鞘液進入流動室。進入流動室之前的管道變細,迫使鞘液從四周、樣本在中心進入流動室,在外加壓力的作用下由下向上(或由上向下)直線流動。鞘液充滿流動室將樣品裹挾,當二者通過流動室噴嘴流出時,壓力迫使鞘液包裹的液滴包含單一細胞或顆粒垂直通過檢測區。在檢測區
流式熒光的技術特點
1、高通量:將許多種不同熒光編碼的微球放在同一反應體系內,一次可同時檢測2-500種生理病理指標,這與傳統方法的逐個檢測相比是質的飛躍。2、高敏感性:流式熒光技術最高的檢測下限可達0.01 pg/ml,常規的酶聯免疫吸附試驗(ELISA)僅為μg級,比后者檢測的靈敏度提高10—100倍。3、線性范圍
流式熒光技術的技術特點
1、高通量:將許多種不同熒光編碼的微球放在同一反應體系內,一次可同時檢測2-500種生理病理指標,這與傳統方法的逐個檢測相比是質的飛躍。2、高敏感性:流式熒光技術最高的檢測下限可達0.01 pg/ml,常規的酶聯免疫吸附試驗(ELISA)僅為μg級,比后者檢測的靈敏度提高10—100倍。3、線性范圍
流式熒光技術的應用介紹
白血病是嚴重威脅人類健康的惡性疾病,既往的細胞形態學分型診斷符合率及正確率受檢測者主觀成分影響較大,近兩年白血病分子特征的研究取得了明顯進展,尤其是對染色體易位形成的融合基因,有一些已作為診斷不同類型白血病的分子生物學特異性標志和確定診斷的唯一依據。基于此,在流式熒光技術基礎上推出的白血病融合基因檢
流式熒光技術的檢測意義
1.融合基因檢測對白血病診斷的意義評價白血病的急性程度、克隆特性及分型,使白血病的診斷分型更加科學化和規范化;可檢出1×106個有核細胞中的一個白血病細胞,在白血病的早期診斷方面有著其它方法無可比擬的特異性和敏感性。2.融合基因檢測對白血病治療和預后判斷的意義細胞遺傳學分型與疾病的預后關系密切,對于
流式熒光的原理和應用
流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等,是近20多年逐漸發展起來的多指標聯合診斷技術。該技術以熒光編碼微球為核心,集流式原理、激光分析、高速數字信號處理等多種技術于一體,多指標并行分析,最多可一管同時準確定量檢測2-500種不同的生物分子;具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點;可用于免疫分析、核酸研究、
流式熒光的研究進展
流式熒光平臺一經推出,便在醫學診斷與基礎研究的各個領域得到了迅速推廣,截止2014年底,已有20000臺以上流式熒光平臺在全球各大權威實驗室、臨床診斷科、主要的診斷試劑和生物技術公司、制藥企業中投入使用。應用領域涉及HLA配型、自身免疫病檢測、過敏原檢測、基因突變檢測、腫瘤標志物檢測、HPV分型等眾
流式熒光技術的技術原理
將熒光標記后的單細胞(或顆粒)懸液進入吸樣管,進而隨鞘液進入流動室。進入流動室之前的管道變細,迫使鞘液從四周、樣本在中心進入流動室,在外加壓力的作用下由下向上(或由上向下)直線流動。鞘液充滿流動室將樣品裹挾,當二者通過流動室噴嘴流出時,壓力迫使鞘液包裹的液滴包含單一細胞或顆粒垂直通過檢測區。在檢測區
流式熒光技術的特點和應用
流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等,是近20多年逐漸發展起來的多指標聯合診斷技術。該技術以熒光編碼微球為核心,集流式原理、激光分析、高速數字信號處理等多種技術于一體,多指標并行分析,最多可一管同時準確定量檢測2-500種不同的生物分子;具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點;可用于免疫分析、核酸研究、
流式熒光技術的應用領域
應用領域涉及HLA配型、自身免疫病檢測、過敏原檢測、基因突變檢測、腫瘤標志物檢測、HPV分型等眾多免疫、分子檢測。
流式熒光技術的特點和應用
流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等,是近20多年逐漸發展起來的多指標聯合診斷技術。該技術以熒光編碼微球為核心,集流式原理、激光分析、高速數字信號處理等多種技術于一體,多指標并行分析,最多可一管同時準確定量檢測2-500種不同的生物分子;具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點;可用于免疫分析、核酸研究、
流式細胞術熒光那些事兒
自上世紀70年代問世以來,流式細胞術(FCM)在基礎科研和臨床診斷和治療上得到了越來越廣泛的應用。但是,做FCM往往會遇到熒光信號太弱的情況。好不容易搞了一管細胞去做流式,卻做不出熒光信號。真的是急死個人。其實,毛博也是到米國做博士猴以后才開始做流式的。時間不算長。但是做得非常非常多。每天都要做好幾
流式平均熒光強度反映什么
