任何體內的生物反應都必須在調控的作用下,才有意義。翻譯的調控是十分精密復雜的。在原核生物里翻譯調控的基本單位不是單個的mRNA而是mRNA中的單個閱讀框。以ATP合成酶為例,在原核生物里,該酶包含A、B、C、D、E、F、G、H等多個亞基,其基因拷貝均為一份,在轉錄時轉錄到同一個mRNA上。而實際每個酶中各個亞基的比例并非均等,如E亞基的需求量是C亞基的10倍。這就必須要求在翻譯層面進行調控。相比于轉錄調控,翻譯調控更迅速、更高效,且可以通過對翻譯的調控進一步控制不同蛋白的空間特異性。同時翻譯調控也可以回復錯誤轉錄造成的危害。無論針對翻譯、轉錄還是復制,研究調控首先要研究一個生理過程的限速步驟。限速步驟的調控才具有重要的生物學意義。在這里要引入一個新的單位:核糖體密度(RD)。其計算公式如下 : 其中 表示核糖體數量, 表示ORF的單位長度。單......閱讀全文
任何體內的生物反應都必須在調控的作用下,才有意義。翻譯的調控是十分精密復雜的。在原核生物里翻譯調控的基本單位不是單個的mRNA而是mRNA中的單個閱讀框。以ATP合成酶為例,在原核生物里,該酶包含A、B、C、D、E、F、G、H等多個亞基,其基因拷貝均為一份,在轉錄時轉錄到同一個mRNA上。而實際每個
上游開放閱讀框uORF廣泛存在于動植物基因的5’非翻譯區,通常能夠抑制下游主開放閱讀框pORF的翻譯。中國科學院遺傳與發育生物學研究所高彩霞研究組率先利用CRISPR/Cas9技術對uORF進行編輯,發現能夠顯著提高目標基因的翻譯效率,建立了利用基因組編輯調控內源基因蛋白質翻譯效率的新方法,相關成果
上游開放閱讀框uORF廣泛存在于動植物基因的5’非翻譯區,通常能夠抑制下游主開放閱讀框pORF的翻譯。中國科學院遺傳與發育生物學研究所高彩霞研究組率先利用CRISPR/Cas9技術對uORF進行編輯,發現能夠顯著提高目標基因的翻譯效率,建立了利用基因組編輯調控內源基因蛋白質翻譯效率的新方法,相關
上游開放閱讀框uORF廣泛存在于動植物基因的5’非翻譯區,通常能夠抑制下游主開放閱讀框pORF的翻譯。中國科學院遺傳與發育生物學研究所高彩霞研究組率先利用CRISPR/Cas9技術對uORF進行編輯,發現能夠顯著提高目標基因的翻譯效率,建立了利用基因組編輯調控內源基因蛋白質翻譯效率的新方法,相關
此過程在真核細胞和原核細胞中高度類似,下面只以原核細胞為例進行討論。涉及到的因子主要有EF·Tu和EF·G,在真核細胞中對應的名稱分別是是eEF1和eEF2。A. tRNA的轉運和入位(1)非起始AA·tRNA結合EF·Tu·GTP形成一個三元復合物;(2)該三元復合物結合至核糖體P位點,tRNA反
本過程細胞主要需完成以下目標:(1)使翻譯停止,不再有新的氨基酸摻入;(2)釋放合成的多肽鏈;(3)釋放結合在mRNA上的各組分;(4)確保核糖體大小亞基以及重要因子的重復利用。原核細胞和真核細胞在此過程的處理上有明顯不同,下面將分開介紹。?(一)原核細胞A.肽鏈的釋放(1)釋放因子RF1/2 (t
5′端非翻譯區的二極結構影響到調控蛋白與帽結構的接近,阻礙40S前起始復合體的裝配和在mRNA上的掃描,起負調控的作用。但若二極結構位于 AUG的近下游,(最佳距離為14 nt),將會使移動的40亞基停靠在AUG位點,增強起始反應。真核的系列翻譯起始因子可使二極結構解鏈,使翻譯復合體順利通過
原核生物基因表達的調控主要在轉錄水平上進行,而真核生物由于RNA較為穩定,所以除了存在轉錄水平的調控以外,在翻譯水平上也進行各種形式的調控。在蛋白質生物合成的起始反應中主要涉及到細胞中的四種裝置,這就是:1.核糖體,它是蛋白質生物合成的場所;2.蛋白質合成的模板mRNA它是傳遞基因信息的媒介;3.可
方法 ? 1:重組載體構建同前面實驗 2:誘導表達:提取帶重組片斷的質粒DNA轉化BL21(DE3)受體菌37℃活化過夜,轉入新鮮培養基搖菌至對數生長期(約2-3小時),加入IPTG至終濃度0.4mM,繼續培養6小時 3:表達產物提取及鑒定見實驗十九
1體外TNTRT7 轉錄/翻譯系統表達重組基因體外翻譯是研究基因表達、基因調控的一類重要技術,該技術可廣泛用于基因表達量、啟動序列等調控因子的確立,并結合PTT實驗篩選天然突變或人工誘變的基因片段,還可用來進行蛋白和DNA結合方面的研究。早期的體外翻譯研究大多是提取mRNA然后通過網織紅細胞或麥胚系