反義RNA是指與mRNA互補后,能抑制與疾病發生直接相關基因的表達的RNA。它封閉基因表達,具有特異性強、操作簡單的特點,可用來治療由基因突變或過度表達導致的疾病和嚴重感染性疾病。根據反義RNA的作用機制可將其分為3類:Ⅰ類反義RNA直接作用于靶mRNA的S D序列和(或)部分編碼區,直接抑制翻譯,或與靶mRNA結合形成雙鏈RNA,從而易被RNA酶Ⅲ 降解;Ⅱ類反義RNA與mRNA的非編碼區結合,引起mRNA構象變化,抑制翻譯;Ⅲ類反義RNA則直接抑制靶mRNA的翻譯。......閱讀全文
反義RNA是指與mRNA互補后,能抑制與疾病發生直接相關基因的表達的RNA。它封閉基因表達,具有特異性強、操作簡單的特點,可用來治療由基因突變或過度表達導致的疾病和嚴重感染性疾病。根據反義RNA的作用機制可將其分為3類:Ⅰ類反義RNA直接作用于靶mRNA的S D序列和(或)部分編碼區,直接抑制翻譯,
反義RNA的分類和作用機制:下表總結了原核細胞內天然存在的11種反義RNA。這些反義RNA按其作用機制可經分為三大類。調節水平 反義RNA 靶RNA 分類 功能 來源轉錄后水平?micF RNA ompF mRNA 1A OmpF合成 染色體oop RNA cⅡmRNA 1B 溶菌-溶源?噬菌體sa
在原核生物中反義RNA具有多種功能,例如調控質粒的復制及其接合轉移,抑制某些轉位因子的轉位,對某些噬菌體溶菌-溶源狀態的控制等。下文僅舉數例。調控細菌基因的表達反義RNA對編碼CAP的基因的調控作用已如前述。這里再介紹一下micF RNA對ompF基因的表達的調控。ompF蛋白質是大腸桿菌的外膜蛋白
細胞中反義RNA的來源有兩種途徑:第一是反向轉錄的產物,在多數情況下, 反義RNA是特定靶基因互補鏈反向轉錄產物, 即產生mRNA和反義RNA的DNA是同一區段的互補鏈。第二種來源是不同基因產物,如OMPF基因是大腸桿菌的膜蛋白基因,與透性有關,其反義基因MICFZE則為另一基因。
反義RNA是指與mRNA互補的RNA分子,也包括與其它RNA互補的RNA分子。由于核糖體不能翻譯雙鏈的RNA,所以反義RNA與mRNA特異性的互補結合, 即抑制了該mRNA的翻譯。通過反義RNA控制mRNA的翻譯是原核生物基因表達調控的一種方式,最早是在E.coli 的產腸桿菌素的Col E1質粒中
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實驗材料 限制性內切核酸酶酶水解模板 DNA大腸桿菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ試劑、試劑盒 氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液轉錄緩沖液Tris-Cl鹽酸亞精胺NaCl胎盤RNase抑制物牛血清白蛋白RNA聚合酶DEPC儀器、耗材 DNA合成儀瓊脂糖凝膠電泳微量離心管實驗步驟 一、化學合成的 RN
RNA 也可以由線狀 DNA 為模板,通過 RNA 聚合酶(如T3、T7 或 SP6 ) 在體外合成。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗材料限制性內切核酸酶酶水解模板 DNA大腸桿菌 DNA 多聚酶胰 DNaseⅠ試劑、試劑盒氯仿苯酚乙醇DTTrNTP溶液轉錄緩沖液Tris-Cl鹽
反義RNA的分類和作用機制:下表總結了原核細胞內天然存在的11種反義RNA。這些反義RNA按其作用機制可經分為三大類。調節水平 反義RNA 靶RNA 分類 功能 來源轉錄后水平?micF RNA ompF mRNA 1A OmpF合成 染色體oop RNA cⅡmRNA 1B 溶菌-溶源?噬菌體sa
細胞中反義RNA的來源有兩種途徑:第一是反向轉錄的產物,在多數情況下, 反義RNA是特定靶基因互補鏈反向轉錄產物, 即產生mRNA和反義RNA的DNA是同一區段的互補鏈。第二種來源是不同基因產物,如OMPF基因是大腸桿菌的膜蛋白基因,與透性有關,其反義基因MICFZE則為另一基因。