反轉錄酶(reverse transcriptase,也可寫成逆轉錄酶) 又稱為依賴RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中發現了一種特殊的DNA 聚合酶,該酶以RNA 為模板,以dNTP 為底物,tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 為引物,在tRNA 3'-OH 末端上,根據堿基配對的原則,按5'-3'方向合成一條與RNA 模板互補的DNA 單鏈,這條DNA 單鏈叫做互補DNA (complementary DNA,CDNA)。[1] 反轉錄酶(Reverse transcriptase)是以RNA為模板指導三磷酸脫氧核苷酸合成互補DNA(cDNA)的酶。哺乳類C型病毒的反轉錄酶和鼠類B型病毒的反轉錄酶都是一條多肽鏈。鳥類RNA病毒的反轉錄酶則由兩上亞基結構。真核生物中也都分離出具有不同結構的反轉錄酶。......閱讀全文
反轉錄酶(reverse transcriptase,也可寫成逆轉錄酶) 又稱為依賴RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中發現了一種特殊的DNA 聚合酶,該酶以RNA 為模板,以dNTP 為底物,tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 為引物,在tRNA 3'
細胞的衰老和老化被認為和染色體末端由重復的DNA(TTAGGG)序列所組成的端粒序列的丟失相關。隨著細胞的每次分裂,端粒會丟失50~200bp,當端粒縮短到一定程度就不再保護染色體免受重組或降解,細胞分裂的控制點就此得到信號而產生作用,可使細胞分裂停止并進入老化過程致細胞死亡。端粒長度的維持即重
體內有些酶可在其他酶的作用下,將酶的結構進行共價修飾,使該酶活性發生改變,這種調節稱為共價修飾調節(covalent modification regulation),這類酶稱為修飾酶(prosessing enzyme)。 堿性磷酸酶去除5′-P,可防止二分子DNA片段5′端P基團自身空間障
基因工程涉及眾多的工具酶可粗略的分為限制酶,連接酶,聚合酶,核酸酶和修飾酶五大類。其中,以限制性核酸內切酶和DNA連接酶在分子克隆中的作用最為突出。 DNA限制性內切酶: 生物體內能識別并切割特異的雙鏈DNA序列的一種內切核酸酶。它是可以將外來的DNA切斷的酶,即能夠限制異源DNA的侵入并使
1.切口酶:在與200單位酶37oC保溫60分鐘后,超螺旋質粒保留在90%以上。 2.DNase測定:200單位酶與50ng3H-DNA37oC保溫60分鐘,分解出的放射性低于1%。 3.RNase測定:200單位酶與50ng3H-RNA37oC保溫60分鐘,分解出的放射性低于3%。 4.
由它催化轉錄合成的DNA稱為互補DNA(cDNA)。通常情況下,細胞內的轉錄應由DNA到RNA的,所得RNA為信使RNA(mRNA)供蛋白質合成作模板用。而在部分RNA病毒中,要實現自身擴增,必須具有DNA,因此先由RNA逆轉錄合成cDNA再由cDNA轉錄出RNA。逆轉錄酶可用RT—PCR,將R
內切酶,即限制性核酸內切酶。亦稱限制性核酸酶。它是一種能催化多核苷酸的鏈斷裂的酶,只對脫氧核糖核酸內一定堿基序列中某一定位置發生作用,把這位置的鏈切開。通過內切酶可以把某一個遺傳基因切下來,若再連在別的細胞的遺傳基因上,便可使這細胞具有新的遺傳特性。內切酶的發現和采用,使基因工程成為可能。
增強發光酶免疫分析(enhanced luminescence enzyme immunoassay, ELEIA )在發光系統中加入增強發光劑, 如對2碘苯酚等, 以增強發光信號,并在較長時間內保持穩定, 便于重復測量, 從而提高分析靈敏度和準確性。在全自動分析儀上, 還可通過計算機嚴密控
1、 測量準確,重復性好,具有質控功能,無須外接計算機即可自動提供31天質控數據及X平均值、 SD、CV值 2、 能做定性、定量、基因檢測 3、 開放型軟件,可適應目前國內外任何廠家的試劑 4、 可預設操作程序,并可儲存檢測結果 5、 檢測結果既可直接顯示在屏幕上,也可打印保存 6、
1、使用前每個組份輕輕混勻,然后2000rpm離心20s 2、取滅過菌且無核酸酶的0.2ml離心管,依次加入2~5μgRNAnμL 3、65℃保溫5min,然后冰浴5min; 4、往3步驟中的0.2ml離心管依次加入下列組份 RNase抑制劑(40u/μL)0.5μL 10×M-MLV