熒光原位雜交的熒光原位雜交
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。探針首先與某種介導分子(reporter molecule)結合,雜交后再通過免疫細胞化學過程連接上熒光染料。FISH的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯的單克隆抗體與探針分子特異性結合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析。FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長期保存、能同時顯示多種顏色等優點,不但能顯示中期分裂相,還能顯示于間期核。同時在熒光原位雜交基礎上又發展了多彩色熒光原位雜交技術和染色質纖維熒光原位雜交技術.。 對于利用rRNA的熒光原位雜交來說,如下原因可導致較......閱讀全文
熒光原位雜交的熒光原位雜交
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。探針首先與某種介導分子(reporter molecule)結
熒光原位雜交實驗——熒光原位雜交技術
熒光原位雜交可應用于:(1)動植物基因組結構研究;(2)染色體精細結構變異分析;(3)病毒感染分析;(4)腫瘤遺傳學和基因組進化研究。實驗方法原理用已知的標記單鏈核酸為探針,按照堿基互補的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛
原位雜交與熒光原位雜交
一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH) 是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛應
熒光原位雜交介紹
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導分子(reporter molecule)結
熒光原位雜交實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用已知的標記單鏈核酸為探針,按照堿基互補的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱軸呈線性排列,因而可以探針直接與染色體進行雜交從而將特定的基因在染色體上
RNA熒光原位雜交
原位雜交:在研究DNA分子復制原理的基礎上發展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,能過氫鍵結合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點,應帶有標記的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、地高辛等非放射性物質)DAN或 RNA
熒光原位雜交實驗
實驗方法原理 熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變
熒光原位雜交實驗
?實驗原理熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變異分析、
FISH熒光原位雜交實驗(原位雜交)
1. 實驗目的??????? 通過實驗了解熒光原位雜交技術的基本原理和在生物學、醫學領域的應用。掌握原位雜交技術的操作方法,熟練掌握熒光顯微鏡的使用方法。2. 實驗原理??????? 熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺
熒光原位雜交的簡介
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導分子(reporter molecul
熒光原位雜交的背景
對于利用rRNA的熒光原位雜交來說,如下原因可導致較低的熒光信號強度: 較低的細胞核糖體含量 較低的細胞周邊的通透性 較低的目標序列可接觸性(由于rRNA的折疊產生的構象,有些位置與rRNA分子內其他鏈或其他rRNA或蛋白緊密接觸,從而使探針無法和目標序列雜交) 為檢驗細胞中的目標序列是
熒光原位雜交的特點
原位雜交的探針按標記分子類型分為放射性標記和非放射性標記。用同位素標記的放射性探針優勢在于對制備樣品的要求不高,可以通過延長曝光時間加強信號強度,故較靈敏。缺點是探針不穩定、自顯影時間長、放射線的散射使得空間分辨率不高、及同位素操作較繁瑣等。采用熒光標記系統則可克服這些不足,這就是FISH技術。
熒光原位雜交的應用
該技術不但可用于已知基因或序列的染色體定位,而且也可用于未克隆基因或遺傳標記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。 FISH最初用于中期染色體。從正在分化的細胞核中制備的這種染色體是高度凝縮的,每條染色體都具有可識別的形態,它們染色后將顯現出特征性的著絲粒位置
熒光原位雜交的原理
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世紀80年代末在放射性原位雜交技術基礎上發展起來的一種非放射性分子生物學和細胞遺傳學結合的新技術,是以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。
