血清補體溶解免疫復合物活性檢查過程
(1)酶-抗酶法: ①取HRP-抗HRP復合物0.2ml,加待測血清0.1ml,置尖底離心管,于37℃水浴1h,時時搖動混勻. ②加入PBS 1ml,3000r/min,離心15min. ③取上清0.5ml加底物溶液0.4ml,37℃ 1h呈色.加1mol/L NaOH 0.1ml終止反應,再加入PBS 3ml,測450nm吸光度. ④用PBS 0.1ml代替待測血清作為對照管調零. (2)放射免疫法: ①試驗組: A.用含Ca2、Mg2明膠巴比妥緩沖液1∶3稀釋待測血清45μ1,125I BSA-抗BSA復合物懸液5μl 37℃ 15min加冷PBS(pH7.2 0.15mol/L)1ml. B.1800r/min離心20min,棄上清,用γ-閃爍計數儀測沉淀cpm. ②對照組:自然溶解,正常人混合血清56℃滅活30min取45μl. 正常溶解:正常人混合新鮮血清,取45μl.對照組所加其他試劑同實驗組.......閱讀全文
血清補體溶解免疫復合物活性檢查過程
(1)酶-抗酶法: ①取HRP-抗HRP復合物0.2ml,加待測血清0.1ml,置尖底離心管,于37℃水浴1h,時時搖動混勻. ②加入PBS 1ml,3000r/min,離心15min. ③取上清0.5ml加底物溶液0.4ml,37℃ 1h呈色.加1mol/L NaOH 0.1ml終止反應,再加
血清補體溶解免疫復合物活性介紹
在補體的CRA中,旁路激活途徑(AP)起主導作用,傳統激活途徑僅為促進作用.補體CRA的機制是,在補體與IC相互作用時,AP的C3轉化酶大量裂解C3,形成的大量C3b嵌入到抗原抗體的格子狀結構中并牢固與抗體結合,使部分抗原抗體的結合鍵斷裂,較大的IC凝聚物變為較小的凝聚物,從而溶解于液相中.
臨床化學檢查方法介紹血清補體溶解免疫復合物活性
血清補體溶解免疫復合物活性介紹: 在補體的CRA中,旁路激活途徑(AP)起主導作用,傳統激活途徑僅為促進作用。補體CRA的機制是,在補體與IC相互作用時,AP的C3轉化酶大量裂解C3,形成的大量C3b嵌入到抗原抗體的格子狀結構中并牢固與抗體結合,使部分抗原抗體的結合鍵斷裂,較大的IC凝聚物變為較小
免疫學實驗血清補體溶解免疫復合物活性介紹
血清補體溶解免疫復合物活性介紹: 在補體的CRA中,旁路激活途徑(AP)起主導作用,傳統激活途徑僅為促進作用。補體CRA的機制是,在補體與IC相互作用時,AP的C3轉化酶大量裂解C3,形成的大量C3b嵌入到抗原抗體的格子狀結構中并牢固與抗體結合,使部分抗原抗體的結合鍵斷裂,較大的IC凝聚物
血清補體溶解免疫復合物活性的正常值
(1)酶-抗酶法:正常人CRA(X±SD)為0.38±0.12,正常參考范圍可以為X±2SD即0.14-0.62。 (2)放射免疫法:成人溶解率正常值為66.0±7.4%。
血清補體溶解免疫復合物活性的臨床意義
患自身免疫病如系統性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、慢性活動性肝炎、腎小球腎炎等,補體裂解復合物的能力低下。補體系統正常可防止病理性IC的出現或使IC激活補體引起的炎癥損傷減輕。而補體的先天或后天缺陷及補體系統的激活受阻可能是病理性IC出現的重要原因。
血清補體溶解免疫復合物活性的注意事項
酶-抗酶法: (1)補體并非對所有抗原抗體復合物都溶解,只能溶解可溶性抗原(多糖、蛋白、半抗原等)形成的IC。 (2)其他注意事項同酶免疫技術節。
血清補體溶解免疫復合物活性的臨床意義及注意事項
臨床意義 患自身免疫病如系統性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、慢性活動性肝炎、腎小球腎炎等,補體裂解復合物的能力低下。補體系統正常可防止病理性IC的出現或使IC激活補體引起的炎癥損傷減輕。而補體的先天或后天缺陷及補體系統的激活受阻可能是病理性IC出現的重要原因。 注意事項 酶-抗酶法: (1)
