自旋標記法的方法介紹
自旋標記 (spin label), 很多物質的分子不表現電子自旋共振(ESR),但對這些分子,人工地使之與自由基(free radical)結合從而得以用ESR法來研究,獲得獨特的ESR信息,這就是自旋標記法。......閱讀全文
自旋標記法的方法介紹
自旋標記 (spin label), 很多物質的分子不表現電子自旋共振(ESR),但對這些分子,人工地使之與自由基(free radical)結合從而得以用ESR法來研究,獲得獨特的ESR信息,這就是自旋標記法。
自旋標記法的原理及方法特點
因自由基有不成對電子自旋,所以稱自旋標記(H.M.McConnell)。開始是用氯丙嗪陽離子自由基研究其與DNA的相互作用,后來則用穩定的硝酰(基)自由基類。有N-羥四甲基六氫吡啶(四氫吡咯)衍生物以及N-羥二甲基1,3-氧氮雜環戊烷衍生物等。有合成在標記物的局部含有反應性的官能團,使之與活體高分子
電子順磁共振譜儀自旋標記法
由美國的 H·M·麥康奈爾于1965年創立,系指將一種穩定的自由基(最常用者為氮氧自由基)結合到單個分子或處于較復雜系統內的分子上的特定部位,而從電子順磁共振波譜取得有關標記物環境的信息。在進行自旋標記時,應注意到盡量保持專一性和減少對天然系統的生物特性和分子特性引起的擾動。 自旋標記物有4個
改良過碘酸鈉標記法制備酶標抗體
HRP分子中與酶活性無關的糖基被過碘酸鈉氧化為醛基,再與抗體蛋白的氨基形成Schiff堿。為了防止酶蛋白的氨基與醛基發生自身偶聯,在標記前先用2,4-二硝基氟苯(DNFB)封閉酶蛋白中殘留的a-和e-氨基。酶與抗體的結合反應后,再加入硼氫化鈉還原成穩定的結合物。 (1) 取HRP 5mg溶
免疫電鏡膠體金標記法(簡稱金標法)
1、 包埋后染色 (超薄切片的金標記法)(1)超薄切片厚50~70nm左右,載于200~300網孔的鎳網上;(2)滴1%的H2O2液1滴于蠟板上,將網的載片面輕浮于液滴上10min至1h;(3)雙蒸水洗3次,每次10分鐘。第1、2次洗法如(2),浮于液面上,第3次以盛雙蒸水的注射器沿鎳網面沖洗,水流
末端標記法介紹DNA探針的標記方法
末端標記法不是將DNA進行全長標記,只在其5'端或3’端導入標記物進行部分標記。該標記方法可得到全長DNA探針,因為攜帶的標記分子較少,所以標記比活性不高。
常用酶標記法介紹
酶與抗體交聯,常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,標記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 , 取出
酶聯免疫吸附酶標記法的方法特點介紹
酶與抗體交聯,常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,標記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 , 取出
臨床物理檢查方法介紹眼震電圖描記法介紹
眼震電圖描記法介紹:?眼震電圖描記法(electronystagmography,ENG)用于前庭眼反射檢查,包括視動中樞檢查、位置試驗、冷熱試驗等,是診斷眩暈癥的重要手段。眼震電圖描記法正常值:?利用角膜(正電位)與視網膜(負電位)之間存在的電位差在眼球周圍形成的電場。眼球運動時周圍的電場隨之發生
雙鏈DNA探針標記法的介紹
分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于基因的鑒定、臨床診斷等方面。 雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。 切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到
Genome-Biology發文介紹RNA印記法
生物學家們逐漸意識到,RNA不只是DNA和蛋白之間的過渡產物,它對調節基因的表達有重要作用。深入研究RNA調控,能夠幫助科學家們進一步理解相關疾病。 賓夕法尼亞大學的科學家們開發了分析RNA調控的新方法,這一方法能夠有效獲得RNA與RNA結合蛋白(RBP)互作的所有位點。這一發表在Geno
