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  • 關于單克隆抗體有限稀釋法克隆法介紹

    1.材料 (1)微量培養盤,盤內各孔于克隆化前一天培養小鼠腹腔細胞(即飼養細胞)每孔2萬~4萬。 (2)HT培養基 2.操作方法 (1)取出抗體陽性孔細胞,用HT培養液制成細胞懸液。并取樣進行臺盼蘭染色,計數。 (2)用HT培養液將細胞稀釋成200個/ml、40個/ml、20個/ml和的懸液。 (3)用吸管將細胞懸液分別種入微量培養盤,每孔0.05ml,細胞含量分別為10個/孔、2個/孔、1個/孔和0.5個/孔。 (4)5%CO2飽和濕度,37℃培養。 (5)每天用倒置顯微鏡觀察克隆生長情況,選擇只有一個集落生長的孔,棄掉兩個以上和沒有細胞生長的孔。 (6)克隆大量繁殖后,布滿孔底的1/3~1/2時,測培養液抗體。 (7)抗體陽性孔細胞,移到有飼養層的組織培養瓶中,并傳2~4代就可以脫離飼養細胞,建成克隆株。......閱讀全文

    糞便潛血單克隆抗體一步法試驗

    糞便潛血試驗已被視為消化道出血的重要篩選指標,其試驗方法主要分為化學方法和學方法兩大類,近年來為解決潛血試驗的特異性,已有應用免疫學方法的趨勢。我們對免疫學方法中的單克隆抗體(單抗)一步法進行了臨床和方法學的評價試驗,報告如下。   一、材料與方法   1.試劑及操作:單抗一步檢驗法試劑盒(

    cems稀釋法原理

    完全抽取法是先將煙氣從煙道抽取出來,然后送進分析儀器進行分析。一般采用較為成熟的分析法為紅外吸收法,可實現多組分的同時測量。根據抽取過程的不同,又可分為冷抽取法和熱抽取法,兩種抽取方法均需把樣氣進行加熱,然后經過濾器濾除煙塵。不同的是,熱抽取法是直接把高溫樣氣送入分析儀的光學腔內進行分析;冷抽取法則

    靶向克隆法

    靶向克隆法是一種新的基因克隆方法,該克隆方法的特點是:在基因克隆過程中不使用已有的DNA Ligase,而是使用新開發的靶向克隆酶。靶向克隆酶能夠使末端序列相同的雙鏈DNA(14bp-18bp)同源重組,從而達到克隆基因的目的。LP Recco酶,中文名:靶向克隆酶,無需傳統基因克隆所需要的限制性內

    關于單克隆抗體的動物免疫的介紹

      單克隆抗體制備的宿主動物一般選用BALB/c小鼠,鼠單抗的應用范圍相當廣泛,一些國內外公司均開發出了兔的單克隆抗體制備技術。  免疫原分為可溶性抗原和顆粒性(細胞)抗原,用無菌鹽水稀釋并與佐劑混合,腹腔注射抗原與佐劑徹底混勻后形成的穩定乳狀液,在免疫原提供持續的免疫應答基礎上進行加強免疫  周期

    關于單克隆抗體的研究進展介紹

      單克隆抗體藥物的發展起源于1975年,雜交瘤技術的問世使大量制備均一的鼠源單克隆抗體成為可能。1986年第一個抗移植后免疫排斥反應的鼠源單克隆抗體muromonab-CD3(OKT3),經美國食品藥品監督管理局(Food and Drug Administration, FDA)批準上市,但是來

    關于同位素稀釋法的簡介

      自從海維西(Hevesy)等于1932年提出同位素稀釋法以來,已經按照這種“稀釋”原理創建了多種分析方法,并廣泛地應用于有機物和無機物的測定。同位素稀釋法包括穩定同位素稀釋和放射性同位素稀釋。前者使用質譜計測量質量變化,后者使用計數器測量放射性比度(單位重量物質中的放射性強度)的變化。前者所用測

    關于單克隆抗體的簡介

      單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術來制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術是在細胞融合技術的基礎上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。  用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養成細胞群,

    關于單克隆抗體的定義

      單克隆抗體是人工制備的雜交瘤細胞生產的,雜交瘤細胞是由一個經抗原激活后的B細胞與一個骨髓瘤細胞融合形成。單克隆抗體優點:純度高,靈敏度高,特異性強,交叉反應少,制備的成本低。缺點:對技術有一定的要求,而且通過抗原的化學處理很容易丟失表位 。