熒光原位雜交的發展
熒光原位雜交技術問世于20世紀70年代后期。1977年,熒光標記的抗體被應用于識別特異性DNA—RNA雜交I I。1980年,J.G.Baunlan等將應用化學偶聯的方法將熒光素結合到RNA探針上用于直接快速的特異性靶序列檢測。
熒光原位雜交的概念
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世紀80年代末在放射性原位雜交技術基礎上發展起來的一種非放射性分子生物學和細胞遺傳學結合的新技術,是以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。
原位雜交儀—熒光原位雜交相關解釋
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導分子(reporter molecule
熒光原位雜交技術簡介
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世紀80年代末在放射性原位雜交技術基礎上發展起來的一種非放射性分子生物學和細胞遺傳學結合的新技術,是以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。
FISH-熒光原位雜交實驗
實驗概要1. 通過實驗了解熒光原位雜交技術的基本原理和實驗技術 2. 掌握原位雜交技術的操作方法及熒光顯微鏡的使用方法 3. 了解其在生物學、醫學領域的應用實驗原理熒光原位雜交(Fluorescence ?in situ hybridization ?FISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20
熒光原位雜交技術詳解
1974年Evans首次將染色體顯帶技術和染色體原位雜交聯合應用,提高了定位的準確性。20世紀70年代后期人們開始探討熒光標記的原位雜交,即FISH技術。1981年Harper成功地將單拷貝的DNA序列定位到G顯帶標本上,標志著染色體定位技術取得了重要進展。20世紀90年代,隨著人類基因組計劃的
熒光原位雜交實驗步驟
熒光原位雜交實驗步驟1)探針變性將探針在75oC恒溫水浴中溫育5min,立即置0oC,5~10min,使雙鏈DNA探針變性。2)標本變性①將制備好的染色體玻片標本于50oC培養箱中烤片2~3h。(經Giemsa染色的標本需預先在固定液中退色后再烤片)。?????? ②取出玻片標本,將其浸在70~75
熒光原位雜交技術的原理
生命科學的發展,生物技術的進步使我們對疾病本質的認識不斷地深入,也使我們擁有更多新的治療方法和藥物應對疾病的威脅。如何準確有效地利用這些新的治療方法和藥物治愈疾病是我們迫切需要研究的內容。如何對疾病進行正確的分型和診斷卻是上述工作的基礎。只有全面地把握病情,并在此基礎上進行準確的判斷和分析,才能為病
熒光原位雜交技術的背景
對于利用rRNA的熒光原位雜交來說,如下原因可導致較低的熒光信號強度: 較低的細胞核糖體含量 較低的細胞周邊的通透性 較低的目標序列可接觸性(由于rRNA的折疊產生的構象,有些位置與rRNA分子內其他鏈或其他rRNA或蛋白緊密接觸,從而使探針無法和目標序列雜交) 為檢驗細胞中的目標序列是
熒光原位雜交技術的應用
該技術不但可用于已知基因或序列的染色體定位,而且也可用于未克隆基因或遺傳標記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。 FISH最初用于中期染色體。從正在分化的細胞核中制備的這種染色體是高度凝縮的,每條染色體都具有可識別的形態,它們染色后將顯現出特征性的著絲粒位置
熒光原位雜交技術的問世
熒光標記技術(FISH)指利用一些能發射熒光的物質共價結合或物理吸附在所要研究分子的某個基團上,利用它的熒光特性來提供被研究對象的信息。 上述試題的技術是在原熒光標記技術基礎上發展起來的熒光原位雜交技術。 1969年,Gall和Pardue等首次將同位素探針用于原位雜交實驗,獲得成功。 1
熒光原位雜交技術的特點
原位雜交的探針按標記分子類型分為放射性標記和非放射性標記。用同位素標記的放射性探針優勢在于對制備樣品的要求不高,可以通過延長曝光時間加強信號強度,故較靈敏。缺點是探針不穩定、自顯影時間長、放射線的散射使得空間分辨率不高、及同位素操作較繁瑣等。采用熒光標記系統則可克服這些不足,這就是FISH技術。
熒光原位雜交的方法介紹
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世紀80年代末在放射性原位雜交技術基礎上發展起來的一種非放射性分子生物學和細胞遺傳學結合的新技術,是以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。
熒光原位雜交的技術原理
熒光原位雜交技術技術原理是將熒光素直接或間接標記的核酸探針[或生物素、地高辛、dinit rophenyl(I)NP)、aminoacetylAAFfluorine(AAF)等標記的核酸探針與待測樣本中的核酸序列按照堿基互補配對的原則進行雜交,經洗滌后直接在熒光顯微鏡下觀察。熒光原位雜交技術是一種重