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通常膠在30MIN-1H內凝。如果凝的太慢,可能是TEMED,APS劑量不夠或者失效。APS應該現配現用,TEMED不穩定,易被氧化成黃色。 如果凝的太快,可能是APS和TEMED用量過多,此時膠太硬易裂,電泳時易燒膠。......閱讀全文
通常膠在30MIN-1H內凝。如果凝的太慢,可能是TEMED,APS劑量不夠或者失效。APS應該現配現用,TEMED不穩定,易被氧化成黃色。?如果凝的太快,可能是APS和TEMED用量過多,此時膠太硬易裂,電泳時易燒膠。
?可能由于凝膠緩沖系統和電級緩沖系統地PH選擇錯誤,即緩沖系統地PH和被分離物質的等電點差別太小,或緩沖系統的離子強度太高。
“鬼帶”就是在跑大分子構象復雜的蛋白質分子時,常會出現在泳道頂端(有時在濃縮膠中)的一些大分子未知條帶或加樣孔底部有沉淀,主要由于還原劑在加熱的過程中被氧化而失去活性,致使原來被解離的蛋白質分子重新折疊結合和亞基重新締合,聚合成大分子,其分子量要比目標條帶大,有時不能進入分離膠。但它卻于目標條帶有相
主要是樣品融解效果不佳或分離膠濃度過大引起的。?處理辦法:加樣前離心;選擇適當的樣品緩沖液,加適量樣品促溶劑;電泳緩沖液時間過長,重新配制;降低凝膠濃度。
原因：電泳中條帶很粗是常見的事,主要是未濃縮好的原因。?處理辦法:適當增加濃縮膠的長度;保證濃縮膠貯液的pH正確(6.7);適當降低電壓;
主要是樣品不溶性顆粒引起的。?處理辦法:加樣前離心;加適量樣品促溶劑。
柱溫，對某些物質柱溫變動對出峰時間影響很大柱子，變換不同極性、不同填料的柱子出峰時間會變化，再者，柱子出現堵塞、塌陷等問題同樣有可能造成峰分裂或者時間異常。預柱同樣原理。流動相，有些試驗中流動相中PH、濃度、配比的微小變化也會導致時間異常，有些現用現配的與放置時間過長的流動相跑的峰時間也可能不一樣。
根據經驗，出峰異常有以下可能性：柱溫，對某些物質柱溫變動對出峰時間影響很大柱子，變換不同極性、不同填料的柱子出峰時間會變化，再者，柱子出現堵塞、塌陷等問題同樣有可能造成峰分裂或者時間異常。預柱同樣原理。流動相，有些試驗中流動相中PH、濃度、配比的微小變化也會導致時間異常，有些現用現配的與放置時間過長
通常膠在30MIN-1H內凝。如果凝的太慢，可能是TEMED，APS劑量不夠或者失效。APS應該現配現用，TEMED不穩定，易被氧化成黃色。 如果凝的太快，可能是APS和TEMED用量過多，此時膠太硬易裂，電泳時易燒膠。
聚丙烯酰胺的作用:丙烯酰胺與為蛋白質電泳提供載體,其凝固的好壞直接關系到電泳成功與否,與促凝劑及環境密切相關;?制膠緩沖液:濃縮膠選擇pH6.7,分離膠選擇pH8.9,選擇tris-HCL系統；TEMED與AP:AP提供自由基；TEMED是催化劑,催化自由基引起的聚合反應進行;十二烷基硫酸鈉(SDS