酶聯免疫法的檢測方法
雙抗體夾心法 雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下: 一、將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結合的抗體及雜質。 二、加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。 三、加酶標抗體:使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。 四、加底物:夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產物。根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。 根據同樣原理,將大分子抗體分別制備固相抗原和酶標抗原結合物,即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。 在臨床檢驗中,此法適用于檢驗各種蛋白質等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標用的抗體......閱讀全文
酶聯免疫法簡介
酶聯免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,用血清來進行檢測。 酶聯免疫法是利用抗體與酶復合物結合顯色的原理,并保持抗體免疫活性,其已成為分析化學領域中的前沿課題。
什么是酶聯免疫法?
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。 1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Lin
什么是酶聯免疫法
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked
什么是酶聯免疫法
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked
什么是酶聯免疫法
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked
酶聯免疫法的原理
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原
什么是酶聯免疫法
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked
什么是酶聯免疫法
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked
酶聯免疫法的原理
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原
酶聯免疫法的原理
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原
酶聯免疫法的檢測方法
雙抗體夾心法 雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下: 一、將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結合的抗體及雜質。 二、加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。 三、加酶標抗
酶聯免疫法的檢測步驟
ELISA用血清來檢測,首先血液要經過至少半個小時的凝集,然后取血清。將酶復合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽性對照,還有就是質控品(這是嚴格的要求,它的范圍必須在質控范圍內)。經過一個小時的孵育,然后洗板,加底物,半個小時避光反應后加終止液即完成反應部分,然后就是讀數。由數值來判斷結果的陰性
酶聯免疫法的效果測定
酶標抗體標記效果測定:測定內容包括酶和抗體活性、結合物中酶含量和IgG含量、酶與IgG摩爾比值以及結合率。
酶聯免疫法的檢測步驟
ELISA用血清來檢測,首先血液要經過至少半個小時的凝集,然后取血清。將酶復合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽性對照,還有就是質控品(這是嚴格的要求,它的范圍必須在質控范圍內)。經過一個小時的孵育,然后洗板,加底物,半個小時避光反應后加終止液即完成反應部分,然后就是讀數。由數值來判斷結果的陰性
酶聯免疫法的檢測方法
雙抗體夾心法 雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下: 一、將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結合的抗體及雜質。 二、加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。 三、加酶標抗
酶聯免疫法的檢測步驟
ELISA用血清來檢測,首先血液要經過至少半個小時的凝集,然后取血清。將酶復合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽性對照,還有就是質控品(這是嚴格的要求,它的范圍必須在質控范圍內)。經過一個小時的孵育,然后洗板,加底物,半個小時避光反應后加終止液即完成反應部分,然后就是讀數。由數值來判斷結果的陰性
酶聯免疫法的優缺點
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的
酶聯免疫(ELISA)法的影響因素
酶聯免疫(ELISA)是如今檢驗科常用的免疫學檢測方法之一,其操作簡單,無須特殊設備,使其在各級醫院都有應用。但是,如果忽視了影響其結果的因素,難免會造成假陰性或假陽性,因此,了解影響實驗的因素,減少差錯事故的發生是極其必要的。素質因素實驗室人員的素質主要包括五個方面:思想素質、文化素質、技術素質、
酶聯免疫法的注意事項
1 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。 2 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括: ⑴ 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,
硝基呋喃類檢測—酶聯免疫法
硝基呋喃簡介: 硝基呋喃類(Nitrofurans)抗菌劑是一種廣效性抗生素,因價格較低廉且療效佳,廣泛用于畜禽及水產養殖魚類,用以治療由大腸桿菌或沙門式桿菌所引起之腸炎,養殖魚之疥瘡、赤鰭病、潰瘍病等,于飼料中添加或養殖藥浴使用。 硝基呋喃類抗菌劑常見有以下四種藥物———呋喃唑酮
簡述酶聯免疫法的檢測步驟
ELISA用血清來檢測,首先血液要經過至少半個小時的凝集,然后取血清。將酶復合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽性對照,還有就是質控品(這是嚴格的要求,它的范圍必須在質控范圍內)。經過一個小時的孵育,然后洗板,加底物,半個小時避光反應后加終止液即完成反應部分,然后就是讀數。由數值來判斷結果的陰性
酶聯法檢測人類免疫缺陷病毒
[測定方法] ELISA法 [方法學原理] 在微孔板上預包被高純度基因重組HIV(1型十Ⅱ型),與樣品中抗HIV抗體反應,同時加入HRP標記HIV(1型+Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用顯色。通過酶標儀檢測吸光度(OD值)從而判定樣品中HIV抗體的存在與否。 [標本準備] 靜脈抽血2ml,不
硝基呋喃類檢測—酶聯免疫法
硝基呋喃簡介:??? 硝基呋喃類(Nitrofurans)抗菌劑是一種廣效性抗生素,因價格較低廉且療效佳,廣泛用于畜禽及水產養殖魚類,用以治療由大腸桿菌或沙門式桿菌所引起之腸炎,養殖魚之疥瘡、赤鰭病、潰瘍病等,于飼料中添加或養殖藥浴使用。硝基呋喃類抗菌劑常見有以下四種藥物———呋喃唑酮、呋喃它酮、呋
酶聯免疫法的原理介紹臨床檢驗
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。醫學教育|網搜集整理用洗滌的方法使固相載體
酶聯免疫法檢測黃曲霉毒素
ELISA法也是近年來研究開發出來的一種較為新穎的方法。其原理是根據抗體和抗原之間特異性的免疫學反應,最后用測定酶活力的方法來增加測定的靈敏度。 該方法檢測速度快、對人體危害小、但重復性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽性概率較高、需要配置專門的酶標儀,且對一些富含鹽和脂肪的試樣需進行額外的處理
酶聯法檢測人類免疫缺陷病毒HIV
實驗概要本實驗用ELISA法檢測了人類免疫缺陷病毒HIV。實驗原理在微孔板上預包被高純度基因重組HIV(1型加Ⅱ型),與樣品中抗HIV抗體反應,同時加入HRP標記HIV(1型加Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用顯色。通過酶標儀檢測吸光度(OD值)從而判定樣品中HIV抗體的存在與否。主要試劑1.預包被微
酶聯法檢測人類免疫缺陷病毒HIV
實驗概要本實驗用ELISA法檢測了人類免疫缺陷病毒HIV。實驗原理在微孔板上預包被高純度基因重組HIV(1型加Ⅱ型),與樣品中抗HIV抗體反應,同時加入HRP標記HIV(1型加Ⅱ型)抗原。然后用TMB底物作用顯色。通過酶標儀檢測吸光度(OD值)從而判定樣品中HIV抗體的存在與否。主要試劑1.預包被微
關于酶聯免疫法的試劑的應用
在臨床檢驗中一般采用商品試劑盒進行測定。ELISA中有三個必要的試劑:免疫吸附劑、結合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分: ⑴已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);⑵酶標記的抗原或抗體(結合物); ⑶酶的底物; ⑷陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制
酶聯免疫法的基本原理
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合
酶聯免疫(ELISA)法的注意事項
1、操作前應對實驗的物理參數有充分的了解,如環境溫度(保持在18 C~25℃)、反應孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。2、正確使用加樣器加樣器應垂直加入標本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