血清補體溶解免疫復合物活性的正常值及臨床意義
正常值 (1)酶-抗酶法:正常人CRA(X±SD)為0.38±0.12,正常參考范圍可以為X±2SD即0.14-0.62。 (2)放射免疫法:成人溶解率正常值為66.0±7.4%。 臨床意義 患自身免疫病如系統性紅斑狼瘡、類風濕性關節炎、慢性活動性肝炎、腎小球腎炎等,補體裂解復合物的能力
血清HBsAg免疫復合物檢查過程
1 取已包被固相載體反應板條安放在框架上,并編號。每孔加待測血清50μl,每板均做陽性、陰性及空白對照。 2 然后每孔加入酶標記抗HBs 1滴,置微型振蕩器上振蕩1~2min,放37℃水浴30min。 3 取出反應板,甩去孔內液體,用洗液洗5次,每次洗滌靜置1min,風干后加底物溶液(A
補體活化過程對免疫復合物的清除
補體在活化過程中生成的中間產物,對抗原抗體復合物有很強的親和力,可共價結合到免疫復合物上,然后通過補體的其他效應對免疫復合物產生抑制或清除作用。 常通過以下幾種方式對免疫復合物的清除: (1)吞噬調理作用; (2)免疫粘附作用; (3)免疫復合物抑制作用。
血清總補體檢查過程
1)將待檢血清按1∶20稀釋,吸取待檢血清0.2ml于一試管中,加入巴比妥緩沖液3.8ml,混勻。 (2)取10支試管加液混勻。 (3)將上述各管先與50%溶血標準管作初步目視比較,選擇與標準管相接近的兩管,用分光光度計在波長542nm讀數,求出二者中更加接近標準光密度數的一管。根據此管中加
血清補體總活性測定
1、原理補體能使抗體致敏的羊紅細胞發生溶血反應,根據溶血程度可測定補體總活性。以溶血百分率作縱坐標,相應的血清量為橫坐標繪圖,可知在50%溶血附近補體的量與溶血程度呈直線關系。因此以50%溶血作為終點較以100%溶血作為終點更為敏感。故稱為50%溶血試驗,即 CH50(50%complement
血清補體C4檢查過程
抽取靜脈血,分離血清盡快進行測定
血清補體C9檢查過程
靜脈采血后,分離血清進行定量測定。將待檢血清按1∶20稀釋,吸取待檢血清0.2ml于一試管中,加入巴比妥緩沖液3.8ml,混勻。選擇與標準管相接近的兩管,用分光光度計在波長542nm讀數,求出二者中更加接近標準光密度數的一管。根據此管中加入稀釋血清的量按標準求出總補體值。
血清HBsAg免疫復合物檢查作用
乙型肝炎表面抗原免疫復合物測定對了解乙型肝炎慢性病變有一定意義。陽性提示機體對乙型肝炎病毒的反應。但在某些情況下可造成免疫性肝細胞病理損傷,HBsAg免疫復合物大量沉積于血管、腎臟等組織,可引起炎癥反應,發生乙肝的肝外表現。
免疫學實驗血清補體旁路途徑活性介紹
血清補體旁路途徑活性介紹: 本試驗阻斷補體傳統活化途徑,加入兔紅細胞使B因子活化,導致補體旁路激活,兔紅細胞遭受損傷而發生溶血。溶血率與補體旁路活性之間的關系類似CH50。 血清補體旁路途徑活性正常值: 本法測得的健康人正常值為50-100u/ml。 血清補體旁路途徑活性
免疫學實驗血清總補體活性(CH50)介紹
血清總補體活性(CH50)介紹: 補體具有溶解靶細胞、促進吞噬、參與炎癥反應等功能,同時補體還在免疫調節、清除免疫復合物、穩定機體內環境、參與變態反應及自身免疫性疾病起關鍵性作用。總補體活性和單個補體成分含量的變化,對某些疾病的診斷和療效觀察具有重要意義。總補體的測定主要反映補體經傳統途徑
血清補體C4裂解產物檢查過程
(1)制備抗體瓊脂糖板 取已融化的10.0g/L瓊脂糖凝膠與適當濃度的抗C4血清混合,澆板(8cm×8.5cm),待冷卻凝固后打孔。 (2)在距一邊1cm處打孔8個,孔徑為3mm,孔間距5mm,挑去孔內瓊脂糖。 (3)各孔內分別加入1∶4稀釋的待檢血清和不同濃度的C4參考血清10μl。以三層
