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    膜片鉗技術的基本介紹

    1976年德國馬普生物物理研究所Neher和Sakmann創建了膜片鉗技術(patch clamp recording technique)。這是一種以記錄通過離子通道的離子電流來反映細胞膜單一的或多個的離子通道分子活動的技術。它和基因克隆技術(gene cloning)并架齊驅,給生命科學研究帶來了巨大的前進動力。 膜片鉗技術是用微玻管電極(膜片電極或膜片吸管)接觸細胞膜,以千兆歐姆以上的阻抗使之封接,使與電極尖開口處相接的細胞膜的小區域(膜片)與其周圍在電學上分隔,在此基礎上固定點位,對此膜片上的離子通道的離子電流(pA級)進行監測記錄的方法 用場效應管運算放大器構成的I-V轉換器是測量回路的核心部分。在場效應管運算放大器的正負輸入端子為等電位,向正輸入端子施加指令電位時,由于短路負端子以及膜片都可等電位地達到鉗制的目的,當膜片微電極尖端與默片之間形成10GΩ以上封接時,其間的分流電流達到最小,橫跨膜片的電流可100......閱讀全文

    膜片鉗技術的基本介紹

      1976年德國馬普生物物理研究所Neher和Sakmann創建了膜片鉗技術(patch clamp recording technique)。這是一種以記錄通過離子通道的離子電流來反映細胞膜單一的或多個的離子通道分子活動的技術。它和基因克隆技術(gene cloning)并架齊驅,給生命科學研究

    關于膜片鉗的基本內容介紹

      膜片鉗又稱單通道電流記錄技術,用特制的玻璃微吸管吸附于細胞表面,使之形成10~100的密封(giga-seal),又稱巨阻封接,被孤立的小膜片面積為μm量級,內中僅有少數離子通道。然后對該膜片實行電壓鉗位,可測量單個離子通道開放產生的pA(10的負12次方安培)量級的電流,這種通道開放是一種隨機

    關于膜片鉗技術的應用介紹

      (1)與藥物作用有關的心肌離子通道  心肌細胞通過各種離子通道對膜電位和動作電位穩態的維持而保持正常的功能。近年來,國外學者在人類心肌細胞離子通道特性的研究中取得了許多進展,使得心肌藥理學實驗由動物細胞模型向人心肌細胞成為可能。  (2)對離子通道生理與病理情況下作用機制的研究  通過對各種生理

    膜片鉗技術的應用學科相關介紹

      膜片鉗技術發展至今,已經成為現代細胞電生理的常規方法,它不僅可以作為基礎生物醫學研究的工具,而且直接或間接為臨床醫學研究服務,  目前膜片鉗技術廣泛應用于神經(腦)科學、心血管科學、藥理學、細胞生物學、病理生理學、中醫藥學、植物細胞生理學、運動生理等多學科領域研究。  隨著全自動膜片鉗技術(Au

    電生理專題——膜片鉗技術基本原理與特點

      膜片鉗技術本質上也屬于電壓鉗范疇,兩者的區別關鍵在于:①膜電位固定的方法不同;②電位固定的細胞膜面積不同,進而所研究的離子通道數目不同。電壓鉗技術主要是通過保持細胞跨膜電位不變,并迅速控制其數值,以觀察在不同膜電位條件下膜電流情況。因此只能用來研究整個細胞膜或一大塊細胞膜上所有離子通道活動。目前

    膜片鉗技術的技術原理簡介

      膜片鉗技術是用玻璃微電極吸管把只含1-3個離子通道、面積為幾個平方微米的細胞膜通過負壓吸引封接起來,由于電極尖端與細胞膜的高阻封接,在電極尖端籠罩下的那片膜事實上與膜的其他部分從電學上隔離,因此,此片膜內開放所產生的電流流進玻璃吸管,用一個極為敏感的電流監視器(膜片鉗放大器)測量此電流強度,就代

    膜片鉗技術原理

    可興奮膜的電學模型????? 細胞膜由脂類雙分子層和和蛋白質構成。脂質層的電導很低,由于雙分子層的結構特點,形成了細胞的膜電容,通道蛋白的開閉狀況主要決定了膜電導的數值。在細胞膜的電學模型中,膜電容和膜電導構成了一個并聯回路。在細胞膜的電興奮過程中,脂質層膜電容的反應是被動的,其電流電壓曲線是線

    膜片鉗技術簡介

      膜片鉗技術被稱為研究離子通道的“金標準”。是研究離子通道的最重要的技術。目前膜片鉗技術已從常規膜片鉗技術(Conventional patch clamp technique)發展到全自動膜片鉗技術(Automated patch clamp technique)。  傳統膜片鉗技術每次只能記錄

    膜片鉗的發展歷史的介紹

      1980年Sigworth等在記錄電極內施加5-50 cmH2O的負壓吸引,得到10-100GΩ的高阻封接(Giga-seal),大大降低了記錄時的噪聲實現了單根電極既鉗制膜片電位又記錄單通道電流的突破。  1981年Hamill和Neher等對該技術進行了改進,引進了膜片游離技術和全細胞記錄技

    膜片鉗技術的操作步驟

      (1)膜片微電極的制作  拉制  膜片微電極是將玻璃毛細管用拉管儀拉制而成。  涂硅酮樹酯  將硅酮樹酯涂于微電極的最尖端以外的部分,然后將其通過加熱鎳鉻電阻線圈而烘干變固。  熱刨光  在顯微鏡下,將微電極尖端接近熱源進行熱刨光處理可提高巨阻抗封接的成功率。  充灌微電極液  用于灌充微電極的

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