流式平均熒光強度反映精確地數值。左邊這張圖每個峰下面積除以細胞數就是平均熒光強度,在流式細胞儀分析完結果后會出據平均熒光強度的數值,可以看原始數據。右邊這張圖縱坐標。流式細胞儀檢測得到的都是相對值,沒有單位。這個平均熒光強度也是一樣。單獨看一個樣本的值是沒有意義的,要么是比較不同樣本直接的差別,要么
流式平均熒光強度反映什么
流式平均熒光強度反映精確地數值。左邊這張圖每個峰下面積除以細胞數就是平均熒光強度,在流式細胞儀分析完結果后會出據平均熒光強度的數值,可以看原始數據。右邊這張圖縱坐標。流式細胞儀檢測得到的都是相對值,沒有單位。這個平均熒光強度也是一樣。單獨看一個樣本的值是沒有意義的,要么是比較不同樣本直接的差別,要么
流式平均熒光強度反映什么
流式平均熒光強度反映精確地數值。左邊這張圖每個峰下面積除以細胞數就是平均熒光強度,在流式細胞儀分析完結果后會出據平均熒光強度的數值,可以看原始數據。右邊這張圖縱坐標。流式細胞儀檢測得到的都是相對值,沒有單位。這個平均熒光強度也是一樣。單獨看一個樣本的值是沒有意義的,要么是比較不同樣本直接的差別,要么
流式細胞法檢測熒光假單胞菌
流式細胞法FCM(Flow Cytometry Method)可以檢測菌液中標記熒光信號的單細胞,對菌株實現逐一定量分析。流式細胞法檢出的菌數是平板計數法的 3.8 倍,因為能統計到總體菌落數量。利用這個方法檢測牛奶中假單胞菌,能在4 h內完成檢測,且在菌落數含量較少時靈敏度有很大的提高。此方法
熒光分選細胞時,流式抗體用什么稀釋
抗體是加到細胞懸液當中的。根據細胞的情況,緩沖液也是不一樣的。活細胞,固定的細胞差別都很大。抗體是不用事先稀釋的,直接加入細胞懸液
自帶紅色熒光的細胞怎樣做流式凋亡
流式凋亡檢測的方法很多。如果細胞只是自帶紅色熒光,那就用其他顏色的熒光染料來檢測。比如檢測caspase-3/7活性,底物可以用綠色熒光標記。如果是要做DNA單色,看sub-G1,那可以用DAPI。要測annexin V,也可以用綠色標記物加DAPI
多色流式實驗熒光素的選擇(二)
3. 多色流式細胞檢測中熒光素選擇的原則1) 根據機器配置選擇熒光素了解你使用的流式細胞儀的性能,大多數流式細胞儀有兩個或者多個激光器,有五種波長可供選擇:紫外(355 nm)、紫色(405 nm)、藍色(488 nm)、黃色(561 nm)和紅色(640 nm)。除了激光器,具體的激光片和檢測
流式細胞儀熒光補償調節方法
熒光補償是指修正熒光光學信號在探測器之間相互滲漏并被數字化檢測的過程。自單激光雙色分析出現后,此過程變得十分重要。每種熒光素分子都具有自身的光譜發射范圍。這些發射光譜之間存在相互疊加,在某些情況下此現象十分明顯。 舉例來說,如下圖為FITC與PE熒光發射光譜的疊加情況。在一個雙探測器系統中,可
流式抗體(熒光抗體)細胞染色步驟與注意
染色緩沖液(BSA)的配制:PBS含有1% FBS和0.09% NaN3,置于冰上或4度冰箱備用。準備單細胞懸液:淋巴組織、骨髓、血液或培養的細胞。用冰染色緩沖液洗細胞2次,離心細胞,用冰染色緩沖液重懸細胞,使終濃度為2×107細胞/ml。各取50ul(106細胞)細胞懸液到2個圓底的Ep管中。根據
多色流式實驗熒光素的選擇(一)
如今,流式細胞術已經成為一項功能強大的技術,可在數秒內對數千個單個細胞或其他顆粒的多項參數進行分析。在流式細胞分析中,熒光素受到一定波長的激光激發后,釋放出的能量能發射出一定波長的熒光,因此我們在選擇熒光素時應注意它們的激發波長和發射波長,以選擇正確的激光器和熒光組合。隨著多色流式細胞儀的出現,新熒
流式熒光液芯技術的原理及其應用
?? 曾經在2000年前后經歷過輝煌發展的傳統生物芯片,經過10年左右的應用,科學家們終于有了些更客觀和更清醒的認識,同時產業界也衍生出了更專業更具特點的新型生物芯片。傳統基于玻璃片、硅片、膜片的所謂“固態芯片”是生命科學研究領域中非常優秀的科研工具,它們的共同特點是在固態基材上極小的面積里合成或固
流式平均熒光強度變化很大的原因
所處的外界環境。流式平均熒光強度變化很大的原因是所處的外界環境,如溫度、溶劑、pH、熒光熄燈滅劑等都會影響。平均熒光強度,用于表示某個指標的流式檢測最終的熒光強度。
流式細胞技術免疫熒光結果怎么判讀
做單個細胞內蛋白質表達,或者單細胞多因子測定的實驗還是FLOW方便,比如細胞周期蛋白表達和細胞周期的關系,免疫細胞PHENOTYPING,BCL-2在凋亡細胞內的表達等等。WB只能看一個細胞群體的蛋白表達量,因此精細度難以和FLOW相比。FLOW的缺點是儀器比較貴,而且要專門的技術人員來操作。
流式細胞技術免疫熒光結果怎么判讀
做單個細胞內蛋白質表達,或者單細胞多因子測定的實驗還是FLOW方便,比如細胞周期蛋白表達和細胞周期的關系,免疫細胞PHENOTYPING,BCL-2在凋亡細胞內的表達等等。WB只能看一個細胞群體的蛋白表達量,因此精細度難以和FLOW相比。FLOW的缺點是儀器比較貴,而且要專門的技術人員來操作。