雙鏈DNA探針標記法介紹
分子生物研究中,最常用的探針即為雙鏈DNA探針,它廣泛應用于基因的鑒定、臨床診斷等方面。雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。1.?切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將核苷酸連接到切口的
細胞增殖的檢驗方法:BrdU標記法
BrdU標記法1.細胞以1.5×105/ml細胞數接種于直徑35ml培養皿中(內放置一蓋玻片),培養1天,用含0.4%?FCS培養液同步化3天,使絕大多數細胞處于G0期。2.終止細胞培養前,加入BrdU(終濃度為30μg/L),37℃,孵育40min。3.棄培養液,玻片用PBS洗滌3次。4.甲醇/醋
脈沖標記法的定義
脈沖標記法是指一次性加入示蹤物,標記只持續數小時,之后在一定時間內測量示蹤物在土壤-植物系統中的分配比例。
金標試紙法檢測黃曲霉的方法介紹
金標試紙法,實際就是一種固相免疫分析法。其原理是利用抗體與抗原的特異性結合反應,可一步檢測黃曲霉素。該法可在5~10 min內完成對試樣中黃曲霉素的定性測定,具有簡單、快速的特點,且無須其他儀器設備的配合,既可在實驗室中進行檢測,也可在現場進行實地測定,但是其檢測的準確度、精度有待進一步的研究。
免疫酶標方法的方法原理
免疫酶標方法是繼免疫熒光后,于60年代發展起來的技術。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產物或具有一定電子密度的顆粒,通過光鏡或電鏡,對細胞表面和細胞內的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術是最常用的技術。本方法與免疫熒光技術相比的主要優點是:定位準確,
連續標記法的技術特點
連續標記法是指在植物生長某個生育期,甚至整個生育期內,對植物進行不間斷標記的一種方法。連續標記法有助于定量全部生育期或某一生育期全部投入,但由于成本高以及技術困難,運用受到限制。
微衛星標記法的特點
與其它標記技術相比,具有以下特點:首先,在每個微衛星DNA?兩端的序列多是相對保守的單拷貝序列,尤其在親緣關系相近的物種間是保守的,而且在一些緊密相關的物種中其重復單位和重復次數具有一定的相似性。其次,這些小的、串聯排列的重復序列經常是通過核苷酸鏈的滑動錯配或者其它未知的過程來改變它們的長度,從而導
實驗動物常用的標記法
常用的標記法有染色、耳緣剪孔、烙印、號牌等方法。二)烙印法用刺數鉗在動物耳上刺上號碼,然后用棉簽蘸著溶在酒精中的黑墨在刺號上加以涂抹,烙印前最好對烙印部位預先用酒精消毒。(三)針刺法用七號或八號針頭蘸取少量碳素墨水,在耳部、前后肢以及尾部等處刺入皮下,在受刺部位留有一黑色標記。該法適用于大小鼠、豚鼠
自旋軌道分裂是什么-簡述自旋軌道理論
在量子力學里,一個粒子因為自旋與軌道運動而產生的作用,稱為自旋-軌道作用(英語:Spin–orbit interaction),也稱作自旋-軌道效應或自旋-軌道耦合。最著名的例子是電子能級的位移。電子移動經過原子核的電場時,會產生電磁作用.電子的自旋與這電磁作用的耦合,形成了自旋-軌道作用。譜線
酶標法的相關介紹
酶標法是指使用 酶聯免疫吸附試驗( ELISA)來檢測HIV抗體。這種方法是根據酶免疫測定原理發展的一種技術,其基本方法分三類:間接法、雙抗原夾心法和抗體競爭法。 目前國內外主要使用的是第三代(雙抗原夾心法)試劑。血源篩查以第三代 ELISA為主,國際上有些國家和地區已經將第四代 ELISA試劑
英國研究確定黑洞自旋速度新方法
黑洞可以只用兩個基本特征來描述:質量和自旋。人們幾十年前就能測出黑洞質量,但要檢測其自旋速度還很困難,天文學家已用間接方法獲得了19個超大質量黑洞的自旋速度。據《自然》網站近日報道,英國天文學家報告稱,他們用了一種新方法來計算超大質量黑洞的自旋,比傳統方法更加直接。 傳統方法于1995年提
什么是酶標記法?