    關于單克隆抗體的簡介

      1975年分子生物學家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在自然雜交技術的基礎上,創建立雜交瘤技術,他們把可在體外培養和大量增殖的小鼠骨髓瘤細胞與經抗原免疫后的純系小鼠B細胞融合,成為雜交細胞系,既具有瘤細胞易于在體外無限增殖的特性,又具有抗體形成細胞的合成和分泌特異性抗體的特點。將這種雜交瘤作單個細

    有限稀釋的定義

    中文名稱有限稀釋英文名稱limiting dilution定  義按倍數逐漸將溶液或細胞稀釋的技術。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞培養與細胞工程(二級學科)

    有限稀釋技術定義

    中文名稱有限稀釋技術英文名稱limiting dilution technique定  義一種細胞學技術。即通過不斷稀釋,至每個組分僅包括1個細胞,從而制備單個細胞組分。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)

    同位素稀釋法的相關介紹

      同位素稀釋法是一種應用放射性同位素(或穩定同位素)進行化學分析的一種方法。將一定量已知放射性比度(穩定同位素則用比豐度)的同位素或標記化合物加入試樣中,與被測物質均勻混和,待交換完全后,再用化學力一法分離出被測元素或化合物,提純并測定其放射性比度(或比豐度),按其放射性比度(或比豐度)的改變,根

    單克隆抗體技術的介紹

      單克隆抗體技術(monoclonal antibody technique) 1975年英國科學家Milstein和Kohler所發明,并獲得1984年諾貝爾醫學獎。 1984 德國人G. J. F.Kohler、阿根廷人C. Milstein[3]和丹麥科學家N. K. Jerne由于發展了單

    單克隆抗體的應用介紹

    1.檢驗醫學診斷試劑作為檢驗醫學實驗室的診斷試劑,單克隆抗體以其特異性強、純度高、均一性好等優點,廣泛應用于酶聯免疫吸附試驗、放射免疫分析、免疫組化和流式細胞儀等技術。并且單克隆抗體的應用,很大程度上促進了商品化試劑盒的發展。應用單克隆抗體制作的商品化試劑盒廣泛應用于:①病原微生物抗原、抗體的檢測;

    關于涂布平板法的實驗方法—-系列稀釋的介紹

      樣品稀釋液的制備 準確稱取待測樣品10g,放入裝有90ml無菌水并放有小玻璃珠的250ml三角瓶中,用手或置搖床上振蕩20min,使微生物細胞分散,靜置20-30s,即成10-1稀釋液;再用1ml無菌吸管,吸取10-1稀釋液lml,移入裝有9ml無菌水的試管中,吹吸3次,讓菌液混合均勻,即成10

    關于單克隆抗體技術的細胞篩選的介紹

      雜交瘤細胞在融合后2周左右即可篩選,即把分泌所需抗體的雜交瘤孔從眾多的孔中選出來,通常也稱為抗體檢測。抗體檢測的方法很多,通常根據所研究的抗原和 實驗室的條件而定。但作為雜交瘤篩選的抗體檢測方法必須具有快速、準備、簡便,便于一次處理大量樣品等特點。因為往往有幾百個樣品需要在短短幾個小時就報 告結

    關于單克隆抗體技術的重要意義介紹

      單克隆抗體(monoclonal antibody,Mab)技術是20世紀免疫學技術的一項里程碑式突破。該技術將免疫小鼠的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合生成雜交瘤細胞,這種雜交瘤細胞核內含有雙親細胞的染色體,繼承了親代細胞的特征。它既具有瘤細胞在體外培養中迅速增殖的能力,又具備免疫脾細胞合成和分

    稀釋平板測數法

    一、實驗目的了解稀釋平板計數的原理,掌握涂抹平板培養法和混合平板培養法,認識細菌、放線菌、霉菌的菌落特征。二、實驗原理? ? ??稀釋平板計數是根據微生物在固體培養基上所形成的單個菌落,即是由一個單細胞繁殖而成這一培養特征設計的計數方法,即一個菌落代表一個單細胞。計數時,首先將待測樣品制成均勻的系列

    稀釋平板測數法

    一、實驗目的了解稀釋平板計數的原理,掌握涂抹平板培養法和混合平板培養法,認識細菌、放線菌、霉菌的菌落特征。二、實驗原理稀釋平板計數是根據微生物在固體培養基上所形成的單個菌落,即是由一個單細胞繁殖而成這一培養特征設計的計數方法,即一個菌落代表一個單細胞。計數時,首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液,盡量

    單克隆抗體

    ·?????????Tips and hints for the storage of antibodies?(Synaptic Systems)·?????????Purification of IgG Using Protein A- or Protein G-Agarose(KPL)·????