循環免疫復合物(cic)的檢查過程
同抗補體、膠固素結合、PEG沉淀試驗法。
血清補體檢測之總補體溶血活性測定?與血清C3測定
補體是血清中具有酶活性的一組不耐熱的球蛋白,是抗體發揮溶細胞作用的必要補充條件。它由參與補體激活經典途徑的9種成分C1(C1q、C1r、C1s)~C9、旁路途徑的3種成分及其衍生物、B、D、P和H等因子組成。補體廣泛參與機體滅活病原體的免疫反應,也參與破壞自身組織或細胞的免疫損傷。 總補體溶血
臨床化學檢查方法介紹血清補體旁路途徑活性介紹
血清補體旁路途徑活性介紹: 本試驗阻斷補體傳統活化途徑,加入兔紅細胞使B因子活化,導致補體旁路激活,兔紅細胞遭受損傷而發生溶血。溶血率與補體旁路活性之間的關系類似CH50。血清補體旁路途徑活性正常值: 本法測得的健康人正常值為50-100u/ml。血清補體旁路途徑活性臨床意義: 在許多病理情況
臨床化學檢查方法介紹血清總補體活性(CH50)介紹
血清總補體活性(CH50)介紹: 補體具有溶解靶細胞、促進吞噬、參與炎癥反應等功能,同時補體還在免疫調節、清除免疫復合物、穩定機體內環境、參與變態反應及自身免疫性疾病起關鍵性作用。總補體活性和單個補體成分含量的變化,對某些疾病的診斷和療效觀察具有重要意義。總補體的測定主要反映補體經傳統途徑活化的活
循環免疫復合物補體相關測定法
IgG和IgM類抗體與抗原結合后,重鏈CH2區的補體結合點暴露,可以固定C1q并激活補體的系列反應,這是利用補體有關技術檢測免疫復合物的基礎。 1.C1q結合試驗:將待檢血清先行加熱56℃30min,以滅活其中的補體和破壞已與CIC結合的C1q,空出補體結合點。CIC與C1q的結合可用多種方法
血清總補體溶血活性(CH50)測定
綿羊紅細胞(SRBC),與相應抗體(溶血素)結合后,可激活待檢血清中的補體而導致SRBC溶血。其溶血程度與血清中補體的含量和功能有關。由于補體含量與溶血程度之間呈正相關,但不是直線關系,而呈S曲線關系,故通常取反應曲線中間部位即50%溶血(CH50)為判定終點。由于抗原抗體復合物激活的是補體的經典途
血清總補體溶血活性(CH50)測定
綿羊紅細胞(SRBC),與相應抗體(溶血素)結合后,可激活待檢血清中的補體而導致SRBC溶血。其溶血程度與血清中補體的含量和功能有關。由于補體含量與溶血程度之間呈正相關,但不是直線關系,而呈S曲線關系,故通常取反應曲線中間部位即50%溶血(CH50)為判定終點。由于抗原抗體復合物激活的是補體的經典途
血清總補體檢查作用
血清總補體對一些疾病的診斷、病因研究及預后判斷都有一定意義。但補體量的降低,并不一定就是免疫紊亂或免疫性疾病。現知缺血、凝固性壞死和中毒性壞死,可使組織釋放較多的蛋白分解酶,導致補體溶血活性和每個補體成分下降。某些先天性補體缺乏癥也可出現某個補體成分的缺損,因此需對具體情況作詳細分析。
血清補體C4的注意事項及檢查過程
注意事項 (1)抗原、抗體比例要適宜。抗原過濃不能得到圓錐狀尖峰,而抗體太濃使沉淀峰太低,影響試驗的靈敏度。 (2)加樣后馬上電泳,且標本不要太多,以防止峰形變寬。 (3)C4不很穩定,在4℃貯存2周或―20℃60d均可使C4值增加36%左右。而在1周內還是相對穩定的。 檢查過程 (1
血清補體旁路途徑活性正常值
本法測得的健康人正常值為50-100u/ml。
血清補體旁路途徑活性臨床意義
在許多病理情況下,血清補體含量可以發生變化,因此臨床上觀察補體含量的動態變化,如總補體活性、補體個別成分特別是C3和C4量的變化等,對一些疾病的診斷、病因研究及預后判斷都有一定意義。但補體量的降低,并不一定就是免疫紊亂或免疫性疾病。現知缺血、凝固性壞死和中毒性壞死,可使組織釋放較多的蛋白分解酶,