酶與抗體交聯,常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,標記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備。其標記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 ,
免疫標記法及其分類
免疫標記法及其分類1.熒光免疫法原理是應用一對單克隆抗體的夾心法。底物用磷酸-4-甲基傘形酮,檢測產物發出的熒光,熒光強度與Mb濃度呈正比,可在8min內得出結果。結果以Mb每小時釋放的速率表示(△Mb)表示。該法重復性好,線性范圍寬,具有快速、敏感、準確的特點。以雙抗夾心法為例,首先將特異性抗體與
質子自旋耦合的原因
在外磁場的作用下,質子是會自旋的,自旋的質子會產生一個小的磁矩,通過成鍵價電子的傳遞,對鄰近的質子產生影響。質子的自旋有兩種取向,假如外界磁場感應強度為自旋時與外磁場取順向排列的質子,使受它作用的鄰近質子感受到的總磁感應 強度為B0+B',自旋時與外磁場取逆向排列的質子,使鄰近的質子感受到的
關于活性氧分子熒光探針標記法的應用介紹
眾所周知,氧氣是生命運動過程中不可缺少的一種氣體,而細胞使用氧氣時會產生副產品,以高能氧氣分子形式存在的廢棄物質即為自由基。自由基會對人體組織和細胞結構造成損害,我們把這種損害稱為氧化應激,人體在利用氧氣過程中會加重自身的壓力。活性氧(ROS)是含有氧的化學活性分子,ROS是需氧細胞在代謝過程中
關于活性氧分子熒光探針標記法的應用介紹
眾所周知,氧氣是生命運動過程中不可缺少的一種氣體,而細胞使用氧氣時會產生副產品,以高能氧氣分子形式存在的廢棄物質即為自由基。自由基會對人體組織和細胞結構造成損害,我們把這種損害稱為氧化應激,人體在利用氧氣過程中會加重自身的壓力。活性氧(ROS)是含有氧的化學活性分子,ROS是需氧細胞在代謝過程中
金標試紙法檢測黃曲霉毒素的方法介紹
金標試紙法,實際就是一種固相免疫分析法。其原理是利用抗體與抗原的特異性結合反應,可一步檢測黃曲霉素。該法可在5~10 min內完成對試樣中黃曲霉素的定性測定,具有簡單、快速的特點,且無須其他儀器設備的配合,既可在實驗室中進行檢測,也可在現場進行實地測定,但是其檢測的準確度、精度有待進一步的研究。
放射免疫分析直接標記法與間接標記法的說法正確的是
正確答案:A解析:采用放射性碘制備標志物的基本原理是以放射性碘原子通過取代反應置換被標志物分子中酪氨酸或酪胺殘基以及組胺殘基上的氫原子。因此,凡蛋白質、肽類等化合物在結構上含有上述基團,均可用[SB125.gif]I直接標記。而對那些不含上述基團的甾體激素或藥物分子則必須在分子結構上連接相應基團才能
核磁共振中的自旋偶合與自旋分裂規律及特征
該文主要盤繞核磁共振波譜儀做的進一步剖析引見。 1.自旋巧合與自旋團結的根本概念 在有機化合物分子中,每一個原子核的四周除了電子以外,還存在著其他帶正電荷的原子核,其中的自旋量子數不等于零的原子核互相間存在著干擾作用,這種干擾作用不影響磁性核的化學位移,但對核磁共振圖譜的外形有著顯著