    關于單克隆抗體藥物的簡介

      抗體是由B淋巴細胞轉化而來的漿細胞分泌的,每個B淋巴細胞株只能產生一種它專有的、針對一種特異性抗原決定簇的抗體。這種從一株單一細胞系產生的抗體就叫單克隆抗體(McAb),簡稱單抗。第一代單抗由Koehler和Milstein于1975年制備,它來源于小鼠的B細胞雜交瘤,但人體免疫系統可以識別鼠源

    單克隆抗體的克隆方法

    經過抗體測定的陽性孔,可以擴大培養,進行克隆,以得到單個細胞的后代分泌單克隆抗體。克隆的時間一般說來越早越好。因為在這個時期各種雜交瘤細胞同時旺盛生長,互相爭奪營養和空間,而產生指定抗體的細胞有被淹沒和淘汰的可能。但克隆時間也不宜太早,太早細胞性狀不穩定,數量少也易丟失。克隆化的陽性雜交瘤細胞,經過

    有限稀釋技術的特點

    中文名稱有限稀釋技術英文名稱limiting dilution technique定  義一種細胞學技術。即通過不斷稀釋,至每個組分僅包括1個細胞,從而制備單個細胞組分。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)

    有限稀釋技術的定義

    中文名稱有限稀釋技術英文名稱limiting dilution technique定  義一種細胞學技術。即通過不斷稀釋,至每個組分僅包括1個細胞,從而制備單個細胞組分。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)

    有限稀釋技術的定義

    中文名稱有限稀釋技術英文名稱limiting dilution technique定  義一種細胞學技術。即通過不斷稀釋,至每個組分僅包括1個細胞,從而制備單個細胞組分。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)

    關于平板菌落計數法的樣品的處理和稀釋的介紹

      1.平板菌落計數法的樣品的處理和稀釋— 操作方法:以無菌操作取檢樣25g(或25ml),放于225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(瓶內預置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內,經充分振搖或研磨制成1:10的均勻稀釋液。  固體檢樣在加入稀釋液后,最好置滅菌均質器中以8000~10000r/

    X射線光譜儀的稀釋法介紹

      稀釋法,在共存元素的影響大時,有適當的物質稀釋來減少其影響的方法,此方法多被用于試液試樣,但也有用于粉末試樣,還有為了增加稀釋效應而用原子序數大的物質來稀釋(重元素稀釋),玻璃熔片法和點滴法對減少共存元素的影響有限。

    關于單克隆抗體技術的細胞融合的介紹

      首先制備細胞培養基、 氨基喋呤(A)貯存液、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷(HT)貯存液等各種細胞生長所需的營養物質。然后制備髓瘤細胞和脾淋巴細胞,之后進行細胞融合。在細胞融合后選擇性培養過程中,由于大量骨髓瘤細胞和脾細胞相繼死亡,此時單個或少數分散的雜交瘤細胞多半不易存活,通常必須加入其他活細胞使之繁

    關于單克隆抗體細胞融合的過程介紹

      融合的方法很多,常用的有轉動法和離心法。融合時脾細胞和骨髓瘤細胞的比例為1:1至10:1不等。3:1或5:1最為常用。  1.試劑與材料  (1)供融合用的脾細胞及骨髓瘤細胞。  (2)1640培養液100ml。  (3)完全1640液100ml。  (4)2.5%FCS-1640液50ml。 

    關于單克隆抗體制備脾細胞的選擇介紹

      1.材料  (1)免疫過的血清抗體滴度高的Balb/c鼠。  單克隆抗體制備流程  單克隆抗體制備流程  (2)1640培養液(3)2.5%FCS-1640營養液  2.操作方法  (1)拉頸或用CO2處死小白鼠。  (2)將小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在無菌條件下取脾。  (

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